碘難治性甲狀腺癌中NIS表達水平分析

梁智欣，王 朗，周麗珊，陳 榕，何 煒，唐安戊（通訊作者）

（廣州中醫(yī)藥大學金沙洲醫(yī)院核醫(yī)學部PET-CT中心 廣東 廣州 510168）

甲狀腺癌是內分泌系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤類型，其發(fā)病率呈逐年增高趨勢，同時晚期甲狀腺癌的死亡率亦呈增高趨勢，已成為嚴重危害人類健康的重大疾病[1]。甲狀腺癌臨床上主要類型為甲狀腺濾泡癌（follicular thyroid cancer, FTC）、乳頭狀癌（papillary thyroid cancer, PTC）及嗜酸細胞腫瘤（Hürthle cell thyroid tumor），約占全部類型的90%，這三類癌細胞均有不同程度的分化，故稱為分化型甲狀腺癌（differentiated thyroid cancer, DTC）。分化型甲狀腺癌中絕大多數患者經過規(guī)范化治療后癌細胞擴散程度減輕，預后良好，但仍有接近1/4患者出現遠處轉移，這部分患者的癌細胞形態(tài)和功能都發(fā)生退化，甚至到達未分化狀態(tài)，此時細胞攝碘能力喪失，臨床上I131療法療效甚微，發(fā)展為碘難治性DTC（radioiodine refractorydifferentiated thyroid cancer, RAIR-DTC）[2]，不僅如此，這部分患者平均生存時間短、死亡率高，對于傳統(tǒng)療法如手術或內分泌治療也不太敏感，臨床預后很差，故對于RAIR-DTC攝碘能力丟失的發(fā)生機制進行深入探索有助于發(fā)現治療RAIR-DTC的新靶點，對于提高患者生存、改善患者生存質量具有重要意義。

Na+/I轉運體（NIS）是一種糖蛋白，也被稱為碘泵，位于甲狀腺濾泡上皮細胞的細胞膜上。NIS參與碘的吸收過程，并在碘的運輸中起到限速作用。在正常人體內，甲狀腺組織中NIS的表達水平高于其他組織[3]。然而，在部分難治性甲狀腺癌患者中由于NIS基因定位障礙和NIS蛋白表達水平降低，碘吸收能力減少甚至完全喪失，可能是導致I131治療效果差和預后不良的主要原因。通過改善NIS的功能定位和表達水平，可提高甲狀腺癌組織對碘的吸收能力[4]。因此，在本研究中，我們旨在探討RAIR-DTC患者甲狀腺癌細胞中NIS的表達水平。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2017年6月—2020年6月就診于我院普通外科，確診為碘難治性分化型甲狀腺癌患者共126例作為研究組，另選取同期碘治療有效分化型甲狀腺癌患者126例作為對照組。

1.2 納排標準

（1）納入標準：行甲狀腺全切術且病理診斷明確分化型甲狀腺癌患者；術后應用I131進行治療；臨床資料收集完善。（2）排除標準：有嚴重心臟、肝臟、腎臟疾病者；合并有其他部位腫瘤患者；基礎狀態(tài)差，不能配合完成相關資料收集者。（3）碘難治性甲狀腺癌診斷標準：根據碘難治性分化型甲狀腺癌的診治管理共識（2019年版）[5]：在無外源性碘負荷干擾的情況下，促甲狀腺激素（thyroid-stimulating hormone, TSH）刺激狀態(tài)（＞30mIU/L）時，出現下列情形之一即可界定為RAIR-DTC：①轉移灶在清甲成功后的首次I131治療后全身顯像中即表現為不攝碘，致其無法從后續(xù)的I131治療中獲益；②原本攝碘的功能性轉移灶經I131治療后逐漸喪失攝碘能力；③部分轉移灶攝碘，而部分轉移灶不攝碘，且可被18F-FDG PET/CT、CT或MRI等其他影像學檢查手段所顯示；④攝碘轉移灶在經過多次I131治療后雖然保持攝碘能力但仍在1年內出現病情進展，包括病灶逐漸增長、出現新發(fā)病灶、血清甲狀腺球蛋白（thyrogloblin, Tg）持續(xù)上升等。

1.3 檢查方法

免疫組化檢測NIS的含量。取患者腫瘤組織制作石蠟切片，觀察腫瘤細胞形態(tài)（HE染色）。脫蠟，消除 H2O2活性，封閉，一抗孵育，二抗孵育，DAB顯色，復染，脫水，透明，封片。觀察結果。

1.4 觀察指標

NIS在細胞內表達。表達水平判斷：陽性細胞數：比例＞75%為4分，51%～75%為3分，26%～50%為2分，10%～25%為1分，＜10%為0分；染色：深棕或褐色3分，棕黃色2分，淺黃色1分；陽性判斷：陽性細胞數評分×染色深度評分，≥3分為陽性，＜3分為陰性。比較研究組和對照組的陽性率和陽性積分。評估納入患者SPECT-CT碘131顯像情況，SPECT-CT所用設備為西門子Intevo Bold。

1.5 統(tǒng)計學方法

使用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析，所有值以百分數和平均值±標準差表示。數據分析使用校正t檢驗。P＜0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 患者一般臨床資料

研究組126例患者中男性53例，女性73例，年齡介于38～77歲之間，平均年齡（51.21±3.87）歲；對照組男性60例，女性66例，年齡介于42～76歲之間；平均年齡（52.01±3.73）歲。兩組患者的一般臨床資料之間無統(tǒng)計學差異，可進行研究。

2.2 兩組患者NIS陽性率及陽性積分比較

NIS全部表達在甲狀腺濾泡胞漿內。如表1所示，研究組NIS陽性率為32.54%，對照組NIS陽性率為100%，顯著高于研究組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；對照組NIS陽性積分顯著高于研究組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表1 兩組NIS陽性率及陽性積分

2.3 評估兩組患者SPECT-CT碘131顯像情況

研究組SPECT-CT碘131顯像顯著低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組SPECT-CT碘131顯像情況

2.4 兩種病理類型的NIS陽性率及陽性積分

將研究組進一步根據病理類型分為甲狀腺乳頭狀癌（共88例，男46例，女42例）和甲狀腺濾泡癌（共38例，男21例，女17例），比較兩種病理類型的NIS陽性率及陽性積分，兩組NIS陽性率及陽性積分均明顯偏低，兩組間統(tǒng)計學無差異，見表3。

表3 不同病理類型甲狀腺癌NIS陽性率及陽性積分

3 討論

NIS是一種糖蛋白，位于上皮細胞膜上，其基因位于19號染色體短臂上。NIS通過鈉-鉀泵將碘帶入細胞質，對維持甲狀腺對碘的吸收能力有重要作用，同時也參與甲狀腺激素的合成。此外，NIS也可能在其他部位表達，如乳腺和前列腺[6]。目前，甲狀腺癌的綜合治療方法包括手術輔助內分泌治療和放射性I131治療。放射性I131治療對未分化甲狀腺癌和轉移瘤的診斷和治療至關重要[7]。放射性I131對腫瘤細胞的殺傷作用的前提是腫瘤細胞具有較高的碘吸收能力[8]。既往研究指出，PTEN/PI3K/AKT信號轉導途徑發(fā)揮作經常參與調節(jié)NIS蛋白質合成[9]。PTEN/PI3K/AKT信號轉導通路過活躍可能影響細胞中NIS蛋白的位置，NIS對TPC-1細胞具有明顯的抑制PI3K/AKT信號的作用，提示NIS對TPC-1細胞的抗癌作用[10]。

本研究結果顯示，碘難治組NIS陽性率低，而對照組NIS為100%，同時對照組NIS 陽性積分顯著高于研究組，那么我們有理由認為NIS發(fā)揮抗癌作用的機制很可能與NIS蛋白增加細胞對碘的攝取能力，從而提高I131治療的敏感性和療效密切相關，提高NIS的表達可能是增敏碘難治性甲狀腺癌I131治療的一個調控靶點。