阿司匹林代謝相關(guān)基因PEAR1的多態(tài)性在河南人群中的分布研究

王米香 周建華 吳干斌南陽醫(yī)學高等?？茖W校第一附屬醫(yī)院臨床藥學科，河南 473000；鄭州大學第二附屬醫(yī)院藥學部，鄭州 45004

阿司匹林目前在臨床中廣泛用于心腦血管病的防治，尤其在經(jīng)皮冠狀動脈介入治療（PCI）后，其與氯吡格雷聯(lián)用成為抗凝治療的基石［1-2］。但是，在實際的臨床實踐中，我們發(fā)現(xiàn)患者規(guī)律服用阿司匹林后仍不能達到預(yù)期的預(yù)防栓塞性疾病的目的，也就是所謂的“阿司匹林抵抗”［3］。隨著近年的研究發(fā)現(xiàn)，阿司匹林抵抗與血小板內(nèi)皮聚集受體1（platelet endothelial aggregation receptor-1，PEAR1）的基因多態(tài)性具有相關(guān)性［4］，因此本課題組擬檢測河南地區(qū)人群中的PEAR1基因型，進而發(fā)現(xiàn)PEAR1各基因型的分布情況，明確基因型與阿司匹林療效之間的相關(guān)性，以期實現(xiàn)阿司匹林藥物使用的個體化，最終達到預(yù)期的預(yù)防栓塞性疾病的目的，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 試驗儀器與耗材 本試驗中主要用到熒光檢測儀、高速離心機（離心半徑為16 mm）、醫(yī)用冰箱、DNA純化試劑盒、醫(yī)用乙醇等儀器及設(shè)備，除高速離心機為德國進口設(shè)備外，其余所用儀器及設(shè)備均為國產(chǎn)。

1.2 研究對象 本試驗中所涉及到的研究對象是健康體檢者，統(tǒng)計時間為2019年1月至12月。本試驗制定了嚴格的入選標準和剔除標準，力求入組研究對象身體健康，無慢性病。均為河南籍人員，均簽署知情同意書。入組研究對象共計115名，其中男性69名，女性46名，年齡（40.0±3.5）歲，身高（164.9±6.5）cm，體質(zhì)量（62.3±3.4）kg。

1.3 基因型檢測過程 按照公司提供的SOP提取DNA，加入相應(yīng)的試劑盒混勻并與涂片結(jié)合，混勻后通過標記寡核苷酸探針對涂片上的染色體進行染色標記，并進行熒光原位雜交檢測，進而分析染色體核型。通過熒光檢測儀檢測熒光信號，最終得出基因分型。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 進行了Hardy-Weinberg定律的吻合度測驗，對試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料以率表示，行χ2檢驗，正態(tài)分布的計量資料以（）表示，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 PEAR1基因分型及其在河南地區(qū)人群中的分布頻率 試驗發(fā)現(xiàn)PEAR1（rs12041331）共有3種基因型，即AA、GA和GG型，3種基因型及其在不同河南地區(qū)人群中的各自分布頻率見表1，等位基因頻率在性別間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

表1 PEAR1 3種基因型在不同性別河南人群中的分布頻率[例（%）]

2.2 吻合度測驗 將試驗結(jié)果進行Hardy-Weinberg定律的吻合度測驗，通過計算檢測符合Hardy-Weinberg平衡定律（χ2=1.24，P=0.362）。

3 討 論

阿司匹林通過不可逆地抑制環(huán)氧合酶1（COX-1）和COX-2，從而減少血栓素A2的生成，進而對血小板聚集產(chǎn)生抑制作用。阿司匹林在臨床中應(yīng)用范圍比較廣。但在臨床中發(fā)現(xiàn)有一部分患者即使規(guī)律服用阿司匹林，仍不能達到預(yù)期的臨床目的，有研究發(fā)現(xiàn)“阿司匹林抵抗”在人群中的發(fā)生率在5.5%～60.0%之間［3］。阿司匹林抵抗產(chǎn)生的原因很多，諸如患者的依從性差、患者自身的基礎(chǔ)疾病及其病理生理狀況、藥物的相互作用等［1］。隨著藥物基因組學的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)阿司匹林抵抗與遺傳因素有很大的關(guān)聯(lián)性：COX-1、COX-2、ABCB1、PEAR1等基因的多態(tài)性與阿司匹林的個體差異有相關(guān)性［1，5-7］。

目前對COX-1、COX-2、ABCB1基因多態(tài)性的研究較多，因此我們課題組將PEAR1的基因多態(tài)性作為突破點，擬檢測河南地區(qū)人群中的PEAR1基因型，進而發(fā)現(xiàn)PEAR1各基因型的分布情況，明確基因型與阿司匹林療效之間的相關(guān)性，以期實現(xiàn)阿司匹林藥物使用的個體化的目的。PEAR1是表達在血小板和內(nèi)皮細胞上的1型膜蛋白，其磷酸化后，最終會引起血小板之間不可逆的聚集［7］。國內(nèi)外研究也表明PEAR1（rs12041331）的基因多態(tài)性與阿司匹林的療效具有相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)具有突變位點的患者在服用阿司匹林藥物進行抗血小板治療時，達到臨床預(yù)期的實現(xiàn)率均大為降低［8-10］。PEAR1（rs12041331）的基因型有3種：AA、GA和GG型，其中AA型對阿司匹林的應(yīng)答差，GA型對阿司匹林的應(yīng)答不佳，GG型對阿司匹林的應(yīng)答好［11］。

本試驗擬檢測河南地區(qū)人群中的PEAR1基因型，通過檢測健康人群中PEAR1（rs12041331）的基因型，進而得出各基因型的分布頻率，從而來指導(dǎo)阿司匹林的使用，最終達到個體化應(yīng)用及降低不良心腦血管事件發(fā)生的概率。通過入組和剔除標準的制定，將入組人員的一般資料進行了篩查，在身高、體質(zhì)量、年齡、性別等方面的差異均無統(tǒng)計學意義。通過試驗得出PEAR1（rs12041331）的3種基因型為AA、GA和GG型，其分布頻率分別為12.17%、46.09%和41.74%，且其在性別間比較，差異均無統(tǒng)計學意義。所得結(jié)果與國內(nèi)文獻報道的12.00%、48.00%和40.00%基本相近［12］。本試驗由于時間緊迫，納入的研究對象數(shù)量較少，所研究的指標較少，研究結(jié)果有待進一步的確認。此次試驗所得出其在健康人群中的分布頻率后，下一步準備在心腦血管患者中進行試驗，并擴大樣本量，以多維度的觀察指標來研究二者之間的相關(guān)性，以期以PEAR1（rs12041331）基因型為導(dǎo)向，進而來指導(dǎo)患者阿司匹林的使用，達到個體化應(yīng)用的目的。

利益沖突：作者已申明文章無相關(guān)利益沖突。