三種不同生化分析儀測定結(jié)果的比對試驗

揭小梅 張華華

（1.東莞市中心血站城區(qū)捐血中心，東莞 523000；2.廣東醫(yī)學院生物學教研室，東莞 523808）

全自動生化儀在臨床檢測中應(yīng)用廣泛，不同型號的生化分析儀在使用過程中針對同一標本檢測會出現(xiàn)一定的差異，而對比試驗則是減少此類誤差的有效方法［1］。在檢驗人員日常工作中，對比試驗的有效開展是推進檢測工作標準化與規(guī)范化的關(guān)鍵所在。國內(nèi)有研究指出［2］，干化學生化儀與濕化學生化儀檢測機制與檢測系統(tǒng)具有一定的差異，為有效減少此種差異，增加不同型號化學生化儀在相同項目檢測中的可比性與一致性，定期開展對比試驗是極為必要的［3］。基于此，選取4040＋生化分析儀、全血干式生化分析儀、全自動生化分析儀三種不同檢測儀器進行方法比對分析，探討各生化分析儀之間檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）的項目測定結(jié)果，報告如下。

1 試驗材料與測定方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗儀器

研究中涉及的三種生化分析儀分別為：Roertriele 4040＋半自動生化分析儀、Roche Reflotron Plus全血干式生化分析儀、Roche Reflotron Plus全自動生化分析儀。

1.1.2 試驗試劑

4040＋半自動生化分析儀采用的試劑為ALT測定試劑盒（北京瑞爾達）速率法，檢測試劑內(nèi)不添加磷酸吡哆醛；Roche Reflotron Plus全血干式生化分析儀、Roche Reflotron Plus全自動生化分析儀均采用其專用試紙條（批號43841301）；研究中所采用的ALT定值質(zhì)控血清為RANDOX質(zhì)控品血清。以廠家校準的Roertriele 4040＋半自動生化分析儀作為目標檢測儀器，其余兩種儀器為待評檢測儀器。

1.1.3 測定樣品處理

基于質(zhì)控片說明書進行試劑復(fù)溶、放置、混勻后分裝冷凍。收集獻血者新鮮血清樣本，并將樣本分為3份供三種生化分析儀進行檢測。

1.2 測定方法

研究中三種生化分析儀均采用酶法對ALT進行檢測，檢測中流程均按照廠商試劑盒說明書嚴格執(zhí)行［4］。試驗前首先對各個儀器進行維護保養(yǎng)與校準，進行檢測的過程中均采用質(zhì)控品進行監(jiān)控，統(tǒng)計批間精密度［5］。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

通過計算三種生化分析儀的CV%進行精密度的測定，測定標準基于CLIA′88中TEa值進行評價，日間精密度需小于CLIA′88中TEa值的0.33倍，日內(nèi)精密度需小于CLIA′88中TEa值的0.25倍。對于檢驗結(jié)果的可比性進行坐標軸的建立，以4040＋半自動生化分析儀檢測結(jié)果的Y軸，以Roche Reflotron Plus全血干式生化分析儀、Roche Reflotron Plus全自動生化分析儀分別作為X1與X2，對于三種儀器數(shù)據(jù)進行離群值分析，隨后建立線性回歸方程并計算相關(guān)系數(shù)（r），回歸方程設(shè)置為Y＝bX＋a。以r＞0.975作為X范圍合適的標準。基于建立的線性回歸方程進行方法之間的儀器誤差進行計算，將ALT檢驗中的醫(yī)學決定水平處的濃度X值代入線性回歸方程進行相應(yīng)Y值的計算，將相應(yīng)Y值減去X值的絕對值與X值進行求比，此比值為SE%，若SE%＜CLIA′88中TEa值的0.33倍則判定為可接受，≤CLIA′88中TEa值的0.25倍則判定為組間存在可比性，作為獻血篩查可接受。

1.4 統(tǒng)計學分析

使用SPSS20.0軟件與Excel表格做統(tǒng)計學結(jié)果分析。

2 結(jié)果

2.1 三種儀器的日內(nèi)與日間精密度比較

在三種儀器的精密度分析中，三種儀器的日內(nèi)精密度低于CLIA′88中TEa值的0.25倍，日間精密度誤差小于CLIA′88中TEa值的0.33倍，見表1、表2。

表1 三種儀器日內(nèi)精密度比較

表2 三種儀器日間精密度比較

2.2 ALT檢測回歸方程、r值計算、可接受性能評價

在三種儀器的與目標系統(tǒng)的比對中，相應(yīng)的相關(guān)系數(shù)r＞0.975，組間基本無差別（P＞0.05），ALT的回歸方程1為Y1＝1.002X1＋0.26，r值經(jīng)計算為0.9972（P＞0.05），回歸方程2為Y2＝1.01X2＋0.26，r值經(jīng)計算為0.9989（P＞0.05）；而在系統(tǒng)誤差方面，三種儀器的SE%均＜CLIA′88中規(guī)定TEa 0.5倍，見表3。

表3 基于目標檢測儀器的可接受性能評價

3 討論

在不同的試驗室與檢測儀器進行系統(tǒng)的項目檢測中，往往會造成不一樣的結(jié)果，此類情況往往會導致對于獻血者ALT能否通過初步篩查的判斷造成一定的困難。如何使得在不同檢測儀器下的檢測結(jié)果具有同一性與相關(guān)性，已成為推進檢驗試驗室標準統(tǒng)一與規(guī)范化操作的關(guān)鍵［6］。

比對試驗是有效使得試驗室與檢測儀器能夠?qū)τ谕豁椖拷Y(jié)果能夠具有一致性與可比性的重要方法。此類試驗的結(jié)果往往是試驗室內(nèi)開展整改工作的前提條件，但是開展此類試驗關(guān)鍵就是對于儀器本身的精密度進行前提分析，從而判斷儀器本身的精密性是否能夠滿足臨床檢驗的開展［7］。研究中通過計算三種生化分析儀的CV%進行精密度的測定，測定標準基于CLIA′88中TEa值進行評價，日間精密度需小于CLIA′88中TEa值的0.33倍，日內(nèi)精密度需小于CLIA′88中TEa值的0.25倍。提示該次研究中的方法學比對試驗結(jié)果指出三種儀器往往均能夠達到測定結(jié)果的一致性，符合血液篩查判斷結(jié)果，檢測結(jié)果之間往往差異不大（P＞0.05），能夠?qū)τ诟鞣N儀器中的檢測結(jié)果直接采用。

研究中采用雙因素混合模型對于三種儀器的結(jié)果進行可靠性分析，從而對于各儀器的項目檢測結(jié)果穩(wěn)定性進行判定，當r的數(shù)值越接近1時，代表著本次項目的結(jié)果穩(wěn)定性越為良好。結(jié)果穩(wěn)定性越良好，就代表著項目測定的過程中產(chǎn)生的隨機誤差影響往往會越好，可應(yīng)用于臨床檢測過程中［8］。研究中發(fā)現(xiàn)在三種儀器的與目標系統(tǒng)的比對中，相應(yīng)的相關(guān)系數(shù) r＞0.975，組間基本無差別（P＞0.05），ALT的回歸方程1為Y1＝1.002X1＋0.26，r值經(jīng)計算為0.9972（P＞0.05），回歸方程2為Y2＝1.01X2＋0.26，r值經(jīng)計算為0.9989（P＞0.05）；而在系統(tǒng)誤差方面，三種儀器的SE%均＜CLIA′88中規(guī)定Tea 0.5倍，從而可以發(fā)現(xiàn)該次研究的穩(wěn)定性較高，而研究中的三種儀器均具有較好的性能特征，在以CLIA′88標準的要求的前提下，日內(nèi)與日間精密度都滿足相應(yīng)的要求，同時Roertriele 4040＋半自動生化分析儀、Roche Reflotron Plus全血干式生化分析儀、Roche Reflotron Plus全自動生化分析儀具有很好的相關(guān)性，如果干化學檢測結(jié)果與濕化學檢測結(jié)果具有可比性，則可使用相同的參考區(qū)間。三臺儀器的檢測結(jié)果具有較好的一致性與相關(guān)性，檢測結(jié)果較為準確可靠，可作為獻血者初步篩查和血液質(zhì)量的判斷依據(jù)。