枸杞多糖對脂多糖誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞凋亡的影響

閆 梅 ， 馬 倩 ， 馬雅玲 ，， 劉 媛 ， 蔣 璐

（1.寧夏醫(yī)科大學(xué)，銀川 750004； 2.寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院眼科，銀川 750004）

年齡相關(guān)性黃斑變性（age-related macular degeneration，AMD）是累及視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層、色素上皮層、Bruch 膜及脈絡(luò)膜毛細(xì)血管層的退行性病變，涉及氧化應(yīng)激、光損傷、炎癥、遺傳基因等多種致病因素[1]。視網(wǎng)膜色素上皮（retinal pigment epithelium，RPE）位于神經(jīng)視網(wǎng)膜與脈絡(luò)膜之間，功能包括參與構(gòu)成血-視網(wǎng)膜屏障、調(diào)節(jié)代謝物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)、吞噬感光細(xì)胞外節(jié)段、調(diào)節(jié)局部炎性反應(yīng)、參與黃斑的免疫防御、保護(hù)視網(wǎng)膜免受過度光照等[2]。炎癥、氧化應(yīng)激等刺激可造成RPE 炎性反應(yīng)損傷，導(dǎo)致RPE 吞噬功能下降，未消化的碎片持續(xù)存于胞漿，久之溢出并沉積于Bruch 膜和基底膜之間形成玻璃膜疣，導(dǎo)致萎縮性AMD，再進(jìn)展造成Bruch 膜破壞，新生血管出現(xiàn)，形成滲出性 AMD[1，3]。有學(xué)者[4-7]研究發(fā)現(xiàn)，許多中藥及藥物存在抗炎的功效，例如姜黃素、七葉皂苷、漢黃苓素，血管緊張素轉(zhuǎn)換酶激動劑等，并均采用脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)建立AMD 的細(xì)胞炎性反應(yīng)模型 。

枸杞多糖（lycium barbarum polysaccharide，LBP）具有明確的抗炎、抗凋亡的作用，它可通過核因子-kB（nuclear factor-kB，NF-kB）通路調(diào)節(jié)炎癥及凋亡，也能夠通過抗凋亡機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤作用[8-10]。本課題組前期研究[11-13]證實(shí)了LBP 對氧化應(yīng)激造成視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡具有抑制作用。本實(shí)驗(yàn)以研究RPE 炎性反應(yīng)為目標(biāo)，應(yīng)用LPS 誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞-19（adult retinal pigment epithelial cells-19，ARPE-19）建立炎性反應(yīng)模型，觀察LBP 對細(xì)胞炎性反應(yīng)及相關(guān)細(xì)胞凋亡的影響，探討RPE 炎性反應(yīng)機(jī)制，以期為AMD 的藥物治療及預(yù)防提供新思路。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑 ARPE-19 細(xì)胞株（中科院上海細(xì)胞庫）、LBP（寧夏沃福百瑞）、LPS（美國 Sigma）、胎牛血清（美國 Gibco）、DMEM-F12 培養(yǎng)基（美國Hyclone）、CCK-8 細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑盒（上海貝博）、Annexin V-FITC 凋亡檢測試劑盒（上海貝博）、RT-PCR 逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（Invitrogen）、SYBR Green qPCR Master Mix （DBI Bioscience）、總 RNA 提取試劑盒（北京天根）、引物（上海生工）、全蛋白提取試劑盒（凱基生物）、BCA 蛋白定量試劑盒（凱基生物）、化學(xué)發(fā)光高敏檢測試劑盒（凱基生物）、人白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6、IL-1β 及單核細(xì)胞趨化蛋白-1（monocyte chemotactic protein-1，MCP-1）的ELISA試劑盒（酶免，CAT：0049H2、0181H2、0081H2）、兔源多克隆抗體 Bax、Bcl-2（BIOSS，CAT：0127R、0032R）、鼠源單克隆抗體β-Actin（中杉金橋，CAT：TA-09）、羊抗兔 HRP 標(biāo)記 IgG 抗體（Affinity，CAT：#S0001）、羊抗鼠 HRP 標(biāo)記 IgG 抗體（索萊寶，CAT：SE131）。

1.1.2 儀器 Infinite M200 Pro 酶標(biāo)儀（瑞士TECAN）、PowerPac 200 電泳儀、IQ5 RT-PCR 儀及ChemiDocTouch 化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)（均購自美國 Bio-Rad）。

1.2 方法

1.2.1 ARPE-19 細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞于 37 ℃、5%CO2條件中培養(yǎng)，待細(xì)胞生長約為85%時使用0.25%含乙二胺四乙酸（EDTA）的胰蛋白酶進(jìn)行消化，1200 r·min-1離心 5 min，1∶3 傳代，加入完全培養(yǎng)基（10%胎牛血清，1%青鏈霉素混合液，89%DMEM-F12 培養(yǎng)基）接種于 T25 培養(yǎng)瓶中，2 d 換液 1 次，穩(wěn)定傳代后取 2～4 代用于實(shí)驗(yàn)。同時，細(xì)胞密度為85%時進(jìn)行消化離心，加入凍存液，含10%二甲基亞砜（DMSO）、90%胎牛血清（FBS），重懸，放入-80 ℃冰箱凍存，次日投入液氮長期保存。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)分組及處理 根據(jù)LBP 的不同濃度將細(xì)胞隨機(jī)分為空白組，模型組，0.1、0.5、1 mg·mL-1LBP 組。所有分組加藥前均使用不含血清的培養(yǎng)基饑餓24 h?？瞻捉M使用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，與其余組同時換液；模型組給予含10 μg·mL-1LPS的完全培養(yǎng)基刺激24 h；LBP 組分別給予含有0.1、0.5、1 mg·mL-1的 LBP 完全培養(yǎng)基培養(yǎng) 24 h后，再以同樣造模方式給予10 μg·mL-1LPS 刺激24 h。

1.2.3 CCK-8 觀察細(xì)胞活力情況 按CCK-8 試劑盒步驟細(xì)胞以濃度為5×103/mL-1接種于96 孔板中，培養(yǎng)24 h。設(shè)置對照孔、無細(xì)胞空白孔及實(shí)驗(yàn)孔，給予不同濃度 LBP 及 10 μg·mL-1LPS 后再培養(yǎng)24、48 和72 h。檢測時加入10%CCK-8，37 ℃培養(yǎng)箱中避光孵育2 h，酶標(biāo)儀450 nm 檢測OD 值。

1.2.4 流式細(xì)胞儀觀察細(xì)胞凋亡 使用6 孔板培養(yǎng)細(xì)胞，待密度至85%時按試劑盒步驟進(jìn)行處理。使用不含 EDTA 的胰酶消化，300×g，4 ℃離心5 min 收集細(xì)胞，再用預(yù)冷PBS 洗滌細(xì)胞兩遍，吸取400 μL Annexin V 結(jié)合液重懸細(xì)胞，濃度為1×106/mL-1，再重懸加入 5 μL Annexin V-FITC 染色液，混勻后避光條件下，4 ℃孵育15 min。再加入10 μL PI 染色液，4 ℃避光孵育 5 min，1 h 內(nèi)流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。

1.2.5 RT-PCR 檢測細(xì)胞內(nèi)凋亡相關(guān)因子的mRNA 表達(dá)量 上述各組細(xì)胞接受處理并收集后按照天根總RNA 提取試劑盒步驟過柱提取，提取后測定RNA 濃度，每組取等量RNA 參照Invitrogen 逆轉(zhuǎn)錄試劑盒步驟，進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成為cDNA，-80 ℃保存。使用DBI SYBR Green qPCR Master Mix 試劑盒，按照步驟以cDNA 為模板進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR 擴(kuò)增。Bcl-2 引物序列：F為 GACTTCGCCGAGATGTCCAG；R 為 GAACTCAAAGAAGGCCACAATC。Bax 引物序列：F 為CGAACTGGACAGTAACATGGAG；R 為 CAGTTTG CTGGCAAAGTAGAAA。GAPDH 引物序列：F 為CAGGAGGCATTGCTGATGAT；R 為 GAAGGCTG GGGCTCATTT。反應(yīng)體系為20 μL。采用試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)三步法進(jìn)行RT-PCR 擴(kuò)增，反應(yīng)條件為：預(yù)變性為 95 ℃時 2 min；PCR 反應(yīng)為 95 ℃時10 s，50～60 ℃時 30～34 s，72 ℃時 30 s，共 40 個循環(huán)；熔解曲線為55～98 ℃時84 個循環(huán)。得出Ct值，以GAPDH 為內(nèi)參，使用相對定量法，計(jì)算2-△△Ct值。

1.2.6 Western blot 檢測相關(guān)因子蛋白表達(dá)水平 各組細(xì)胞接受處理后，根據(jù)全蛋白提取試劑盒步驟，冷PBS 洗滌細(xì)胞2 次，加入提前配制的裂解液并刮出細(xì)胞，收集放置冰上，間隔4 min震蕩 1 次，每次持續(xù)1 min，循環(huán) 5 次，離心機(jī)12000 r·min-1，4 ℃離心 20 min 取上清液，依照試劑盒步驟進(jìn)行蛋白定量。剩余按體積比加入上樣緩沖液，放入100 ℃水中變性10 min 備用。配制10%SDS-凝膠，取30 μg 蛋白上樣，加入電泳液，連接電泳儀調(diào)整電壓為60 V 進(jìn)行電泳，至玻璃板底部后打開切膠進(jìn)行轉(zhuǎn)膜（PVDF 膜、濕轉(zhuǎn)、220 mA、60 min）。拿出后5%脫脂奶粉封閉4 h，洗膜（0.1%PBST5 min，重復(fù) 3 次）后一抗封閉過夜，第二天洗膜后二抗孵育2 h，再洗膜，取出并于表面滴加超敏化學(xué)發(fā)光液進(jìn)行曝光。使用Image J 軟件進(jìn)行條帶灰度值分析，Bcl-2、Bax 分別與相應(yīng)β-Actin 比值進(jìn)行計(jì)算。

1.2.7 ELISA 檢測細(xì)胞上清液炎癥因子的表達(dá)水平 各組細(xì)胞給予處理后，無菌管收集上清液，2500 r·min-1離心 20 min，放入-80 ℃?zhèn)溆?。按試劑盒步驟同時設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣品孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加入不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品50 μL。各樣品稀釋5 倍后每孔加入50 μL，空白孔不加樣品，再加入酶標(biāo)試劑100 μL，封板后37 ℃溫箱孵育1 h。取出后棄液、甩干、洗滌。每次洗滌30 s，反復(fù)5 次，拍干。然后每孔避光加入顯色劑A 50 μL、B 50 μL，振蕩混勻，37 ℃避光顯色 15 min，取出每孔加入終止液50 μL 終止反應(yīng)，15 min 內(nèi)放入酶標(biāo)儀，設(shè)置450 nm 波長檢測各孔OD 值。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線公式計(jì)算并乘以稀釋倍數(shù)得出終濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，GraphPad Prism 7 作圖。符合正態(tài)性、方差齊性的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，CCK-8結(jié)果分析采用兩因素方差分析，其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果多組之間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用 LSD-t 檢驗(yàn)。P≤0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 LBP 對 LPS 誘導(dǎo)后 ARPE-19 細(xì)胞密度及形態(tài)的影響

各組細(xì)胞培養(yǎng)24 h 后使用倒置熒光顯微鏡明場觀察細(xì)胞形態(tài)，正常生長的ARPE-19 細(xì)胞呈卵圓形、三角形，細(xì)胞密度增高后呈鋪路石樣外觀。與空白組相比，LPS 誘導(dǎo)后細(xì)胞密度降低，部分細(xì)胞呈現(xiàn)出長梭形，部分收縮變圓。而LBP處理組細(xì)胞隨著LBP 濃度升高其密度及形態(tài)趨于正常，見圖1。

2.2 LBP 對 LPS 誘導(dǎo)后 ARPE-19 細(xì)胞活力及增殖的影響

CCK-8 結(jié)果顯示，與空白組相比，模型組ARPE-19 細(xì)胞活力隨時間延長而下降，各濃度LBP組細(xì)胞活力隨著LBP 濃度和時間的延長而升高（F交互=31.35，F(xiàn)時間=935.5，F(xiàn)濃度=85.85，P 均＜0.01）。其中，各時間點(diǎn) 0.1 mg·mL-1組與 1 mg·mL-1組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 均＜0.05），見圖 2。

2.3 LBP 對LPS 誘導(dǎo)后 ARPE-19 細(xì)胞凋亡率的影響

流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果表明，各組細(xì)胞凋亡率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=37.960，P＜0.05）。模型組細(xì)胞凋亡率較空白組升高，不同濃度LBP 組細(xì)胞凋亡率均較模型組下降（P 均＜0.05），1 mg·mL-1LBP 組細(xì)胞凋亡率較 0.1 mg·mL-1LBP 組降低（P＜0.05），見圖 3。

圖1 倒置熒光顯微鏡觀察各組細(xì)胞密度及形態(tài)的變化（×100）

圖2 CCK-8 檢測LBP 對LPS 誘導(dǎo)后ARPE-19 的細(xì)胞活力及增殖的影響

圖3 不同濃度LBP 對LPS 誘導(dǎo)后ARPE-19 凋亡率的影響

2.4 LBP 對 LPS 誘導(dǎo)后 ARPE-19 細(xì)胞內(nèi)凋亡相關(guān)因子mRNA 表達(dá)量的影響

RT-PCR 結(jié)果顯示，各組 Bcl-2、Bax mRNA表達(dá)量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=19.616、39.801；P均＜0.01）。與空白組比較，模型組Bcl-2 表達(dá)量降低、Bax 表達(dá)量升高（P 均＜0.01）；與模型組比較，各濃度 LBP 組 Bcl-2 均上調(diào)、Bax 均下調(diào)（P 均＜0.01）；0.1 mg·mL-1LBP 組與 1 mg·mL-1LBP 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見圖 4。

2.5 LBP 對 LPS 誘導(dǎo)后 ARPE-19 細(xì)胞內(nèi)凋亡相關(guān)因子蛋白表達(dá)量的影響

圖4 不同濃度LBP 對LPS 誘導(dǎo)后ARPE-19 中Bcl-2、Bax 的mRNA 相對表達(dá)量的影響

Western blot 結(jié)果顯示，各組 Bcl-2、Bax 蛋白相對表達(dá)量差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=24.811、39.110，P 均＜0.01）。模型組較空白組的 Bcl-2 表達(dá)量降低、Bax 升高（P 均＜0.05）；與模型組相比，0.1、0.5、1 mg·mL-1LBP 組的 Bcl-2 表達(dá)量均增加，Bax 表達(dá)量均減少（P 均＜0.01）；1 mg·mL-1LBP 組 Bax 表達(dá)量比 0.1 mg·mL-1組減少（P＜0.05），見圖 5。

2.6 LBP 對 LPS 誘導(dǎo) ARPE-19 外分泌炎癥因子的影響

ELISA 結(jié)果顯示，各組 IL-6、IL-1β 及 MCP-1蛋白表達(dá)量差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=650.978、14.332、54.249，P 均＜0.05）。與空白組相比，模型組上清液內(nèi) IL-6、IL-1β 及 MCP-1 蛋白表達(dá)量均升高；與模型組相比，各濃度LBP 組IL-6、IL-1β 及 MCP-1 蛋白表達(dá)量均降低（P 均＜0.05）。1 mg·mL-1LBP 組的各因子濃度較 0.1 mg·mL-1LBP 組均降低（P 均＜0.05），見圖 6。

3 討論

LBP 是中藥枸杞中的主要活性成分，能夠通過不同的炎性通路抑制多種細(xì)胞中炎癥因子的生成以及細(xì)胞凋亡的發(fā)生。首先，LBP 能夠通過抑制細(xì)胞炎癥減少凋亡的發(fā)生。Li 等[14]用LBP 預(yù)處理通過激活絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated brotein kinase，MAPK）炎性通路逆轉(zhuǎn)凋亡因子Caspase-3 的表達(dá)，達(dá)到抗人角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡的目的。Zhao 等[15]發(fā)現(xiàn)LBP 通過抑制炎性通路NF-kB 和p38 MAPK 的激活降低海馬神經(jīng)元中炎性因子腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor，TNF-α）、IL-1β、IL-6、IL-10 的水平，同時減弱神經(jīng)元細(xì)胞中的線粒體凋亡途徑，抑制了小鼠腦缺血損傷造成的細(xì)胞凋亡。再者，AMD 的炎癥機(jī)制病理過程為RPE 受到外界刺激后活化，產(chǎn)生多種炎癥因子MCP-1、IL-8 等，細(xì)胞內(nèi)活化的細(xì)胞因子及生長因子異常造成凋亡基因的異常，導(dǎo)致RPE 細(xì)胞凋亡[16]。并且，近年有關(guān)炎癥與細(xì)胞凋亡的研究中也表明，炎癥時細(xì)胞內(nèi)炎性小體形成，Caspase-8 可被激活，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡[17]。Celkova等[18]也在AMD 患者的眼中發(fā)現(xiàn)RPE 的細(xì)胞程序性死亡及 NLRP3 炎性體、IL-18、Caspase-1 及IL-1β 的升高，以及NLRP3 炎性體相關(guān)通路的激活。研究[19]發(fā)現(xiàn)，滲出性AMD 患者房水中炎癥因子IL-6、MCP-1 的蛋白水平高于正常人，MCP-1參與AMD 中炎性反應(yīng)的調(diào)控及脈絡(luò)膜新生血管的形成，所以本實(shí)驗(yàn)研究選擇檢測LBP 對AMD的細(xì)胞炎癥模型中RPE 細(xì)胞凋亡線粒體途徑標(biāo)志性凋亡因子Bcl-2、Bax 的影響，以及細(xì)胞外分泌炎癥因子IL-6、IL-1β、MCP-1 的變化，用以判斷LBP 是否可能通過減少炎癥因子的形成降低RPE 炎性反應(yīng)，從而抑制炎性反應(yīng)相關(guān)的RPE 細(xì)胞凋亡。

圖5 不同濃度LBP 對LPS 誘導(dǎo)后ARPE-19 中Bcl-2、Bax 的蛋白相對表達(dá)量的影響

圖6 不同濃度LBP 對LPS 誘導(dǎo)后ARPE-19 上清液中炎癥因子的影響

由于LPS 作為AMD 炎性細(xì)胞模型中的細(xì)胞凋亡刺激物被研究者廣泛采用[20-21]。故本實(shí)驗(yàn)選用了LPS 誘導(dǎo)ARPE-19 造成AMD 體外炎癥模型。為判斷RPE 的炎性反應(yīng)，本研究檢測了LBP對LPS 誘導(dǎo)ARPE-19 后細(xì)胞上清液中炎癥因子IL-6、IL-1β、MCP-1 蛋白濃度的變化，以明確LBP 對ARPE-19 外分泌炎癥因子的影響。結(jié)果表明，LPS 造成細(xì)胞上清中炎癥因子含量的升高，而在使用不同濃度LBP 進(jìn)行預(yù)處理后，炎癥因子 IL-6、IL-1β、MCP-1 濃度下降，證實(shí) LBP 對LPS 誘導(dǎo)的ARPE-19 炎性反應(yīng)具有抑制作用。

針對細(xì)胞凋亡，本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了三個方面的觀察。首先，LPS 可造成ARPE-19 細(xì)胞活力以及細(xì)胞增殖的下降，同時CCK-8 結(jié)果顯示，在給予LBP預(yù)處理后，受LPS 刺激影響的ARPE-19 細(xì)胞活力及增殖能力明顯被逆轉(zhuǎn)，并且隨LBP 濃度的升高保護(hù)作用明顯增強(qiáng)，在本研究中1.0 mg·mL-1的LBP 作用最強(qiáng)。LBP 對細(xì)胞活力以及細(xì)胞增殖的保護(hù)作用，側(cè)面驗(yàn)證了LBP 能夠抑制細(xì)胞增殖周期內(nèi)LPS 誘導(dǎo)炎性損傷所致ARPE-19 的減少，拮抗炎性反應(yīng)相關(guān)的RPE 細(xì)胞凋亡。

其次，為明確LBP 的抗凋亡作用是否存于出現(xiàn)炎性反應(yīng)的RPE 細(xì)胞中，本研究觀察LBP 對LPS 誘導(dǎo)后ARPE-19 的細(xì)胞凋亡率的影響。發(fā)現(xiàn)經(jīng) LPS 誘導(dǎo)ARPE-19 細(xì)胞凋亡率上升，而LBP 預(yù)處理后細(xì)胞凋亡率下降，1 mg·mL-1LBP處理后細(xì)胞凋亡率從19%左右降低到8%左右，并隨LBP 濃度升高而下降，表明LBP 具有抑制炎性反應(yīng)相關(guān)的RPE 細(xì)胞凋亡的作用。

最后，通過對凋亡蛋白的研究也證實(shí)了LBP抗凋亡的作用。在細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展中，已明確細(xì)胞凋亡的線粒體途徑與細(xì)胞應(yīng)激及發(fā)育狀態(tài)密切相關(guān)[22]。細(xì)胞在應(yīng)激損傷的狀態(tài)下，能夠改變Bcl-2 蛋白家族的功能，從而破壞線粒體外膜的完整性，且Bcl-2 蛋白家族中三種效應(yīng)蛋白Bax、Bak 和Bok 直接引起線粒體外膜通透性的增加，將線粒體膜間隙的蛋白質(zhì)釋放到胞漿中，而其中活性Bax 和Bak 被抗凋亡蛋白Bcl-2 抑制[22]。故本研究選擇觀察Bcl-2、Bax 這兩種線粒體途徑標(biāo)志性因子的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在ARPE-19 細(xì)胞中，LPS 刺激引起細(xì)胞凋亡率升高，也能誘導(dǎo)抗凋亡蛋白Bcl-2 的表達(dá)量降低、凋亡效應(yīng)蛋白Bax 的表達(dá)量升高。各濃度LBP 作用顯示其在減少炎癥因子外分泌的同時，使Bcl-2 及Bax的表達(dá)逆轉(zhuǎn)，并隨LBP 濃度升高而增強(qiáng)。由此證實(shí)LPS 存在誘導(dǎo)RPE 炎性反應(yīng)及細(xì)胞凋亡的作用，以及LBP 具有降低RPE 炎性反應(yīng)及細(xì)胞凋亡的能力，還表明抑制細(xì)胞凋亡途徑可能通過線粒體途徑進(jìn)行，但凋亡途徑問題還需進(jìn)一步研究明確。

綜上所述，LBP 對 LPS 誘導(dǎo)的 ARPE-19 炎性損傷具有保護(hù)作用，可通過減少分泌炎癥因子IL-6、IL-1β 及 MCP-1 以及逆轉(zhuǎn) RPE 細(xì)胞內(nèi)Bcl-2、Bax 的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程，從而抑制炎性反應(yīng)相關(guān)的RPE 細(xì)胞凋亡。