GPC凈化-GC-MS法測(cè)定甜玉米中17種有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留

◎林剛健，楊 挺，方如意

（臺(tái)州市食品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，浙江 臺(tái)州 318000）

有機(jī)氯類農(nóng)藥（OCPs）是一類高效廣譜殺蟲劑，廣泛應(yīng)用于殺滅農(nóng)業(yè)害蟲，曾是各國殺蟲劑中使用最廣泛的一大類[1]。這類農(nóng)藥化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，脂溶性強(qiáng)，殘效期長，易在體內(nèi)蓄積，造成慢性中毒，嚴(yán)重危及人體健康，果蔬中的農(nóng)藥殘留問題近年來越來越引起人們重視。目前常用的果蔬中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留分析方法是混合有機(jī)溶劑提取、濃硫酸凈化、氣相分析[2]，此方法的缺點(diǎn)是操作復(fù)雜，分析時(shí)間長，溶劑用量大，環(huán)境污染重。因此，有必要建立一種簡(jiǎn)單、快速測(cè)定果蔬中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量方法。

凝膠滲透色譜作為一種自動(dòng)化的分離技術(shù)，在農(nóng)藥殘留分析中得到了推廣和應(yīng)用[3-5]。本研究運(yùn)用凝膠滲透色譜替代硫酸凈化，有效地克服了硫酸凈化回收率偏低的難題，建立的氣相色譜-質(zhì)譜分析方法，具有操作簡(jiǎn)便、分析速度快、分離效能高、檢測(cè)靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，適合于甜玉米中多種痕量有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定。

1 材料與方法

1.1 儀器和設(shè)備

HPSE-EVS 高效壓力溶劑萃取系統(tǒng)（萊伯泰科公司）；Auto Clean 全自動(dòng)凝膠滲透系統(tǒng)（萊伯泰科公司）：具可變波長紫外檢測(cè)器，高效不銹鋼凝膠凈化柱；Auto EVA-60 全自動(dòng)平行濃縮儀（?？苾x器有限公司）；N-EVAP-24 氮吹儀（美國Organomation）；7890A-5975C 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國Agilent公司）。

1.2 材料與試劑

乙腈（色譜純，德國Merck）；乙酸乙酯（色譜純，德國Merck）；環(huán)己烷（色譜純，德國Merck）；正己烷（色譜純，德國Merck）；17 種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（100 μg·mL-1，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所）；有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)中間液（5 mg·L-1，溶劑為正己烷）。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線

分別從有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)中間液移取4 μL、10 μL、20 μL、50 μL 和100 μL 至1 mL 容量瓶中，正己烷定容至刻度，標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為20 ng·mL-1、50 ng·mL-1、100 ng·mL-1、250 ng·mL-1和500 ng·mL-1.

1.4 方法

1.4.1 樣品提取

稱取10 g 試樣（精確至0.01 g）與10 g 硅藻土混合，移入加速溶劑萃取儀的34 mL 萃取池中，在10.34 MPa 壓力、80 ℃條件下，加熱5 min，用乙腈靜態(tài)萃取3 min，循環(huán)2 次，然后用池體積60%的乙腈（20.4 mL）沖洗萃取池，并用氮?dú)獯祾?00 s。萃取完畢，將萃取液混勻，取萃取液體積的1/4 待凈化，萃取液收集到60 mL 收集管中。

1.4.2 濃縮

將收集管置于氮吹儀中，35 ℃溫度下濃縮到近干，用乙酸乙酯-環(huán)己烷混合溶劑定容至2 mL。1.4.3 凈化

將樣液過0.22 μm 濾膜，進(jìn)行凝膠凈化并收集，將收集液置于濃縮儀中，在溫度35 ℃、壓力4 psi 條件下濃縮至1 mL，上機(jī)分析。

1.4.4 儀器條件

（1）凝膠色譜條件。色譜柱：Bio-Beads SX3（萊伯泰科）；流動(dòng)相：乙酸乙酯和環(huán)己烷1∶1（體積比）；紫外檢測(cè)器波長：254 nm；上樣體積：2 mL；流速：5 mL·min-1；程序時(shí)間：25 min；收集時(shí)間：10～20 min；將收集液置于濃縮儀中，溫度35 ℃：壓力4 psi；濃縮至1 mL，上機(jī)分析。

（2）GC-MS 條件。色譜柱：DB-5MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm；進(jìn)樣口溫度：250 ℃；不分流進(jìn)樣；載氣流速：1.0 mL·min-1；恒流模式；進(jìn)樣量：1.0 μL；柱溫：60 ℃保持2 min，以15 ℃·min-1升至210 ℃；再以6 ℃·min-1升至230 ℃，保持8 min；后程序升溫至280 ℃保持5 min。

離子源：電子轟擊源，70 eV；四極桿溫度：150 ℃；離子源溫度：230 ℃；輔助加熱溫度：280 ℃；溶劑延遲時(shí)間：8.0 min；掃描模式：SIM?；衔锉Ａ魰r(shí)間，定量和定性離子見表1。

表1 17 種有機(jī)氯化合物保留時(shí)間，定量和定性離子表

2 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析

2.1 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化

2.1.1 濃縮溫度優(yōu)化

本次實(shí)驗(yàn)在濃縮環(huán)節(jié)分別采取45 ℃、40 ℃、35 ℃，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)并測(cè)定回收率。結(jié)果如表2所示。

表2 17 種有機(jī)氯化合物在不同溫度濃縮條件下的回收率表

樣品在45 ℃、40 ℃、35 ℃條件下進(jìn)行濃縮，回收率分別為26.8%～95.0%、45.8%～80.7%、80.8%～112.9%，本方法采用35 ℃進(jìn)行濃縮。

2.1.2 氮吹針角度優(yōu)化

在35 ℃條件下，分別采用氮吹針垂直于液面和氮吹針緊貼管壁，兩種角度進(jìn)行濃縮，發(fā)現(xiàn)后者回收率更高，所以采用氮吹針傾斜進(jìn)行濃縮。

2.2 方法驗(yàn)證

2.2.1 有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)液總離子流譜圖

17 種有機(jī)氯化合物標(biāo)準(zhǔn)液總離子流譜圖如圖1所示。

圖1 有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)液總離子流譜圖（50 ng·mL-1）

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性和檢出限

對(duì)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行稀釋，依次配制成20 ng·mL-1、50 ng·mL-1、100 ng·mL-1、250 ng·mL-1和500 ng·mL-1的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣。以工作液濃度為橫坐標(biāo)以峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得出相應(yīng)的相關(guān)系數(shù)（R2），并且根據(jù)圖譜噪聲的3 倍得出化合物的檢出限。17 種有機(jī)氯化合物的相關(guān)系數(shù)和檢出限見表3，可見17 種化合物的相關(guān)系數(shù)均在0.99 以上。

表3 17 種有機(jī)氯化合物相關(guān)系數(shù)和檢出限表

2.2.3 精密度試驗(yàn)

對(duì)17 種有機(jī)氯化合物進(jìn)行6 組平行樣加標(biāo)回收，加標(biāo)濃度為50 ng·mL-1，通過對(duì)6 組平行樣圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析計(jì)算，得出相應(yīng)化合物的加標(biāo)平均值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），具體數(shù)據(jù)見表4。通過表4 可見17 種有機(jī)氯化合物RSD為2.7%～9.6%。

表4 17 種有機(jī)氯化合物精密度表

3 結(jié)論

本文建立了應(yīng)用GPC凈化—GC/MS法測(cè)定甜玉米中多種痕量有機(jī)氯農(nóng)藥的方法。樣品在35 ℃條件下采用氮吹針傾斜萃取濃縮、凝膠滲透色譜凈化，GC/MS檢測(cè)和確證，50 ng·mL-1濃度加標(biāo)回收。本方法回收率為76.2%～109.8%，RSD為2.7%～9.6%，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)0.996 2～0.999 0，該方法具有操作簡(jiǎn)便、分析速度快、分離效能高、檢測(cè)靈敏度高等特點(diǎn)，適合于甜玉米中多種痕量有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定。