信宜地區(qū)婚育人群地中海貧血篩查及血紅蛋白A2 臨界值的確定探討*

任天鳳，楊浩，冼國菁（信宜市婦幼保健院檢驗科，廣東 信宜 525300）

地中海貧血是一種由于血紅蛋白分子中珠蛋白基因突變或缺失導致合成不平衡的遺傳性疾病。 隨著人口流動的加速，其發(fā)病率開始增多，廣東地區(qū)婚育人群α 地貧基因攜帶率約為12.8%［1］。信宜地區(qū)處于粵西地區(qū)，其人口數量多，且外來人口流入頻繁，是廣東省地貧的高發(fā)地區(qū)之一。 目前尚無治療地貧的有效手段，重型地貧患兒將給家庭、社會帶來巨大的精神和經濟負擔。 臨床上主要經血液學參數來評估地中海貧血類型、陽性狀況，特別是Hb A2已成為基層醫(yī)院常規(guī)開展地中海貧血篩查的重要指標［2］。目前臨床上成人常以Hb A2﹤2.5%作為α 地貧篩査的臨界值，但不同地區(qū)在篩查地貧時人群存在區(qū)域性差異，采用的技術方法和儀器設備不同，Hb A2的臨界值也會不同［3］。 本研究回顧性分析4764 例信宜地區(qū)婚育人群的地貧篩查與地貧基因診斷，繪制ROC 曲線， 探討信宜地區(qū)婚育人群Hb A2篩查α 地中海貧血的最佳臨界值，為更好地進行地貧篩查提供有力證據。 報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018 年7 月～2020 年7 月在本院進行地貧篩查及診斷的婚育人群共4764 例，其中男 2195 例，年齡 18～55(29±5.39)歲；女 2569 例，年齡 18～48(26±5.12)歲。

1.2 納入與排除標準 納入標準：（1）所選取對象均應符合無糖尿病史；（2）無其他血液系統(tǒng)疾病及自身免疫性疾病等炎癥疾病。 排除標準：（1）β 地中海貧血、α 復合 β 地中海貧血；（2）異常血紅蛋白變異病等情況。

1.3 研究方法

1.3.1 標本采集 每個研究對象空腹抽取兩支2ml EDTA-K2 抗凝劑的靜脈血，一支用于Hb A2檢測，一支用于α 地貧及β 地貧基因診斷分析。

1.3.2 儀器與試劑 采用sebia Caplillarys2 全自動毛細管血紅蛋白電泳儀及配套試劑測定樣本全血中的Hb A2含量。 采用杭州博日科技有限公司TC-96/G/H(b)基因擴增儀、廣東凱普生物科技股份有限公司HB-2012A 醫(yī)用核酸分子雜交儀及配套試劑測定α-地貧及β-地貧基因型。

1.3.3 α-地貧檢測范圍 檢測中國人常見的3 種缺失型α-地貧（-α3.7、-α4.2、--SEA）、3 種突變型 α-地貧（CS、QS、WS）。

1.3.4 β-地貧檢測范圍 檢測17 個位點的19 種突變 （CD41-42、CD43、IVS-II-654、CD17、CD14-15、-28、-29、CD71-72、βE、IVS-I-1、CD27/28、IVS-I-5、Cap、Int、CD31、-30、-32）。

1.4 統(tǒng)計學處理 數據采用SPSS 23.0 統(tǒng)計學軟件進行處理。 計量資料采用表示，行 t 檢驗；P﹤0.05示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 α 地貧各基因型分布以及Hb A2水平含量比較1714 例α-地貧中發(fā)現(xiàn)靜止型α-地貧占40.02%，輕型α-地貧占56.94%，中間型α-地貧組占3.03%，可見信宜地區(qū)婚育人群α-地貧基因型分布以輕型東南亞型為主，各組間Hb A2的含量與健康組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05)。 見表 1。

2.2 α 地中海貧血各組不同性別Hb A2含量比較靜止型α 地貧組、健康組的不同性別之間Hb A2的含量比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05)；輕型α 地貧組、中間型α 地貧組的不同性別之間Hb A2的含量比較，差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)。 見表 2。

表1 α 地貧各基因型分布以及Hb A2 水平含量比較(,%)

表1 α 地貧各基因型分布以及Hb A2 水平含量比較(,%)

注：靜止型α-地貧組、輕型α-地貧組、中間型α-地貧組Hb A2 含量與健康組比較，P﹤0.05

n Hb A2 含量 t P靜止型α-地貧組輕型α-地貧組中間型α-地貧組健康組686 976 52 3050 2.49±0.25 2.34±0.23 1.67±0.64 2.65±0.27-13.793-31.229-23.889 0.000 0.000 0.000

表2 α 地中海貧血各組的性別分布及Hb A2 含量比較(,%)

表2 α 地中海貧血各組的性別分布及Hb A2 含量比較(,%)

n Hb A2 含量(%) t P靜止型α 地貧組男性組女性組輕型α 地貧組男性組女性組中間型α 地貧組男性組女性組健康對照組男性組女性組686 286 400 976 469 507 52 25 27 3050 1415 1635 2.49±0.25 2.46±0.25 2.50±0.25 2.34±0.23 2.34±0.24 2.34±0.23 1.67±0.64 1.79±0.56 1.62±0.68 2.65±0.27 2.66±0.27 2.64±0.28-2.0170.044-0.0650.948 1.0000.322 2.0300.042

2.3 ROC 曲線分析 由于靜止型α 地貧組、健康組的不同性別之間Hb A2的含量比較差異均具有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05)，為了更大程度上預防重型α 地貧胎兒的產生，將要提高篩查靜止型α 地貧的檢測性能，故應根據性別建立Hb A2不同的臨界值，并計算尤登指數，尤登指數最大時診斷界點可作為Hb A2 對α 地貧篩查的最佳臨界值，見表3。 繪制ROC 曲線，見圖1 及圖2；信宜地區(qū)男性婚育人群對α 地貧篩查的最佳Hb A2 臨界值為2.6%，其ROC 曲線下面積為0.794；信宜地區(qū)女性婚育人群對α 地貧篩查的最佳Hb A2臨界值為2.7%，其ROC 曲線下面積為0.748。

3 討論

α 地中海貧血是一種常染色體遺傳病，α 珠蛋白基因位于16p13.3，重型α 地貧多數在圍產期因重度胎兒水腫死亡，這給患兒家庭和社會造成極大的經濟和心理負擔。 目前地貧除了造血干細胞移植之外尚無有效的根治方法，只能通過控制病患兒的出生率來降低地貧的發(fā)病率。 血紅蛋白電泳是目前產前篩查地貧最常用的技術方法，通過對Hb A2的準確定量可以初步區(qū)分 α 和 β 地貧［4］。 但不同地區(qū)在篩查地貧時人群存在區(qū)域性差異，采用的技術方法和儀器設備不同，Hb A2的臨界值也會不同。 我國頒布的地貧防控試點項目技術服務規(guī)范中明確指出，各實驗室應建立本實驗室的Hb A2的參考區(qū)間，確定適合本實驗室Hb A2篩查α 和β 地貧的最佳截斷值。因此，通過ROC 曲線分析建立本實驗室篩查信宜地區(qū)婚育人群α 地中海貧血的Hb A2最佳臨界值，這對做好地區(qū)性地貧防控工作，提高地貧篩査的準確度、進行地貧的流行病調查和提高人口素質有重要作用。

表3 不同性別Hb A2 篩查α 地中海貧血的系列臨界值指標

圖1 男性Hb A2 篩查α 地中海貧血的ROC 曲線

圖2 女性Hb A2 篩查α 地中海貧血的ROC 曲線

信宜為粵西城市，是廣東省地貧高發(fā)地區(qū)之一，2012 年由廣東省婦幼保健院組織進行統(tǒng)計，廣東省育齡人群α 地貧基因攜帶率約為12.8%。 有學者研究表示，韶關、四會的α 地貧基因攜帶率分別為10.44%，11.72%。本次研究顯示1714 例α-地貧中發(fā)現(xiàn)靜止型α 地貧占40.02%，輕型α 地貧占56.94%，中間型α 地貧組占3.03%，可見信宜地區(qū)婚育人群α-地貧基因型分布以靜止型、輕型α 地貧為主。靜止型α地貧組、輕型α 地貧組、中間型α 地貧組及健康對照組的 Hb A2的含量分別為(2.49±0.25)%、(2.34±0.23)%、(1.67±0.64)%、(2.65±0.27)%，各組 Hb A2的含量與健康組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05)；這表明 Hb A2含量不一定代表α 地貧的嚴重程度，依然容易漏診靜止型 α 地貧，需結合其他血液學參數（MCV、MCH 等）來綜合分析［5，6］。

ROC 曲線可反映診斷試驗的準確性，曲線下面積越大，其診斷的準確性越高。 男性、女性婚育人群其ROC 曲線下面積分別為 0.794、0.748，男性 Hb A2臨界值的診斷效能稍優(yōu)于女性，本研究中發(fā)現(xiàn)在靜止型α 地貧組、健康組的不同性別之間Hb A2的含量比較差異均有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05)，故根據性別建立了不同Hb A2的臨界值。 有部分文獻表明，男性Hb A2的含量略高于女性［7，8］，廣東省婦幼駱明勇等［9］研究表明，最佳Hb A2臨界值為2.7%，英德市婦幼保健院黃勁柏等［10］研究表明，最佳 Hb A2臨界值為 2.7%，這跟本研究的結果較為一致，但根據性別而設定不同Hb A2的臨界值尚未見報道。本研究結果顯示，廣東信宜地區(qū)男性、女性婚育人群對α 地貧篩查的最佳Hb A2臨界值分別為2.6%、2.7%，性別之間Hb A2有差異，猜測可能與本地區(qū)生活水平、營養(yǎng)狀態(tài)，男性和女性之間機體代償功能不同或女性婚育人群中有妊娠人群有關。

綜上所述， 建立信宜地區(qū)婚育人群Hb A2篩查α 地中海貧血的最佳臨界值，這對提高本地區(qū)地貧篩査的準確度，指導婚育人群遺傳咨詢及產前診斷，尤為重要。