Nupr1、HE4及AFP表達(dá)與卵巢癌病理參數(shù)、預(yù)后生存的關(guān)系

陳燕萍 陳婧 洪麗玲 陳慧

作者單位：中國(guó)人民解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第九○九醫(yī)院婦產(chǎn)科，福建，漳州363000

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，近年來(lái)隨著研究的深入，卵巢惡性腫瘤的基礎(chǔ)研究和臨床診治方面均取得很大的進(jìn)展，但其5年生存率仍未見明顯提高［1］。腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)在卵巢癌發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用。核蛋白1（nuclear protein 1，Nupr1）是一種高堿性、多功能的小分子蛋白質(zhì)，參與促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和再生的應(yīng)激反應(yīng)，多項(xiàng)研究均檢測(cè)出其在惡性腫瘤患者中存在高表達(dá)現(xiàn)象［2］。人附睪蛋白4（human epidiymis protein 4，HE4）和胎蛋白（alpha fetoprotein，AFP）作為常見的腫瘤相關(guān)標(biāo)志物，在卵巢癌的診治和預(yù)后生存評(píng)估中的作用引發(fā)熱議［3］。本研究就Nupr1、HE4 及AFP 表達(dá)與卵巢癌病理參數(shù)、預(yù)后生存生存的關(guān)系進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2018年12月本院收治的90例卵巢癌和80 例卵巢良性病變患者，分別作為卵巢癌組和良性病變組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①卵巢癌組滿足卵巢癌診療標(biāo)準(zhǔn)［4］；②良性病變組滿足卵巢良性病變?cè)\療標(biāo)準(zhǔn)［5］；③臨床及隨訪資料完整者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有嚴(yán)重的免疫系統(tǒng)疾患、血液循環(huán)系統(tǒng)障礙以及結(jié)締組織疾病者；②既往存在生殖系統(tǒng)手術(shù)史者；③入組前存在子宮放化療史者。兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象均知情同意。

表1 兩組一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general data between 2 groups（±s）

表1 兩組一般資料比較（±s）Table 1 Comparison of general data between 2 groups（±s）

組別卵巢癌組良性病變組t 值P 值n 90 80--平均年齡（歲）54.16±4.25 54.30±4.33 0.212 0.832體質(zhì)指數(shù)（kg/㎡）22.10±2.54 22.16±2.55 0.153 0.878孕次（次）2.25±1.03 2.28±1.01 0.191 0.849產(chǎn)次（次）1.57±0.49 1.59±0.41 0.287 0.775

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 Nupr1 蛋白檢測(cè)

Nupr1 蛋白檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京中杉生物技術(shù)公司，操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。Nupr1 蛋白在乳腺癌中顯示胞漿、胞核著棕黃色顆粒；采用Volm 雙評(píng)分法進(jìn)行判定，在染色均勻的腫瘤區(qū)，選取5 個(gè)高倍鏡視野（×400）：按陽(yáng)性細(xì)胞百分率（A 值）評(píng)分：1 分，2 分，3 分；按染色強(qiáng)度（B 值）評(píng)分：不著色為0 分，淺棕黃色為1 分，棕黃色為2 分，棕褐色為3分。綜合染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與染色強(qiáng)度判斷結(jié)果：陰性（-）：0 分，弱陽(yáng)性（+）：1～2 分，中度陽(yáng)性（++）：3～4分，強(qiáng)陽(yáng)性（+++）：5～6 分；兩種計(jì)分的乘積為每例的加權(quán)分?jǐn)?shù)，加權(quán)分?jǐn)?shù)為0為陰性，其余均為陽(yáng)性［5］。

1.2.2 HE4 及AFP 檢測(cè)

采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)，儀器選擇Elec?sys2010 羅氏自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光分析儀，試劑盒購(gòu)自上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司，嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作。血清HE4 陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為>140 pmol/mL，AFP陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為>55 U/L［6?7］。

1.3 隨訪方法

所有卵巢癌病例主要是住院或門診復(fù)查，小部分采用電話方式隨訪觀察。隨訪時(shí)間為2年，隨訪截止于死亡或到2020年12月31日。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，影響卵巢癌患者預(yù)后生存的相關(guān)因素采用非條件單因素和多因素Logistic 回歸模型分析，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組Nupr1、HE4 及AFP 表達(dá)比較

卵巢癌組Nupr1、HE4及AFP陽(yáng)性表達(dá)率均高于良性病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

表2 2 組Nupr1、HE4 及AFP 表達(dá)比較［n（%）］Table 2 Comparison of expression of nupr1，HE4 and AFP in two groups［n（%）］

2.2 不同臨床病理特征患者Nupr1、HE4 及AFP表達(dá)情況

FIGO 分期：Ⅲ+Ⅳ期、分化程度：低分化者Nupr1、HE4 及AFP 陽(yáng)性表達(dá)率均高于FIGO 分期：Ⅰ+Ⅱ期、分化程度：中高分化者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

表3 不同臨床病理特征患者Nupr1、HE4 及AFP 表達(dá)情況［n（%）］Table 3 expression of nupr1，HE4 and AFP in patients with different clinicopathological characteristics［n（%）］

2.3 96 例卵巢癌患者預(yù)后生存情況

截至隨訪2年結(jié)束，90 例卵巢癌患者死亡51例，存活39 例，存活率為43.33%。

2.4 影響卵巢癌患者預(yù)后生存單因素分析

經(jīng)非條件單因素Logistic 回歸模型分析，生存組與死亡組年齡、病理類型、有無(wú)腹水者比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），兩組FIGO 分期、組織分化程度、淋巴轉(zhuǎn)移情況及Nupr1、HE4 和AFP 陽(yáng)性表達(dá)比較差具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表4。

表4 影響卵巢癌患者預(yù)后生存單因素分析［n（%）］Table 4 single factor analysis on prognosis of patients with ovarian cancer［n（%）］

2.5 影響卵巢癌患者預(yù)后生存多因素分析

經(jīng)非條件多因素Logistic 回歸模型分析，存在淋巴轉(zhuǎn)移、Nupr1、HE4 和AFP 陽(yáng)性為影響卵巢患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P<0.05）。見表5。

表5 影響卵巢癌患者預(yù)后生存多因素分析Table 5 multivariate analysis of prognostic factors in patients with ovarian cancer

3 討論

中國(guó)最新卵巢癌發(fā)病與死亡數(shù)據(jù)分析顯示，卵巢癌發(fā)病率約為6.47/10 萬(wàn)，死亡率約為2.74/10萬(wàn)［8］。本研究中90 例卵巢癌患者截止隨訪2年結(jié)束，生存率僅為43.33%，如何提高卵巢癌患者生存時(shí)間已成為臨床關(guān)注焦點(diǎn)。流行病學(xué)研究表明，婦科炎癥、多囊卵巢綜合征和子宮內(nèi)膜異位癥是卵巢癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素［9］。

Nupr1 為一種廣泛分布于體內(nèi)的應(yīng)激誘導(dǎo)蛋白，具有轉(zhuǎn)錄活性，可通過(guò)參與不同的胞內(nèi)信號(hào)途徑發(fā)揮不同的功能，并且已有大量研究證實(shí)其在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過(guò)程起重要作用［10］。不同類型的惡性腫瘤細(xì)胞，Nupr1 調(diào)控細(xì)胞增殖能力有所不同。Patricia 等［11］研究發(fā)現(xiàn)，Nupr1 可以在人類乳腺癌發(fā)展的早期發(fā)揮促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的作用，且與乳腺癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后生存不良相關(guān)，這提示Nupr1可能是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)的關(guān)鍵蛋白。本研究結(jié)果提示Nupr1 在卵巢癌中具有促腫瘤作用，其可能是腫瘤治療的潛在靶點(diǎn)。

HE4 是B7 家族成員，是一種與附睪和生殖特異度相關(guān)的蛋白，也是近年發(fā)現(xiàn)的新型卵巢癌標(biāo)志物［12］。一般情況下，血清HE4 在正常成人中的表達(dá)水平較低，惡性腫瘤由于基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控發(fā)生異常，沉默基因異?；钴S，導(dǎo)致早期沉默的HE4基因開始轉(zhuǎn)錄和翻譯，表現(xiàn)為其表達(dá)狀態(tài)的異常［13］。AFP 是胚胎時(shí)期由卵黃囊產(chǎn)生的一種特殊糖蛋白，是胎兒血清最常見的組成成分。當(dāng)卵巢癌發(fā)生時(shí)，AFP基因被腫瘤細(xì)胞激活，血清內(nèi)AFP 濃度升高，其體內(nèi)水平含量的高低與腫瘤生物學(xué)特性、分化程度及病情的發(fā)展程度均具有一定的相關(guān)性。有關(guān)學(xué)者認(rèn)為，AFP 可作為診斷卵巢癌主要的特異性生化指標(biāo)。本研究結(jié)果Logistic 回歸模型分析提示Nupr1、HE4 和AFP 在卵巢癌中過(guò)表達(dá)可能參與癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲，促進(jìn)卵巢癌進(jìn)展。

綜上所述，Nupr1、HE4 及AFP 在卵巢癌患者中呈高表達(dá)狀態(tài)，三者異常表達(dá)與患者臨床病理特征及預(yù)后生存有密切關(guān)系，可作為預(yù)測(cè)患者預(yù)后生存的有效指標(biāo)。