王承功
羊小反芻獸疫也稱羊瘟、小反芻獸疫,是由小反芻獸疫病毒誘發(fā)的山羊與綿羊等小反芻獸的高致病性傳染病,高熱、口炎、腹瀉與肺炎等是本病的主要特征。隨養(yǎng)羊產(chǎn)業(yè)規(guī)模擴大,羊小反芻獸疫的患病率有逐年上升的趨勢,對養(yǎng)殖戶經(jīng)濟利潤造成嚴(yán)重?fù)p失。加強羊小反芻獸疫防治被提上日程。
1 材料與方法
1.1 羊拭子樣品
本疫控中心2019及2020年度采集11個縣區(qū)級羊規(guī)模場及散養(yǎng)戶4批次,273養(yǎng)殖戶,共1280份拭子樣品,使用友康恒業(yè)生物科技(北京)有限公司病毒保存管保存。
1.2 試劑
診斷標(biāo)準(zhǔn):GB/T27982-2011。診斷試劑,小反芻獸疫病毒熒光RT-PCR盒(批號:CP18070501)中山達(dá)安基因股份有限公司。小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸檢測(批號:040172005)青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心。提取試劑,長春市志昂生物科技有限公司生產(chǎn)的病毒DNA/RNA磁珠法提取試劑盒(T005型),批號為20200814。上海拜諾生物科技有限公司(批號:20180503)。
1.3 主要儀器
核酸提取儀(型號King Fisher Flex):美國Thermo,高速冷凍離心機(型號3K-15);德國SIGMA;PCR儀(型號Q5):美國Thermo Fisher。
1.4 實驗過程
檢查樣品密封,將試劑置于室溫解凍。按照核酸提取試劑中的說明書進(jìn)行提取操作。配置試劑加入sample板中或?qū)?yīng)的列中,取拭子樣品對應(yīng)加入,使用核酸提取儀進(jìn)行核酸提取。最后取出核酸樣品。將核酸板中提取的核酸按照相應(yīng)的小反芻獸疫病毒核酸檢測試劑盒中要求進(jìn)行核酸檢測。依照不同的試劑盒的試驗成立標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行結(jié)果讀取。
2 結(jié)果與分析
2.1 結(jié)果
4批次共1280份樣品檢測結(jié)果,1280份樣品中小反芻獸疫檢測結(jié)果皆為陰性,無陽性樣品(詳見表1)。