美國(guó)國(guó)家禽流感監(jiān)測(cè)計(jì)劃——第二部分：監(jiān)測(cè)計(jì)劃、數(shù)據(jù)管理和分析（二）

譯校│王慧強(qiáng)（北京市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

翟新驗(yàn) 王羽新（中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

一、庭院養(yǎng)殖家禽

庭院養(yǎng)殖不包括小規(guī)模、高價(jià)值養(yǎng)殖【具有小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)特征的庭院養(yǎng)殖納入美國(guó)家禽改良計(jì)劃（NPIP）監(jiān)測(cè)管理】，一般是通過(guò)在活禽交易市場(chǎng)上銷售，或是飼養(yǎng)遷徙禽類和水禽的飼養(yǎng)場(chǎng)。這種庭院養(yǎng)殖具有更高的感染呈報(bào)禽流感（NAI）的風(fēng)險(xiǎn)，因?yàn)槠滹曫B(yǎng)環(huán)境導(dǎo)致家禽更容易暴露于NAI感染的環(huán)境中。進(jìn)一步說(shuō)，即庭院養(yǎng)殖通過(guò)飼養(yǎng)場(chǎng)所的鳥(niǎo)類活動(dòng)更容易把NAI病毒傳播到其他家禽中（見(jiàn)表1）。

表1 影響庭院養(yǎng)殖家禽感染AI的因素

水禽作為禽流感（AI）病毒貯存宿主，其存在會(huì)增加庭院養(yǎng)殖家禽感染AI風(fēng)險(xiǎn)，已經(jīng)識(shí)別出與AI發(fā)生有關(guān)系的地理因素和時(shí)間因素（見(jiàn)表2）。

表2 因水禽遷徙行為造成的地理因素、時(shí)間因素與庭院養(yǎng)殖家禽感染AI風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系

空間因素是指與水禽及其棲息地的距離。時(shí)間因素包括在指定地點(diǎn)的繁殖季節(jié)、過(guò)冬季節(jié)及8～11月的遷徙季節(jié)。當(dāng)飼養(yǎng)的家禽處于水禽特別集中的季節(jié)或水禽特別集中的地理環(huán)境中時(shí)，飼養(yǎng)家禽的發(fā)病率就會(huì)提高。

1.高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)庭院養(yǎng)殖場(chǎng)的監(jiān)測(cè)（設(shè)立監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)）。對(duì)庭院養(yǎng)殖禽群AI監(jiān)測(cè)可以作為亞洲高致病性禽流感（HPAI）是否傳入美國(guó)家禽行業(yè)的早期預(yù)測(cè)體系。鑒于庭院養(yǎng)殖禽群活動(dòng)更容易接觸遷徙野鳥(niǎo)，如果在美國(guó)野鳥(niǎo)感染了AI病毒，那么這些庭院養(yǎng)殖的家禽感染AI的可能性就會(huì)增加。

確認(rèn)靠近養(yǎng)殖場(chǎng)存在風(fēng)險(xiǎn)的水禽棲息地，以便分配采樣力量，在高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)域采樣。基于風(fēng)險(xiǎn)的空間分析，主要是闡明暴露于遷徙野鳥(niǎo)環(huán)境中的商業(yè)家禽和庭院養(yǎng)殖家禽的感染風(fēng)險(xiǎn)和進(jìn)行監(jiān)測(cè)的重要性。

商業(yè)家禽養(yǎng)殖場(chǎng)與遷徙水鳥(niǎo)集中的地帶有可能會(huì)重疊在一起，這是通過(guò)這些養(yǎng)殖場(chǎng)空間和鳥(niǎo)類標(biāo)識(shí)空間數(shù)據(jù)獲得（NASS）的。鳥(niǎo)類標(biāo)識(shí)數(shù)據(jù)一般由美國(guó)地質(zhì)調(diào)查局野生動(dòng)物研究中心的實(shí)驗(yàn)室提供，并用這些數(shù)據(jù)分析遷徙水鳥(niǎo)的遷徙行為對(duì)大規(guī)模亞洲高致病性禽流感H5N1亞型 (HPAI H5N1)傳播的作用。

對(duì)這些數(shù)據(jù)的初步分析結(jié)果是鉆水鴨、黑鵝、白鵝和天鵝對(duì)亞洲HPAI H5N1的傳播扮演著重要的角色，因?yàn)槠鋾?huì)接觸亞洲東北部和阿拉斯加的亞洲候鳥(niǎo)。

從縣鄉(xiāng)層面分析遷徙野鳥(niǎo)和商業(yè)家禽所占比重可分為四類，與國(guó)家層面是類似的，用百分位數(shù)表示，進(jìn)行商業(yè)家禽養(yǎng)殖場(chǎng)與遷徙水鳥(niǎo)集中的重疊地帶進(jìn)行確認(rèn)，對(duì)庭院養(yǎng)殖家禽的AI監(jiān)測(cè)是非常重要的。

庭院養(yǎng)殖禽群監(jiān)測(cè)分為很高、高、中等的優(yōu)先級(jí)別，選擇的483個(gè)監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)主要分布在太平洋遷徙路線，得克薩斯州和路易斯安那州的港灣沿岸是主要越冬地。遷徙過(guò)程中停留的地區(qū)主要為猶他州、新墨西哥、堪薩斯州和其他美國(guó)中西部地區(qū)，都是風(fēng)險(xiǎn)很高的地區(qū)。這些監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)占全國(guó)家禽養(yǎng)殖場(chǎng)的29%和全國(guó)家禽養(yǎng)殖數(shù)量的26%。

進(jìn)一步識(shí)別庭院養(yǎng)殖和聚集野鳥(niǎo)容易接觸的高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)，地理空間信息，如國(guó)家濕地和其他水禽棲息地等相關(guān)信息都可以用來(lái)進(jìn)一步細(xì)化野生水禽和家禽共存的危險(xiǎn)區(qū)域。另外，還可以添加一些輔助數(shù)據(jù)，如家禽庭院養(yǎng)殖場(chǎng)的密度、所在位置、家禽飼料店、家禽過(guò)量養(yǎng)殖和家禽鳴叫聲引起的噪聲過(guò)大等信息。

野生水禽遷徙時(shí)間也是非常重要的影響因素。因?yàn)锳I在一個(gè)種群中的傳播依賴于一個(gè)種群的密度和宿主的易感性。典型的候鳥(niǎo)遷徙時(shí)期和候鳥(niǎo)越冬時(shí)期是AI病毒的重要監(jiān)測(cè)時(shí)期，這個(gè)時(shí)期更有利于樣品的收集，而且這個(gè)時(shí)間美國(guó)南部和北部的結(jié)果會(huì)不相同。

2.高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)庭院養(yǎng)殖家禽（哨兵家禽）的采樣。多年來(lái)，美國(guó)農(nóng)業(yè)部（USDA）對(duì)外來(lái)動(dòng)物疫病調(diào)查得益于對(duì)庭院養(yǎng)殖的主動(dòng)觀察監(jiān)視和異常死亡率情況下的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)工作。2007年，幾個(gè)州依據(jù)合作協(xié)議公布的指南，使用補(bǔ)充HPAI監(jiān)測(cè)經(jīng)費(fèi)，在高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)開(kāi)展采樣。

下面進(jìn)一步細(xì)化描述關(guān)于在高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)亞洲HPAI H5N1早期檢測(cè)的指南。例如，在一個(gè)AI高風(fēng)險(xiǎn)縣中隨機(jī)抽取30個(gè)庭院養(yǎng)殖禽群進(jìn)行檢測(cè)，并且派一個(gè)官方獸醫(yī)每個(gè)月去現(xiàn)場(chǎng)1次。在AI高發(fā)季節(jié)，官方獸醫(yī)每個(gè)月多次到現(xiàn)場(chǎng)（用這些庭院養(yǎng)殖場(chǎng)作為哨兵場(chǎng)）。官方獸醫(yī)需要向禽場(chǎng)養(yǎng)殖戶當(dāng)面了解關(guān)于日常觀察及家禽死亡率情況，或者養(yǎng)殖戶依預(yù)定時(shí)間向官方獸醫(yī)提交有同樣信息的標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)收集表格。若一個(gè)禽群在過(guò)去21天（一個(gè)潛伏期）發(fā)生異常死亡，應(yīng)該啟動(dòng)外來(lái)動(dòng)物疫病調(diào)查并采集樣品工作。美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FAD）依據(jù)禽群大小來(lái)決定調(diào)查采樣多少，每群介于7～11羽，同時(shí)還要適當(dāng)考慮致死率。

之所以要監(jiān)測(cè)30個(gè)庭院養(yǎng)殖禽群（有的地區(qū)數(shù)量不足30個(gè)），這樣采樣主要是考慮，HPAI流行率達(dá)到10%或者更高時(shí)，滿足95%置信度。同樣，對(duì)每個(gè)禽群抽取7～11羽的樣本，考慮HPAI流行率達(dá)到25%或者更高時(shí)，滿足95%置信度。此置信度是假定實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)良好并且采樣完全隨機(jī)。然而，即使檢測(cè)靈敏度不夠好，但禽群發(fā)病率水平較高，此置信度也可以發(fā)現(xiàn)感染禽群。若一個(gè)禽群已出現(xiàn)至少25%的死亡率，養(yǎng)殖戶報(bào)告信息概率至少可達(dá)50%。盡管養(yǎng)殖戶提供的信息未必可信，但對(duì)這些患病禽養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行的后續(xù)采樣和實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，也可以確定AI存在與否。官方獸醫(yī)的主動(dòng)觀察有利于提高監(jiān)測(cè)敏感性，有過(guò)死亡家禽的禽群也可以利用此方法，此方法同樣適用于展覽禽、比賽禽的擴(kuò)大HPAI監(jiān)測(cè)。

同上面非商業(yè)庭院養(yǎng)殖家禽，主動(dòng)觀察監(jiān)視方法在一些州通過(guò)HPAI補(bǔ)充資金合作協(xié)議，已經(jīng)開(kāi)始進(jìn)行有限的庭院養(yǎng)殖監(jiān)測(cè)。

3.其他非高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)庭院養(yǎng)殖家禽的采樣。USDA教育計(jì)劃，稱為“家禽生物安全”正面向庭院養(yǎng)殖戶和全國(guó)范圍內(nèi)的養(yǎng)禽愛(ài)好者展開(kāi)。這個(gè)計(jì)劃同時(shí)提供電話熱線和教育培訓(xùn)，介紹生物安全原理，向動(dòng)物衛(wèi)生官員報(bào)告禽群異常死亡的重要性。這個(gè)教育計(jì)劃主要是為了加強(qiáng)被動(dòng)監(jiān)測(cè)的作用，加強(qiáng)對(duì)HPAI和可引起明顯臨床癥狀的低致病性禽流感H5/H7亞型（LPAI H5/H7）的監(jiān)測(cè)。另外，庭院養(yǎng)殖戶也可以自愿參加LPAI NPIP，并達(dá)到規(guī)定的檢測(cè)要求。

4.數(shù)據(jù)來(lái)源。報(bào)告庭院養(yǎng)殖家禽數(shù)據(jù)的啟動(dòng)和持續(xù)計(jì)劃，類似于處于自愿NPIP LPAI H5/H7項(xiàng)目中監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。持續(xù)采樣監(jiān)測(cè)來(lái)收集數(shù)據(jù)，監(jiān)測(cè)結(jié)果的數(shù)據(jù)由各州自行保存，最后按季度把總結(jié)的數(shù)據(jù)提交到美國(guó)農(nóng)業(yè)部動(dòng)植物衛(wèi)生檢驗(yàn)署（USDA APHIS）地區(qū)辦公室。這些數(shù)據(jù)會(huì)保存在當(dāng)?shù)氐臄?shù)據(jù)庫(kù)，最后提交到AVHS。USDA APH地區(qū)辦公室會(huì)保存這些庭院養(yǎng)殖行業(yè)的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)，但報(bào)告的效率會(huì)有所不同，有的是用紙質(zhì)版?zhèn)鬟f，有的是用電子版?，F(xiàn)在，各州可利用LBMS電子化報(bào)送工具，向地區(qū)辦公室報(bào)告數(shù)據(jù)，這個(gè)工具逐漸修正，納入了庭院養(yǎng)殖監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。應(yīng)用這個(gè)數(shù)據(jù)管理工具可成為州農(nóng)業(yè)部門(mén)AI監(jiān)測(cè)計(jì)劃中的一部分。

5.數(shù)據(jù)分析及解釋。庭院養(yǎng)殖是缺乏生物安全管理的代表，監(jiān)測(cè)主要是依靠養(yǎng)殖戶、私人獸醫(yī)或者診斷實(shí)驗(yàn)室人員主動(dòng)報(bào)告死禽情況，或者就是被動(dòng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的一部分。毫無(wú)疑問(wèn)，有些養(yǎng)殖戶一旦發(fā)現(xiàn)死禽后會(huì)主動(dòng)尋求幫助，但有部分養(yǎng)殖戶會(huì)直接處理死禽，由于損失少他們也不會(huì)進(jìn)一步采取其他安全措施。這樣，在采樣和檢測(cè)前，禽群AI已經(jīng)流行了幾周死亡率就可能會(huì)比較高，而且亞洲HPAI H5N1對(duì)公眾健康的影響較大。所以基于以上原因，庭院養(yǎng)殖比其他養(yǎng)殖存在更高風(fēng)險(xiǎn)，其監(jiān)測(cè)的敏感性（及時(shí)檢測(cè)的概率）比美國(guó)其他家禽養(yǎng)殖業(yè)低。不過(guò)，可以采取一些必要的措施，如有針對(duì)性地對(duì)一些高風(fēng)險(xiǎn)易感養(yǎng)殖場(chǎng)定期進(jìn)行觀察監(jiān)視和采樣；對(duì)一些家禽博覽會(huì)等進(jìn)行主動(dòng)的觀察監(jiān)測(cè)；提高公眾意識(shí)以增強(qiáng)現(xiàn)有的監(jiān)測(cè)工作等。圖1描述了這些監(jiān)測(cè)系統(tǒng)的敏感性。

如果各個(gè)州可以接受對(duì)庭院養(yǎng)殖場(chǎng)的監(jiān)測(cè)協(xié)議，并執(zhí)行監(jiān)測(cè)計(jì)劃，那么上述提及的數(shù)據(jù)可用于評(píng)估感染風(fēng)險(xiǎn)。首先，把一些高風(fēng)險(xiǎn)的養(yǎng)殖場(chǎng)設(shè)立為一個(gè)監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)，這樣將會(huì)有利于我們?cè)缙诎l(fā)現(xiàn)禽AI的傳入。同時(shí)，對(duì)在展覽或展示、交換及其他一些活動(dòng)上出現(xiàn)的家禽都進(jìn)行監(jiān)測(cè)，也能提高早期發(fā)現(xiàn)的概率。最后，當(dāng)大部分養(yǎng)殖戶有很高的疫病報(bào)告意識(shí)后，就會(huì)明顯提升早期發(fā)現(xiàn)疫病的可能性（見(jiàn)圖1）。

二、遷徙水鳥(niǎo)和濱鳥(niǎo)

APHIS野生動(dòng)物局和其他機(jī)構(gòu)，完成了遷徙水鳥(niǎo)亞洲HPAI H5N1早期監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，美國(guó)跨部門(mén)戰(zhàn)略計(jì)劃描述了在遷徙水鳥(niǎo)和濱鳥(niǎo)中的采樣策略。目前這個(gè)項(xiàng)目已被USDA和其他部門(mén)參照?qǐng)?zhí)行。下列網(wǎng)站可以搜索到此文件http://www.usda.gov/documents/wildbirdstrategicplanpdf.pdf。項(xiàng)目中提及的方法包括調(diào)查野鳥(niǎo)發(fā)病/死亡事件，活鳥(niǎo)和捕殺野鳥(niǎo)的監(jiān)測(cè)，利用一些野鳥(niǎo)作哨兵監(jiān)測(cè)目標(biāo)和收集環(huán)境樣品等。

◎圖1 美國(guó)庭院養(yǎng)殖主動(dòng)監(jiān)測(cè)目標(biāo)群觀察監(jiān)視和被動(dòng)監(jiān)測(cè)方法，每一種監(jiān)測(cè)方法和相應(yīng)群體估計(jì)敏感性（檢測(cè)概率）

美國(guó)跨部門(mén)戰(zhàn)略計(jì)劃詳細(xì)地描述了關(guān)于水樣和糞便樣本的采集及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。糞便取樣已經(jīng)被證明是一個(gè)用于檢測(cè)病毒RNA的有效方法。2006年在全國(guó)范圍內(nèi)收集野禽糞便和泄殖腔樣品，其中檢測(cè)有相當(dāng)一部分樣品是陽(yáng)性的。因此，如果亞洲HPAI H5N1在某一地點(diǎn)感染了野禽，采集此環(huán)境樣品進(jìn)行檢測(cè)，可有效地檢出AI病毒，而且其效果和泄殖腔樣品是一樣的。

1.采集環(huán)境樣品。2006年5月，USDA APHIS國(guó)家野生動(dòng)物研究中心（NWRC）成立了一個(gè)專家組，討論采集環(huán)境樣品問(wèn)題，最終推薦了一個(gè)統(tǒng)一的采集水樣和糞便樣品方法。利用遷徙候鳥(niǎo)生物學(xué)和生態(tài)學(xué)及A型流感病毒信息，并且考慮到在全國(guó)范圍內(nèi)收集到的數(shù)據(jù)的復(fù)雜性，設(shè)計(jì)了5個(gè)指導(dǎo)抽樣的方案。位置及頻次是根據(jù)流行病學(xué)原理確定的，采樣應(yīng)關(guān)注那些從空間和時(shí)間上接觸過(guò)來(lái)自亞洲HPAI H5N1疫情報(bào)告地或存在潛在感染可能地區(qū)的禽類的遷徙鳥(niǎo)類。此外，遷徙候鳥(niǎo)的生活史涉及季節(jié)性遷徙和穿過(guò)北美的大規(guī)模遷徙運(yùn)動(dòng)，如果這些候鳥(niǎo)感染了亞洲HPAI H5N1，其臨床癥狀輕微，這部分候鳥(niǎo)就可以繼續(xù)遷徙，引起AI病毒長(zhǎng)距離擴(kuò)散傳播。因此一經(jīng)發(fā)現(xiàn)候鳥(niǎo)攜帶AI病毒，全國(guó)范圍采集候鳥(niǎo)樣品也將有較大的限制。

2.前提和推論。遷徙候鳥(niǎo)感染HPAI病毒時(shí)，不表現(xiàn)明顯的發(fā)病或死亡癥狀，可將HPAI病毒大范圍傳播。試驗(yàn)表明，亞洲HPAI病毒感染麻鴨，其致病性各不相同。有的AI毒株感染鴨后沒(méi)有引起任何臨床癥狀，但卻可以在鴨體內(nèi)進(jìn)行復(fù)制，并傳播給其他家禽。HPAI H5N1在鴨中一般只會(huì)引起輕微的臨床癥狀，這就容易導(dǎo)致病毒在不知不覺(jué)的情況下傳播給其他家禽。因此，采樣主要目的在于收集野鴨和野鵝數(shù)據(jù)。而且，AI病毒可以通過(guò)糞口傳播，即病毒經(jīng)消化道排出后存在于糞便中，糞便再被沖入水中，這些含有病毒的水就有可能感染一些易感鳥(niǎo)類。因此，進(jìn)行糞便樣品和水樣的采集是檢測(cè)HPAI H5N1的有效方法。目標(biāo)群體主要集中在那些生活史有一段時(shí)間在國(guó)外，或有與來(lái)源于國(guó)外的候鳥(niǎo)混合生活在其他地區(qū)經(jīng)歷的候鳥(niǎo)群。例如，一個(gè)值得關(guān)注的地區(qū)就是阿拉斯加，那里的野禽一般來(lái)自亞洲東南部——亞洲HPAI H5N1可能已經(jīng)感染野禽的地方，這些野禽會(huì)與當(dāng)?shù)胤敝车那蓊惤佑|，然后又在夏末秋初遷徙至其他低風(fēng)險(xiǎn)的48個(gè)州。一般而言，水禽和鵝的糞便是比較容易識(shí)別的，而且也是相對(duì)容易采集的，我們一般不需要直接處理動(dòng)物就可以獲得。國(guó)家野生動(dòng)物研究中心（NWRC）已經(jīng)建立了一個(gè)可靠的RRT-PCR方法檢測(cè)糞便中病毒RNA，并優(yōu)化和驗(yàn)證水樣檢測(cè)方法。

因?yàn)橐扒荼O(jiān)測(cè)計(jì)劃實(shí)施的時(shí)間短，而且目前主要是集中于對(duì)亞洲HPAI H5N1檢測(cè)工作，所以并不能確切了解北美遷徙水禽感染HPAI水平，根據(jù)少部分檢測(cè)結(jié)果，目前這樣的抽樣理論并未能有效地評(píng)價(jià)國(guó)內(nèi)遷徙候鳥(niǎo)的感染情況。因此，抽樣指南強(qiáng)調(diào)盡快按照風(fēng)險(xiǎn)程度對(duì)疫病進(jìn)行監(jiān)測(cè)。2006年給出了起源于阿拉斯加、加拿大、歐洲、中美洲和南美洲遷徙鳥(niǎo)類的位置，并開(kāi)展采樣工作。因?yàn)槟壳斑€不清楚哪條遷徙路線最容易傳入亞洲HPAI H5N1，對(duì)阿拉斯加和其他48個(gè)州采樣工作應(yīng)該集中在水禽高度密集，且有國(guó)外的候鳥(niǎo)經(jīng)過(guò)并停留的。

3.目標(biāo)抽樣群體。抽樣的目標(biāo)包括風(fēng)險(xiǎn)較低的48個(gè)州的臨近州。因?yàn)檫@些州的水禽也有機(jī)會(huì)與國(guó)外的候鳥(niǎo)接觸。抽樣群體包括48個(gè)州內(nèi)野禽高度集中的所有地區(qū)或有候鳥(niǎo)停留的地區(qū)。每個(gè)州會(huì)根據(jù)這些地區(qū)過(guò)去15年標(biāo)識(shí)鳥(niǎo)類回收的數(shù)據(jù)、所在地區(qū)水禽和鵝的數(shù)量，對(duì)采樣地點(diǎn)進(jìn)行排序。

采樣一般選取水禽較為集中的區(qū)域，這些區(qū)域可以是聯(lián)邦政府管理的土地，也可以是私人用地，具有一定標(biāo)識(shí)禽類棲息區(qū)域，如私人狩獵俱樂(lè)部。選取樣品時(shí)建議要考慮品種因素，如鉆水鴨等水禽，因?yàn)槠渫ǔ１徽J(rèn)為可以通過(guò)水源、糞口途徑傳播AI病毒。

在候鳥(niǎo)遷徙路線和在國(guó)內(nèi)越冬地區(qū)，要從物種水平、不同物種的候鳥(niǎo)混合程度并應(yīng)用標(biāo)識(shí)鳥(niǎo)類回收的數(shù)據(jù)，選擇有傳播功能的群體并采樣，更有利于早期發(fā)現(xiàn)亞洲HPAI H5N1。目前，應(yīng)在候鳥(niǎo)集中區(qū)域和A型AI流行時(shí)進(jìn)行采樣。此外，數(shù)據(jù)收集的時(shí)間應(yīng)該與候鳥(niǎo)秋季遷徙的季節(jié)特征一致。對(duì)于當(dāng)?shù)仄贩N，預(yù)期春天出生的雛鳥(niǎo)在較短時(shí)間內(nèi)感染率最高。由于全國(guó)范圍內(nèi)需要考慮的時(shí)間和空間不同，因此每個(gè)州的工作人員應(yīng)該熟悉當(dāng)?shù)睾蝤B(niǎo)的遷徙模式，及時(shí)根據(jù)改變的條件調(diào)整采樣的時(shí)間和頻次。

4.標(biāo)識(shí)鳥(niǎo)類回收數(shù)據(jù)。在美國(guó)之外繁殖地帶上標(biāo)識(shí)，由獵人收集，或者由美國(guó)地質(zhì)勘探局（USGS）鳥(niǎo)類標(biāo)識(shí)實(shí)驗(yàn)室收到死鳥(niǎo)等而獲得的信息，這些信息有利于確定采樣地點(diǎn)。

5.采集環(huán)境樣品的方法。因?yàn)樗畼涌梢蕴峁╆P(guān)于禽類群體，而不僅僅是一個(gè)個(gè)體的流行病學(xué)信息，所以它可以作為一個(gè)用于評(píng)價(jià)一個(gè)采樣單位（水體）是否存在AI的基本方法。收集水體樣品比較容易，只需要對(duì)采樣人進(jìn)行簡(jiǎn)單的培訓(xùn)就可以進(jìn)行。水樣檢測(cè)可以作為評(píng)價(jià)當(dāng)?shù)谹I存在與否的一種直接推測(cè)手段，而糞便樣品檢測(cè)只是作為判斷個(gè)體和潛在頻繁活動(dòng)禽類是否感染的一種間接方法。目前，NWRC研究人員正在根據(jù)不同環(huán)境條件，如溫度、鹽度和pH的水體樣品，來(lái)調(diào)整濃度臨界值，建立用于水樣的RRT-PCR檢測(cè)方法。

6.目前成果。2006年，USDA漁業(yè)和野生動(dòng)植物管理局合作，收集了來(lái)自50個(gè)州大約85000份活禽或死禽泄殖腔樣品，以及50000份糞便樣品；USDA野生動(dòng)物局州辦公室從水禽聚集地收集約1000份糞便樣品，即全國(guó)總樣本數(shù)為50000份；野生動(dòng)物局辦公室和州的野生動(dòng)物管理機(jī)構(gòu)合作，共收集來(lái)自野禽的750～1500份泄殖腔拭子；美國(guó)DOI收集了約20000份樣品，而且大部分樣品是來(lái)自于阿拉斯加的野禽。2007年，USDA依照2006年指南，收集50000份泄殖腔樣品和25000份糞便樣品，特別是對(duì)AI、H5/H7亞型陽(yáng)性地點(diǎn)重復(fù)采樣。

7.數(shù)據(jù)來(lái)源。遷徙候鳥(niǎo)的監(jiān)測(cè)程序和數(shù)據(jù)主要來(lái)源于美國(guó)跨部門(mén)戰(zhàn)略計(jì)劃，這個(gè)計(jì)劃稱為對(duì)野生候鳥(niǎo)亞洲HPAI H5N1病毒早期監(jiān)測(cè)系統(tǒng)。這份文件可以在下面的網(wǎng)站中查閱http://www.usda.gov/documents/wildbirdstrategicplanpdf.pdf.。2006年收集的樣本有的是DOI NWHC進(jìn)行檢測(cè)，有的是由USDA國(guó)家動(dòng)物衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室網(wǎng)絡(luò)（NAHLN）批準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。由APHIS野生動(dòng)物局和美國(guó)DOI收集的數(shù)據(jù)通常錄入AVHS中，公眾可從http://wildlifedisease.nbii.gov/ai/ HPAI早期檢測(cè)數(shù)據(jù)系統(tǒng)（HEDDS）查詢。

APHIS、DOI和各州野生動(dòng)物及自然資源機(jī)構(gòu)除了指導(dǎo)遷徙野生候鳥(niǎo)的監(jiān)測(cè)，還指導(dǎo)對(duì)動(dòng)物園和其他設(shè)施野生禽類的監(jiān)測(cè)。主要是對(duì)這些設(shè)施中的健康禽、瀕死禽和死禽進(jìn)行主動(dòng)和被動(dòng)監(jiān)測(cè)，這些數(shù)據(jù)將由USDA AVHS保存。

8.數(shù)據(jù)分析及解釋。野生禽類監(jiān)測(cè)信息目前是上傳至HEDDS進(jìn)行分析，可通過(guò)網(wǎng)站http://wildlifedisease.nbii.gov/ai/查詢。APHIS NWRC、科羅拉多州立大學(xué)和USDA CEAH-GIS共同合作，通過(guò)分析野生禽類的生態(tài)和遷徙行為，研發(fā)一個(gè)對(duì)國(guó)內(nèi)家禽和野生禽類AI風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估模型，目的是評(píng)估野生禽類可將AI傳播到當(dāng)?shù)匾恍┐笮宛B(yǎng)禽場(chǎng)的可能性。2007年4月下旬才啟動(dòng)此項(xiàng)目，此文件中還沒(méi)有相關(guān)結(jié)果和數(shù)據(jù)。