2397例不同產(chǎn)前診斷指征的羊水細胞染色體核型分析

黃如純，皮回春，吳曼禎，高玉山，吳麗萍

（深圳市龍崗區(qū)婦幼保健院 產(chǎn)前診斷中心，廣東 深圳 518172）

0 引言

染色體核型出現(xiàn)異常會導(dǎo)致出現(xiàn)染色體疾病，在我國新生兒中發(fā)生率約0.5%～0.7%[1]，是一種較為常見的遺傳學疾病，可導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎或結(jié)構(gòu)、功能異常等，當前對于該疾病的治療并沒有徹底治愈的方式，孕婦年齡結(jié)合NT、血清學篩查、NIPT及胎兒超聲檢查是常見的產(chǎn)前篩查方法，羊膜腔穿刺術(shù)是一種較為常見的產(chǎn)前診斷技術(shù)，目前進行產(chǎn)前診斷胎兒染色體異常的金標準為羊水細胞胎兒染色體核型分析[2]。本文總結(jié)了不同產(chǎn)前診斷指征在我中心行羊水細胞培養(yǎng)的2397例孕婦的染色體核型結(jié)果，分析不同的產(chǎn)前診斷指征的孕婦羊水細胞染色體核型，研究產(chǎn)前診斷指征和胎兒染色體異常核型的關(guān)系。為產(chǎn)前篩查、產(chǎn)前診斷及產(chǎn)前咨詢提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料。試驗選取2016年1月至2019年12月之間在我院進行就診的不同產(chǎn)前診斷指征孕婦作為試驗對象，共計選取2397例孕婦，年齡17～46歲，懷孕時間16～31周。根據(jù)不同的產(chǎn)前診斷指征進行分組：單純高齡組；血清學篩查高風險組；胎兒超聲異常組；NIPT檢測結(jié)果異常組；不良孕產(chǎn)史組（復(fù)發(fā)性流產(chǎn)史、死胎、畸胎引產(chǎn)史或生育過出生缺陷兒病史等）；夫妻一方為染色體異常攜帶者。參與實驗所有產(chǎn)婦均沒有介入行產(chǎn)前診斷禁忌證，并均知情統(tǒng)一且簽訂知情同意書。

1.2 方法。在超聲引導(dǎo)下經(jīng)腹抽取羊水20 mL，常規(guī)方法進行G顯帶染色體核型分析，每例標本采用Leica SL120 全自動核型掃描儀掃描100個分裂相，選擇長短合適并且分散較為良好的核型計數(shù)20個，分析5個，嵌合體及異常核型加倍計數(shù)至100個。核型診斷標準依據(jù)2009年人類細胞遺傳學國際命名體系（ISCN2009）。

1.3 統(tǒng)計學分析。運用SPSS 23.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，采用卡方檢驗與Fisher精確概率法，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 染色體異常核型在不同產(chǎn)前診斷指征中的檢出情況。2397例產(chǎn)前診斷的羊水標本中，產(chǎn)前診斷指征分布由高到低為：血清學篩查高風險（42.76%，1025/2397）、NIPT檢測結(jié)果異常23.86%（572/2397）、超聲檢查異常15.56%（373/2397）、單純高齡15.56%（304/2397）、不良生育史4.59%（110/2397）、夫妻一方染色體異常0.54%（13/2397），共檢出染色體異常核型232例，檢出率為9.65%。不同產(chǎn)前診斷指征的染色體異常核型檢出率由高到低依次為：NIPT檢測結(jié)果異常27.8%（159/572）、夫妻一方染色體異常15.38%（2/13）、胎兒超聲異常5.36%（20/373）、血清學篩查高風險4.2%（43/1025）、不良生育史2.73%（3/110）、單純高齡1.64%（5/304），對比分析各個組別之間的異常染色體檢出率差異有統(tǒng)計學意義（χ2=257.03，P＜0.001）。

2.2 染色體異常核型分布情況。在232例異常染色體核型當中常染色體數(shù)目異常為119例，以21三體為主，占數(shù)目異常的40.95%（95/232），其中性染色體數(shù)目異常有56例，48，XXY，+21為1例，染色體非平衡性結(jié)構(gòu)異常有31例，平衡性結(jié)構(gòu)異常有8例，其中倒位3例，平衡易位4例，羅氏易位1例，嵌合體17例。染色體異常核型詳細分布情況見表1。

表1 胎兒染色體異常類型與產(chǎn)前診斷指征分布

2.3 高齡孕婦染色體異常核型差異情況。單純高齡的孕婦共304例，異常染色體核型5例，檢出率為1.97%，高齡合并其他產(chǎn)前診斷指征共623例，異常染色體核型82例，檢出率為13.2%，明顯高于單純高齡孕婦，兩者檢出率具有統(tǒng)計學意義（χ2=31.868，P＜0.001），見表2。

表2 單純高齡及高齡合并其他產(chǎn)前診斷指征分組染色羊水染色體異常核型比較（n=927）

2.4 NIPT目標染色體檢出率。NIPT目標疾病高風險進入介入性產(chǎn)前診斷共147例，NIPT示21三體高風險符合率為77.78%（63/81），NIPT示18三體高風險符合率為30.95%（13/42），NIPT示13三體高風險符合率為8.33%（2/24），見表3。

表3 147例孕婦NIPT目標疾病高風險與羊水細胞染色體診斷結(jié)果

2.5 染色體異常與胎兒超聲異常分布情況。超聲異常胎兒共373例，檢出異常染色體20例，異常核型的發(fā)生率為5.36%（20/373），其中NT增厚196例，占比52.8%（196/373），檢出異常染色體核型17例，10例21三體，2例18三體，3例性染色異常，2例非平衡性染色體異常，占胎兒超聲異常中檢測出異常染色體核型的85%（17/20）。

3 討論

本研究中，產(chǎn)前診斷指征分布前三位為血清學篩查高風險組、NIPT檢測結(jié)果異常組及胎兒超聲異常，檢出染色體異常核型232例，檢出率為9.68%，高于近幾年國內(nèi)其他地區(qū)文獻報道的檢出率（5.93%～8.10%）[3-4]，可能與NIPT、超聲異常陽性檢出率高及各地區(qū)人群染色體異常的特異性有關(guān)。但NIPT技術(shù)篩查存在一定的假陽性率及假陰性率，本研究中，NIPT陽性孕婦進一步產(chǎn)前診斷符合率分別為21三體77.78%、18三體31%、13三體8.33%，低于國內(nèi)文獻報道[5]，這主要可能跟不同實驗室以及檢測機構(gòu)質(zhì)量控制水平差異以及研究樣本有限有關(guān)。因此，NIPT檢測作為一種被大眾廣泛接受的具有無創(chuàng)性、高準確性的產(chǎn)前篩查技術(shù)，已經(jīng)成為篩查染色體異常胎兒的最有效的方法，但不能作為終止妊娠的依據(jù)，需進一步行介入性產(chǎn)前診斷以確診。

在對2404例產(chǎn)婦當中，因為血清學篩查高風險而進行羊水產(chǎn)前診斷的患者有637例，總共檢出22例異常核型，其異常率為3.45%，略低于文獻報道4.4%～4.5%[6-7]，可能與深圳市推行NIPT的政策及部分孕婦直接選擇NIPT檢查有關(guān)。但22例異常核型中，8 例21三體，3例18三體，2例性染色體異常，3例非平衡性結(jié)構(gòu)異常，1例倒位染色體核型，5例嵌合體。由此可見血清學篩查不僅能提示21三體及18三體，也能夠提示其他異常的染色體，因此針對于血清學篩選高風險孕婦，建議直接進入介入性產(chǎn)前診斷。

伴隨著當前我國的計劃生育政策的放寬以及生育年齡的推遲，高齡孕婦比例逐年增高，根據(jù)我國的《母嬰保健法實施辦法》相關(guān)規(guī)定，對于高齡孕婦直接進行羊膜腔穿刺手術(shù)的產(chǎn)前診斷，本實驗當中單純高齡直接進入介入性產(chǎn)前診斷的孕婦染色體異常的檢出率為1.64%，遠遠低于高齡合并其他產(chǎn)前診斷指征異常染色體核型檢出率（13.16%），兩者比較檢出率具有統(tǒng)計學意義。因此，對于單純高齡孕婦是否作為產(chǎn)前診斷獨立指征尚待更多樣本進一步考量，但對于高齡合并其他高危因素時應(yīng)更加重視介入性產(chǎn)前診斷，對于胎兒染色體進行檢查，及時的找出異常所在，避免染色體疾病患兒的出生。

在產(chǎn)前超聲篩選是對胎兒遺傳病進行檢測的重要手段，其中超聲異常的表現(xiàn)包含羊水過多或者過少、胎兒頸項透明層增厚、側(cè)腦室有輕度的擴張、胎兒出現(xiàn)水腫、脈絡(luò)叢囊腫、胎兒心室內(nèi)強回聲點等和胎兒染色體異常有關(guān)系[8-9]。本研究中，包括胎兒結(jié)構(gòu)異常75例，超聲軟指標異常296例，異常核型的發(fā)生率為5.36%，其中NT增厚196例，檢出異常染色體核型17例，占胎兒超聲異常中檢測出異常染色體核型的85%。所以NT增厚在進行早期篩查染色體異常的時候非常的中藥，尤其是在染色體數(shù)目異常的篩選中具有重大的提示意義，可以作為胎兒染色體異常介入行產(chǎn)前的診斷的一個非常重要的超聲篩查指標。

夫婦一方染色體異常是指夫婦一方為染色體異常攜帶者，可產(chǎn)生染色體遺傳物質(zhì)數(shù)量異常從而導(dǎo)致婚后不育、流產(chǎn)、死亡、畸形以及智力低下等等。本研究中，檢測出2例平衡易位，均來源于母親，檢出率為15.38%，已足月分娩，目前生長發(fā)育良好。232例染色體核型異常病例中，2例易位型三體，7例衍生染色體，均考慮易位染色體導(dǎo)致，因此，對于夫妻一方染色體異常者應(yīng)盡早行胎兒染色體核型分析，對于考慮易位染色體導(dǎo)致的胎兒染色體異常，因此建議夫妻雙方進行進一步的染色體核型分析檢查，評估再發(fā)風險。

綜上所述，嚴格掌握產(chǎn)前診斷指征，對于不同的產(chǎn)前診斷指正的孕婦進行羊水細胞染色體核型分析，為臨床醫(yī)生在產(chǎn)前篩查、產(chǎn)前診斷及產(chǎn)前咨詢中提供參考，對于降低染色體異常胎兒的出身具有非常重要的意義。