EmAb、ACA及PDW聯(lián)合檢測(cè)在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值

韋志萍 林忠

作者單位：廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西，南寧530022

美國(guó)生殖醫(yī)學(xué)學(xué)會(huì)對(duì)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的定義是：指連續(xù)出現(xiàn)2 次及2 次以上妊娠丟失［1］。目前，部分復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因尚未明確，消除復(fù)發(fā)性流產(chǎn)給患者帶來(lái)的困擾，確保產(chǎn)婦順利生產(chǎn)是當(dāng)前臨床面臨的難題。有學(xué)者研究指出，產(chǎn)婦自身抗體水平異常與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生存在密切聯(lián)系，抗子宮內(nèi)膜抗體（Anti?endometrial antibody，EmAb）、抗心磷脂抗體（Anticardiolipin antibody，ACA）均為自身抗體群，可抑制前列腺素生成，激活血小板的作用，當(dāng)血液處于高凝狀態(tài)時(shí)，會(huì)引發(fā)胎盤功能不足，導(dǎo)致對(duì)胎兒供氧不足，最終引發(fā)胎兒死亡［2?3］。血小板分布寬度（Platelet distribution width，PDW）是反映血小板活化程度、血栓進(jìn)展程度的重要指標(biāo)［4］。本研究以分析EmAb、ACA 及PDW 聯(lián)合檢測(cè)在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值?，F(xiàn)研究報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年7月至2020年6月本院收治的106 例復(fù)發(fā)性流產(chǎn)產(chǎn)婦作為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《復(fù)發(fā)性流產(chǎn)診治的專家共識(shí)》［5］，經(jīng)B超檢查確定為流產(chǎn)，且自然流產(chǎn)次數(shù)在2 次以上；②夫婦染色體核型分析正常；③生殖內(nèi)分泌激素水平正常范圍內(nèi)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性肌炎等自身免疫性疾病者；②合并妊娠糖尿病、高血壓等影響EmAb、ACA 及PDW水平的疾病者；③生殖器官感染或畸形。

選取同期在本院進(jìn)行孕檢的健康女性106 例設(shè)為對(duì)照組，入選孕婦均否認(rèn)自然流產(chǎn)史，無(wú)自身免疫性疾病。2 組產(chǎn)婦一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，研究對(duì)象均簽署知情同意書。

表1 2 組患者基線資料比較（±s）Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups（±s）

表1 2 組患者基線資料比較（±s）Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups（±s）

組別觀察組對(duì)照組t 值P 值n 106 106自然流產(chǎn)產(chǎn)次（次）2.01±0.22--平均年齡（歲）25.41±3.31 25.48±3.39 0.152 0.879體質(zhì)質(zhì)量指數(shù)（kg/m2）26.08±2.31 26.12±2.37 0.124 0.901停經(jīng)時(shí)間（周）10.38±0.95 10.31±0.90 0.551 0.582---

1.2 方法

1.2.1 PDW 水平檢測(cè)方法

對(duì)照組于體檢當(dāng)日清晨空腹采取肘靜脈血5 mL，觀察組患者于入院當(dāng)日清晨空腹采取肘靜脈血5 mL。乙二胺四乙酸二鉀抗凝，室內(nèi)質(zhì)控品恢復(fù)至室溫。采用日本希森美康醫(yī)用電子有限公司生產(chǎn)的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（型號(hào)：SysmexXN?1000）檢測(cè)PDW 水平，配套試劑盒購(gòu)自希森美康醫(yī)用電子有限公司（批號(hào)20190322）。PDW 參考范圍值：9～13（%）［6］。

1.2.2 ACA 及EmAb 水平檢測(cè)方法

采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)2 組血清ACA 水平，試劑盒購(gòu)自北京源德生物醫(yī)學(xué)工程有限公司，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。應(yīng)用ELISA 對(duì)2 組血清EmAb 水平檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自鄭州安圖生物工程有限公司，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。應(yīng)用波長(zhǎng)為450nm 的酶標(biāo)儀對(duì)實(shí)驗(yàn)孔光密度值（Optical density value，OD）進(jìn)行測(cè)定，當(dāng)OD 值大于或等于l 臨界值則可判斷為陽(yáng)性，反之則判斷為陰性［7］。

1.3 觀察指標(biāo)

比較2 組EmAb、ACA 及PDW 表達(dá)情況，并比較不同流產(chǎn)次數(shù)的產(chǎn)婦血清mAb、ACA 及PDW水平；分析EmAb、ACA 及PDW 表達(dá)水平與流產(chǎn)次數(shù)的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用（）表示，組間比較行t檢驗(yàn)；多組間比較行F檢驗(yàn)；繪制ROC 曲線，并計(jì)算ROC 曲線下面積等指標(biāo)，以分析EmAb、ACA 及PDW 檢測(cè)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)妊娠期婦女發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值；以P<0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2 組EmAb、ACA 及PDW 表達(dá)情況比較

觀察組EmAb 及ACA 陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組，PDW 表達(dá)水平高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

表2 2 組EmAb、ACA 及PDW 表達(dá)情況比較［n（%），（±s）］Table 2 Comparison of expression of EMAb，ACA and PDWbetween 2 groups［n（%），（±s）］

表2 2 組EmAb、ACA 及PDW 表達(dá)情況比較［n（%），（±s）］Table 2 Comparison of expression of EMAb，ACA and PDWbetween 2 groups［n（%），（±s）］

組別觀察組對(duì)照組t/χ2值P 值n 106 106陰性57（53.77）96（90.57）陰性62（58.49）100（94.34）--EmAb陽(yáng)性49（46.23）10（9.43）35.721<0.001 ACA陽(yáng)性44（41.51）6（5.66）37.794<0.001 PDW（%）16.41±3.89 11.23±2.09 12.077 0.001

2.2 觀察組不同流產(chǎn)次數(shù)EmAb、ACA 及PDW 表達(dá)情況比較

EmAb、ACA 陽(yáng)性表達(dá)率：流產(chǎn)4 次>流產(chǎn)3 次>流產(chǎn)2 次，PDW 表達(dá)水平：流產(chǎn)4 次>流產(chǎn)3 次>流產(chǎn)2 次，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

表3 觀察組不同流產(chǎn)次數(shù)EmAb、ACA 及PDW 表達(dá)情況比較［n（%），（±s）］Table 3 Comparison of EMAb，ACA and PDW expression in observation group with different abortion times［n（%），（±s）］

表3 觀察組不同流產(chǎn)次數(shù)EmAb、ACA 及PDW 表達(dá)情況比較［n（%），（±s）］Table 3 Comparison of EMAb，ACA and PDW expression in observation group with different abortion times［n（%），（±s）］

注：與流產(chǎn)3 次比較，aP<0.005。

次數(shù)2 次3 次4 次F/χ2值P 值例數(shù)（n=106）31 40 35 EmAb陽(yáng)性（n=49）2（4.08）13（26.53）34（69.39）a 4.457 0.035陰性（n=57）29（50.88）27（47.37）1（1.75）陰性（n=62）30（48.39）32（51.61）0（0.00）--ACA陽(yáng)性（n=44）1（2.27）8（18.18）35（79.55）a 8.634 0.003 PDW（%）15.62±1.89 17.45±2.08 19.22±2.33a 23.850<0.001

2.3 EmAb、ACA 及PDW 檢測(cè)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)妊娠期婦女發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC 曲線分析結(jié)果顯示：EmAb、ACA、PDW 單獨(dú)

及三者聯(lián)合檢測(cè)曲線下面積分別為0.878、0.834、0.855、0.945，各指標(biāo)曲線下面積以聯(lián)合檢測(cè)最大（P<0.005），見表4 及圖1。

表4 EmAb、ACA 及PDW 檢測(cè)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)妊娠期婦女發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值Table 4 the predictive value of EMAb，ACA and PDW detection and their combined detection for recurrent abortion in pregnant women

圖1 EmAb、ACA 及PDW 檢測(cè)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)妊娠期婦女發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值Figure 1 the predictive value of EMAb，ACA and PDW detection and their combined detection for recurrent abortion in pregnant women

3 討論

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)是育齡期女性不育疾病中的頑疾，染色體因素、內(nèi)分泌因素、感染因素、生殖器解剖等多種因素均會(huì)引發(fā)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)。隨著廣大學(xué)者對(duì)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)作用機(jī)制研究的不斷深入，目前認(rèn)為復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者存在潛在的自身免疫功能的失調(diào)，因此復(fù)發(fā)性流產(chǎn)也稱為“亞臨床自身免疫疾病”［8］。

有學(xué)者研究報(bào)道，ACA 是引起反復(fù)流產(chǎn)、死胎、妊娠高血壓疾病和胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限等最主要的自身抗體［9］。本研究中，觀察組ACA 陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于正常孕婦，流產(chǎn)4 次的患者ACA 陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于流產(chǎn)2 次及流產(chǎn)3 次的患者，這一研究結(jié)果與既往文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致［10?11］。ACA是一種以血小板和內(nèi)皮細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷的心磷脂作為靶抗原的自身抗體，位于細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)層，能夠避免被免疫系統(tǒng)所識(shí)別［12］。ACA 激活血小板的活性，促使血小板黏附、聚集，并釋放出血栓素A2 引起血小板凝聚，最終形成血栓，同時(shí)ACA高表達(dá)還會(huì)促使胎盤血管收縮和血栓形成，胎盤的血流量減少，致使胎兒氧供不足而死亡［13］。可見，ACA 可作為檢測(cè)不良妊娠結(jié)局的重要指標(biāo)。

PDW 是反映血小板大小分布的指標(biāo)，通過(guò)形態(tài)及功能而發(fā)生變化，是血小板活化的特異性標(biāo)志物［13］。已有較多文獻(xiàn)報(bào)道，PDW 與心腦血管疾病、糖尿病等代謝性疾病的發(fā)生有著密切聯(lián)系［14］。Shukla 等學(xué)者［15］報(bào)道，在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者，PDW 表達(dá)水平會(huì)明顯高于正常孕婦，且PDW 表達(dá)量會(huì)隨著患者流產(chǎn)次數(shù)增加而提高，這一研究結(jié)果與本研究結(jié)果一致。

本研究經(jīng)采用ROC 曲線分析流產(chǎn)次數(shù)與EmAb、ACA 及PDW 檢測(cè)及三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)妊娠期婦女發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值，結(jié)果顯示各指標(biāo)曲線下面積以聯(lián)合檢測(cè)最大，這一研究結(jié)果與Ransing 等學(xué)者［16］報(bào)道結(jié)果一致。EMAb 存在于子宮內(nèi)膜中，是一種特異性的自身抗體，子宮內(nèi)膜是胚胎著床及發(fā)育的重要場(chǎng)所，內(nèi)膜的功能直接影響孕婦的妊娠情況［17］。可見盡早對(duì)妊娠期婦女加強(qiáng)EmAb、ACA 及PDW 聯(lián)合檢測(cè)，可預(yù)測(cè)其妊娠結(jié)局，有利于臨床盡早確定針對(duì)性的診治方案，從而改善妊娠結(jié)局。

綜上所述，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)次數(shù)越多，則妊娠期婦女血清AcA、EMAb、PDW 水平越高。血清AcAb、EMAb、PDW 水平檢測(cè)對(duì)孕早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的診斷具有重要臨床意義，三者可作為預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的敏感性指標(biāo)。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病因非常復(fù)雜，且尚未有明確定論，后續(xù)筆者將擴(kuò)大樣本量，研究其他免疫性因素與該病之間的關(guān)系，以進(jìn)一步完善基礎(chǔ)研究及臨床實(shí)踐研究，為臨床療效治療提供理論依據(jù)。