牛結節(jié)性皮膚?。╨umpy skin disease，LSD）臨床診斷與防治

格桑央宗

摘 要：2019 年 8 月 12 日我國首次確診在新疆伊犁地區(qū)爆發(fā)牛結節(jié)性皮膚病，為充分認識和做好該病的防控工作，防止外來疫情擴散蔓延到我區(qū)，現(xiàn)將該病的臨床癥狀、檢測技術以及我區(qū)的防控對策進行概括介紹，為有效控制、凈化和根除該病提供指導。

關鍵詞：牛結節(jié)性皮膚病;癥狀;檢測;診斷;防控

牛結節(jié)性皮膚?。↙SD）是由痘病毒科（Poxviridae）、山羊痘病毒屬（Capripoxvirus， CaPV）的牛結節(jié)性皮膚病病毒（lumpy skin disease virus，LSDV）引起的，表面廣泛性結節(jié)、淋巴結腫大、皮膚水腫為特征的傳染病. LSDV 的自然宿主主要是牛，各品種牛均易感， 無明顯的品種特異性。 家兔、綿羊、山羊、長頸鹿和 黑羚羊等也可能被感染，但沒有證據表明 LSDV 能感染人。OIE 規(guī)定的須通報的疫病，《 中國人民共和國進境動物檢疫疫病名錄 》（農業(yè)農村部公告 256 號 [2020] ）列為 一類傳染病 。農業(yè)農村部《關于做好牛結節(jié)性皮膚病防控工作的緊急通知》（農牧發(fā) [2019]26 號）暫對其按 二類動物疫病進行管理。根據農業(yè)農村部通知， 1987年、 2002 年在河南、黑龍江 報道疑似病例; 2019 年8月10日，首次在新疆伊犁哈薩克自治州確診，發(fā)病 240 頭，死亡2 2 頭; 截至 2021 年5月28日，全國累計15個省、市、自治區(qū)發(fā)病，累計發(fā)病 3272 頭，死亡64 ，捕殺3148頭。

1 牛結節(jié)性皮膚病概述

1.1流行病學

該病自然感染的潛伏期 2～5 周，試驗感染的為 4～12 d，通常為 7 d。 病牛體溫升高，可達 41 ℃以 上，呈持續(xù)稽留熱型。 初期表現(xiàn)為鼻炎、結膜炎、角膜炎。試驗性感染后第 4～12 天體表皮膚出現(xiàn)硬實、 圓形、隆起、直徑 1～5 cm 的結節(jié)，觸摸有痛感，尤其 是頭部、頸部、胸部、會陰、乳房和四肢。 皮膚結節(jié)位 于表皮和真皮，可集聚成不規(guī)則的腫塊，最后壞死。 病牛體表淋巴結腫大，以肩前、腹股溝外、股前、后肢 和耳下淋巴結最為突出。 眼、鼻、口腔、直腸、乳房和 外生殖器等處黏膜也可形成結節(jié)和潰瘍。 泌乳?？?發(fā)生乳房炎，泌乳量下降，孕牛發(fā)生流產，公牛病后 不育，肉牛生產性能下降，皮張無法利用。 解剖皮下組織可見灰紅色漿液浸潤。切開結節(jié)， 腔內含有干酪樣灰白色的壞死組織，有的有膿血，結 節(jié)深達皮下組織或至肋骨組織。 體表、咽、氣管、肺、 瘤胃、皺胃、腎臟表面都可能有類似的結節(jié)。在病初， 受損細胞內可見嗜酸性包涵體。 根據這些臨床癥狀 和病理變化特征可以進行初步診斷， 但確診需要進 一步進行實驗室病原學和血清學檢測。 LSDV 能感染所有的牛類， 發(fā)病率 5%～85%， 死亡率可達 20%，其中泌乳牛發(fā)病最嚴重，導致泌乳牛產奶量顯著下降。由于睪丸炎和睪丸萎縮，可致公牛永久性或暫時性不育，并通過精液長期排毒。另 外，可導致奶牛暫時性不育、流產和胎兒發(fā)病。此外， 結節(jié)性和壞死性皮膚，易受蚊蠅等昆蟲叮咬，在皮膚中留下深孔，影響皮毛質量 。

1.2 病原學特征

LSDV 是一種線性dsDNA 病毒 ， 其基因組大小為146090 ～150793 bp （151321bp） ） 。病毒粒子結構復雜 ， 有兩種不同的感染性形式：細胞內成熟的病毒 （IMV） ：外包一單層膜，一直留在細胞內直至細胞被裂解 。 細胞相關囊膜病毒 （CEV） （停留在細胞表面）， 或細胞外囊膜病毒 （EEV） （當再包裹一層膜后，在細胞死亡前從細胞表面釋放出）。與GTPV 和SPPV 在病原生物學 、 免疫學均具有很高的相似性 ， 具有廣泛的血清學交叉反應和交叉保護作用，并具有相對嚴格的種屬特異性 。在形態(tài)，理化和血清學上無法區(qū)別，只能通過基因組加以區(qū)分。

1.2.1外環(huán)境中的穩(wěn)定性

病毒粒子可于pH6.6 ～8.6 環(huán)境中長期存活。在4 ℃ 甘油鹽水和組織培養(yǎng)液內存活4-6 個月。室溫，干燥痂皮中可存活1個月以上，在干燥圈舍內可存活幾個月 ;寒冷干燥環(huán)境下可存活數年 。病毒耐凍融，置-20 ℃ 以下保存，可保持活力達幾年之久;在-80℃ 可保存10 年。紫外線能使病毒DNA 的嘧啶形成二聚體，致使LSDV 迅速被滅活。在自然條件下，LSDV 失活主要是溫度和陽光中紫外線共同作用的結果。電離輻射均可使病毒滅活 。

1.2.2溫度敏感性

在低溫下LSDV十分穩(wěn)定，病毒在4 4 ℃ ～7 7 ℃可存活數月，-20℃以下，特別是-50℃ 、-70℃等溫度條件下十分穩(wěn)定，可保存數年之久。LSDV 對熱比較敏感，對熱敏感， 55 ℃2h或65 ℃30min。

1.2.3 消毒劑敏感性

成熟LSDV 病毒顆粒大部分以裸露的形式留在細胞內，為胞內裸病毒（INV ），還有一些是胞內成熟病毒（IMV ）， 另有少部分釋放到胞外，成為胞外帶宿主胞膜病毒（EEV ）。除了包內病毒粒子，其他成熟的病毒粒子均含有囊膜，而且EEV 不但有囊膜，而且還包裹了一層宿主細胞膜。這使得LSDV和其它的病毒一樣對消毒劑較其他病毒耐受。 對10%漂白粉、2%的硫酸鋅溶液有一定的抵抗力。 對乙醚（20% ）、氯福爾馬林（1%） 、去污劑如十二烷基硫酸鈉敏感，石碳酸（2%15 分鐘）、次氯酸鈉（2-3% ）碘化合物（1：33 ）、衛(wèi)可（1% ）、季銨類化合物（0.5%）可使其滅火。

1.3臨床特征

人工感染后6～9天，出現(xiàn)發(fā)熱，體溫>40.5 ℃/41℃，持續(xù)約7天左右;發(fā)生鼻炎、結膜炎;泌乳牛產奶量明顯降低; 體表長出直徑2～5 cm的結節(jié)，頭部、頸部、乳房和會陰部尤為常見。結節(jié)侵害表皮和真皮，初期有漿液滲出，兩周后，有的變成壞死栓，穿透厚厚的皮層;所有體表淋巴結腫大，肢體水腫、不愿活動;眼、鼻、口腔、直腸、乳房和外生殖器黏膜上的結節(jié)很快發(fā)生潰瘍。出現(xiàn)臨床癥狀后，眼和鼻分泌物變?yōu)轲つ撔苑置谖?，并可能出現(xiàn)角膜炎;呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)器官表層（真胃、肺）也可出現(xiàn)結節(jié)，并進一步引起原發(fā)性和繼發(fā)性肺炎;懷孕母牛發(fā)生流產，有報道稱流產胎兒被結節(jié)包裹，公?；糒SD可導致永久性或暫時性不育。機體消瘦，可能發(fā)生肺炎和乳房炎。皮膚壞死栓招致蠅蟲叮咬，且脫落后留下深洞。重度感染時恢復緩慢?？谇?、喉、氣管、膽囊、子宮、鄒胃等粘膜上產生潰瘍灶（結節(jié)）;嚴重病例，氣管、肺臟結節(jié)可導致肺炎。

1.4病理變化

病理變化是發(fā)病牛呼吸道出現(xiàn)痘狀瘢痕，心臟出現(xiàn)痘狀病變，膽囊、消化道、等出現(xiàn)痘狀病變和出血。

2實驗室檢測

2.1抗體檢測

采集全血分離血清用于抗體檢測，可采用牛結節(jié)性病毒競爭ELISA、牛結節(jié)性皮膚病間接ELISA抗體檢測試劑盒。

2.2病原檢測

采集皮膚結痂、口鼻眼肛拭子、抗凝血等用于病原檢測。病毒核酸檢測可采用qPCR、PCR等方法。病毒分離鑒定科采用細胞分離培養(yǎng)病毒、動物回歸試驗等方法。

3綜合防控措施

3.1疫情報告與確認

LSD 實施快報制度：可疑疫情、疑似疫情和確診疫情。 可疑疫情：任何單位和個人發(fā)現(xiàn)后，報當地縣獸醫(yī)主管部門、動物衛(wèi)生監(jiān)督機構或動物疫病防控機構，派2 2 名中級以上技術人員到現(xiàn)場診斷與流調，并采樣送檢。 疑似疫情：可疑病例樣品經縣級以上或認可的實驗室檢測為LSDV 陽性者，為疑似。 確診疫情： ： 疑似病例樣品經省級或授權認可的實驗室復診為LSDV 陽性者，為確診（各省市區(qū)首例疫情須中國動物衛(wèi)生與流行病學中心或認可的實驗室確認）。

3.2疫情處置

3.2.1疫點、疫區(qū)和受威脅區(qū)

3.2.1.1疫點： 規(guī)模化養(yǎng)殖場，以病牛所在的場為疫點;散養(yǎng)場，以病牛所在的自然村為疫點;放牧牛以放牧場地為疫點;運輸過程中，以所載病牛的車、船和飛機等運輸工具為疫點;在市場交易、屠宰過程，分別以交易市場、屠宰場為疫點。

3.2.1.2疫區(qū)：疫點邊緣向外延伸3 3 公里的區(qū)域。

3.2.1.3 受威脅區(qū)：由疫區(qū)邊緣向外延伸 10 公里的區(qū)域。應根據當地天然屏障（河流、山脈等）、人工屏障和野生動物棲息地、媒介生物分布與活動等，以及疫情追溯調查結果，綜合判斷確定。p

3.3封鎖

所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門報請同級人民政府對疫情實行封鎖;跨行政區(qū)的疫情，由有關行政區(qū)共同的上一級人民政府對疫情實行封鎖。對疫點采取的措施（消滅傳染源）： 撲殺并銷毀所有 的發(fā)病牛和病原學陽性牛，病死、撲殺的牛及其產品無害化處理;同群病原學陰性牛隔離飼養(yǎng)，防止蟲媒叮咬，提前出欄屠宰。實施蟲媒控制措施： 殺滅飼養(yǎng)場所吸血昆蟲 ，清除其孳生地。對牛的排泄物、污染物或可能被病原污染的飼料、墊料和水源進行無害化處理。 被污染的或可能被污染的物品、交通工具、圈舍及場地徹底消毒，出入車輛、人員和相關設施按規(guī)定消毒（污染物消毒）。p

3.4疫區(qū)采取的措施

禁止牛只出入，禁止檢驗不合格的皮張、精液和胚胎等產品調出。 實施蟲媒控制措施，殺滅飼養(yǎng)場所吸血昆蟲，清除其孳生地（自然疫源地，星星之火）。對養(yǎng)殖場、牧場、交易市場、屠宰場的牛只檢測排查、感染風險評估，及時掌握疫情動態(tài)。在疫情封鎖周圍設立警示標志，出入疫區(qū)的交通路口設立檢查站。

3.5受威脅區(qū)采取的措施

禁止牛只出入，禁止檢驗不合格的皮張、精液和胚胎等產品調出。 實施蟲媒控制措施，殺滅飼養(yǎng)場所吸血昆蟲，清除其孳生地。對養(yǎng)殖場、牧場、交易市場、屠宰場的牛只檢測排查、感染風險評估，及時掌握

3.6疫情動態(tài)（ 病毒與抗體檢測 ）

緊急免疫接種： 我國推薦山羊痘疫苗（5 5 倍羊量）免疫 健康非感染牛LSDV 弱毒苗病毒滴度 2.5- 3.5 TCID50 ，保護期1 1年; 80%- 100% 免疫覆蓋率 ，或 95% 的群體 75% 的個體免疫; 免疫或感染的母牛的犢牛3 3- -4 4 月齡免疫（ 母源抗體 ）;放牧（新引進）牛在轉（入）場前 28 天免疫。

3.7檢疫監(jiān)督

撲殺完成后30天內，禁止疫情所在地活牛調出。各地在檢疫監(jiān)督過程中，要加強對牛結節(jié)性皮膚病臨床癥狀的查驗。

3.8疫情溯源

對疫情發(fā)生前30內，對引入疫點的所有牛只及牛皮張等產品進行溯源性調查，分析疫情來源;當有明確證據表明牛只存在疫情風險時，對輸出地牛群進行隔離觀察及采樣檢測，對牛皮張等產品進行消毒處理。

3.9疫情追蹤

對疫情發(fā)生前30天至采取隔離措施前，對從疫點輸出的牛及牛皮張等產品進行跟蹤調查，分析評估疫情擴散風險;對有流行病學關聯(lián)的牛進行隔離觀察及采樣檢測，對牛皮張等產品進行消毒處理。

3.10解除封鎖

疫點和疫區(qū)內最后一頭病牛死亡或撲殺，并按規(guī)定進行消毒和無害化處理30天后，經疫情發(fā)生所在地地上一級驗收合格后，由所在地縣級以上主管部門向原發(fā)布封鎖令的人民政府申請解除封鎖，由該人民政府發(fā)布解除封鎖令，并通報毗鄰地區(qū)和有關部門，報上一級人民政府備案。

3.11處理記錄

對疫情處理的全過程必須做好完整詳實記錄，并歸檔。

4防范措施

4.1邊境防控（外防輸入）

邊境獸醫(yī)部門應積極配合海關等加強邊境防控，堅持內防外堵，切實落實邊境巡查、消毒等各種防控措施。 禁止從疫區(qū)國家進口牛只及其產品，打擊和無害化處理走私非法入境動物及產品。與疫區(qū)國家邊境接壤省市區(qū)的相關縣市建立免疫隔離帶。

4.2 飼養(yǎng)管理（外防輸入、內防擴散）

飼養(yǎng)、隔離和屠宰等場所必須符合國家動物防疫條件，實施嚴格的衛(wèi)生消毒制度管理。 提高生物安全水平，實施吸血蟲媒控制措施（入出場前藥?。?。

4.3 日常監(jiān)測

充分發(fā)揮國家動物疫情測報體系的作用，按照疫病監(jiān)測和流行病學調查計劃，加強重點地區(qū)、重點環(huán)節(jié)的監(jiān)測;與林草等部門合作，做好易感野生動物、媒介昆蟲調查監(jiān)測，為牛結節(jié)性皮膚病風險評估提供依據。

4.4免疫接種

必要時，縣級以上畜牧獸醫(yī)主管部門提出申請，經省級畜牧獸醫(yī)主管部門批準，報農業(yè)農村部備案后采取免疫措施;實施產地檢疫時對已免疫的牛只，應在不檢疫合格證明中備注免疫日期、免疫批號、免疫劑量等信息。

4.5出入境檢疫監(jiān)管

各地畜牧獸醫(yī)部門要加強與海關、邊防等有關部門協(xié)作，加強聯(lián)防聯(lián)控形成防控合力，嚴禁進口來自牛結節(jié)性皮膚病疫情國家和地區(qū)的牛只及其風險產品，對非法入境的牛只及其產品按相應規(guī)定處置。

4.6宣傳培訓

加強對各級畜牧獸醫(yī)主管部門、動物疫病預防控制機構和動物衛(wèi)生監(jiān)督機構工作人員的技術培訓;加大牛結節(jié)性皮膚病防控知識宣傳普及力度，加強對牛只養(yǎng)殖、經營、屠宰等相關從業(yè)人員的宣傳教育，增強自主防范意識，提高從業(yè)人員防治意識。

參考文獻：

[1]農業(yè)農村部.農業(yè)農村部關于做好牛結節(jié)性皮膚病防控工作緊急通知.農牧發(fā)[2019]26號

[2]《牛結節(jié)性皮膚病防治技術規(guī)范》。動衛(wèi)中心中國獸醫(yī)發(fā)布，2020

[3]中國獸醫(yī)科學 2019，49（10）