掂中風(fēng)湯外擦劑1號皮膚刺激性研究

邱峰源 彭卓

摘要：目的：研究掂中風(fēng)湯外擦劑1號重復(fù)用藥對小鼠皮膚的刺激性。方法：將80只TCR級小鼠隨機分三組，藥物組以掂中風(fēng)湯外擦劑1號，空白（陰性）對照組以相同體積的質(zhì)量分數(shù)為0.9%的生理鹽水（NaCL溶液），對照組（陽性）以相同體積丙酮酸加2，4-二硝基氯苯（2-4dinitro-chlorobenzene，DNCB），每天1次，用藥1周，分別在第1、3、7天觀察記錄小鼠死亡數(shù)和皮膚刺激分值。結(jié)果：中藥組與空白對照組的刺激分值比較無顯著差異（P>0.05）;陽性對照組的刺激分值均較中藥組和空白對照組顯著升高（P<0.01）。皮膚破損時，陽性對照組和中藥組的刺激分值均較皮膚完整時顯著升高，而空白對照組的刺激分值僅在用藥第1天較皮膚完整時高（P<0.05）。結(jié)論：掂中風(fēng)湯外擦劑1號外用具有較好的安全性。皮膚完整時，其對皮膚刺激性小;皮膚破損早期稍有刺激性，建議在修復(fù)破損皮膚后再使用。

關(guān)鍵詞：掂中風(fēng)湯外擦劑1號;外用;皮膚刺激性

掂中風(fēng)湯外擦劑1號為湘潭金僑醫(yī)院院內(nèi)制劑，由姜黃、當歸、沉香、檀香、徐長卿、延胡索、桑枝、桂枝等中藥組成，輔料植物油，功能疏風(fēng)通絡(luò)，行氣活血，散寒止痛。臨床主要適用于中風(fēng)病各期患者，臨床表現(xiàn)為一側(cè)肢體感覺減退，麻木不仁，關(guān)節(jié)無力等癥狀。作為外用劑型，需要考察其對皮膚的刺激性。本研究通過掂中風(fēng)湯外擦劑1號作用于小鼠完整和破損皮膚的觀察，評估其外用時的刺激性，從而為其臨床安全用藥提供實驗依據(jù)。

1 材料

1.1 藥材與試劑

掂中風(fēng)湯外擦劑1號（姜黃、當歸、沉香、檀香、徐長卿、延胡索、桑枝、桂枝，生藥濃度100%），DNCB（江蘇地浦科技股份有限公司，批號20200811324），丙酮酸（天津市四友精細化學(xué)品有限公司，批號2019030421），甲醇（天津市四友精細化學(xué)品有限公司，批號2019102415）、乙醇（天津市四友精細化學(xué)品有限公司，批號2019110131）為分析純。

1.2 實驗動物

ICR級別昆明小鼠80只，雌雄各半（180±10g），由湖南中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供（批號：430172000172）。實驗動物在觀察期間均在實驗動物房，其室溫控制在22±4℃，濕度控制在60±10%，ICR小鼠自由飲食，適應(yīng)性飼養(yǎng)3天。

2 方法

2.1 分組

隨機將小鼠分為8組，每組10只，各組小鼠雌雄各半。

2.2 掂中風(fēng)湯外擦劑對ICR小鼠完整皮膚刺激性實驗

實驗開始前24h將80只ICR小鼠兩側(cè)及背部先剪毛后脫毛，去毛范圍左、右各約3.5cm×3.5cm。ICR小鼠皮膚刺激性實驗采用同體自身左右對照法，左側(cè)脫毛區(qū)為陽性對照，右側(cè)脫毛區(qū)使用掂中風(fēng)湯外擦劑1號。取掂中風(fēng)湯外擦劑1號（受試藥）0.2mL涂在左側(cè)，用無毒聚乙烯薄膜覆蓋，固定后持續(xù)30min，30min后以無菌水洗去藥物，每天上午1次，連續(xù)用藥觀察7d。在整個實驗期間如有ICR小鼠死亡時，應(yīng)立刻進行動物尸檢觀察和病理檢查。

2.3 掂中風(fēng)湯外擦劑對ICR小鼠破損皮膚刺激性實驗

ICR小鼠破損皮膚的制備：藥前24h，用75%酒精消毒ICR小鼠裸露皮膚部位，用消毒針頭在剃毛部位做“井”字狀劃劃痕，劃破皮膚，以有組織液和血液滲出為度。ICR小鼠左右兩側(cè)皮膚破損程度基本一致。對ICR小鼠破損皮膚刺激性實驗采用與對ICR小鼠完整皮膚刺激性實驗以相同方法進行實驗。

2.4 實驗指標觀察

按表1進行皮膚反應(yīng)評分，以受試動物積分的平均值進行綜合評價，按表2判定皮膚刺激強度。皮膚刺激性評分標準及評價標準：皮膚反應(yīng)積分=紅斑分值+水腫分值。

2.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用Graphpad Prism 8.0處理所得數(shù)據(jù)，實驗數(shù)據(jù)采均值±標準差（x?+SD）表示，實驗動物結(jié)果書記分析組間比較采用單因素方差分析檢驗，有顯著差異（P>0.05）。

3 結(jié)果

各組ICR小鼠皮膚小反復(fù)用藥皮膚刺激分值變化情況的刺激情況見表2和圖1～6。

3.1 不同時間ICR小鼠皮膚刺激性結(jié)果組間比

用藥7d內(nèi)，掂中風(fēng)湯外擦劑1號與NaCL溶液對ICR小鼠皮膚的皮膚反應(yīng)積分比較無明顯差異（P>0.05）;第3和第7天的皮膚反應(yīng)積分較空白組和藥物組顯著升高（P<0.01）。

3.2 ICR小鼠皮膚完整性對刺激分值的影響

當ICR小鼠的皮膚破損時，第1，3，7天的皮膚反應(yīng)積分過敏組均較皮膚完整時顯著升高（P<0.01）;藥物組第1，3天的皮膚反應(yīng)積分較皮膚完整時顯著升高（P<0.05），而空白組的皮膚反應(yīng)積分僅在用藥第1天較皮膚完整時顯著升高（P<0.05）。

4 討論

本動物實驗結(jié)果表明，掂中風(fēng)湯外擦劑1號對ICR小鼠的刺激反應(yīng)為無刺激性反應(yīng)類型，具有良好的安全性。在整個皮膚刺激性實驗觀察期間，ICR小鼠沒有出現(xiàn)1例死亡，說明掂中風(fēng)湯外擦劑1號對皮膚的影響基本是無毒性的。掂中風(fēng)湯外擦劑1號方即使在皮膚破損的情況下，也并未達到DNCB所造成的嚴重程度，所以掂中風(fēng)湯外擦劑1號外用，無論機體皮膚完整與否，均可安全使用;但若機體皮膚存在嚴重破損，使用掂中風(fēng)湯外擦劑1號可能會增加對機體皮膚的刺激性，故建議臨床上慎重使用。

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作者簡介：邱峰源（1981— ），男，副主任醫(yī)師，現(xiàn)為湘潭金僑醫(yī)院康復(fù)科主任，主要從事腦中風(fēng)防治及康復(fù)工作。

通訊作者：彭卓（1979— ），男，醫(yī)學(xué)碩士，副主任醫(yī)師，湘潭醫(yī)衛(wèi)職業(yè)技術(shù)學(xué)院院專任教師兼附屬醫(yī)院（湘潭市第三人民醫(yī)院）急診科主任，主要從事臨床醫(yī)學(xué)教學(xué)和急診臨床診療工作。