應用Amelogenin和性染色體STR基因座確定生物學性別3例

謝素梅，張貴芹，孔小超，冀強

1.南京醫(yī)科大學司法鑒定所，江蘇 南京 210029；2.石家莊市公安局刑事科學技術研究所，河北 石家莊050021

1 案 例

1.1 簡要案情

案例1：陳某，47 歲，身份信息性別為女，出生于偏遠農(nóng)村，出生時外生殖器無陰莖、睪丸，故被家人一直當女孩撫養(yǎng)并申報戶籍。陳某成年后不但未出現(xiàn)月經(jīng)來潮，反而出現(xiàn)了胡須和喉結，但因家庭貧困，一直未去醫(yī)院診查。近期在某醫(yī)院檢查染色體為46XY，并行“陰莖伸直術”。現(xiàn)當事人要求更改戶籍上性別，遂行性別鑒定。

案例2：薛某，22 歲，身份信息性別為女，于某醫(yī)院行染色體核型分析，結果為45X，因確認親子關系遂行鑒定。

案例3：程某，33 歲，身份信息性別為男，因確認親子關系遂行鑒定。

1.2 方法

采集陳某、薛某、程某血樣各1 份，用Chelex-100法提取DNA。分別用PowerPlex?21 System（美國Promega 公司），AGCU X12 STR、AGCU X19 STR、AGCU Y18 STR 和AGCU Database Y24試劑盒（無錫中德美聯(lián)生物技術有限公司）進行擴增。PCR 產(chǎn)物在3130 基因分析儀（美國Applied Biosystems 公司）上進行毛細管電泳，使用GeneMapper?IDv3.2 軟件（美國Applied Biosystems 公司）進行分型。

1.3 結果

陳某的PowerPlex?21 System 分型結果無異常，Amelogenin基因座分型為XY（圖1A）；AGCU X12 STR試劑盒分型結果顯示所有基因座均檢見1 個等位基因峰（圖1B）；AGCU Y18 STR 試劑盒分型結果顯示所有基因座均檢見1 個等位基因峰（圖1C）。

薛某的PowerPlex?21 System 分型結果無異常，Amelogenin基因座分型為X（圖2A）；AGCU X19 STR試劑盒分型結果顯示所有基因座均檢見1 個等位基因峰（圖2B）；AGCU Database Y24 試劑盒分型結果顯示所有基因座均未檢見等位基因峰（圖2C）。

圖2 薛某的DNA分型結果Fig.2 DNA typing results of Xue

程某的PowerPlex?21 System 分型結果無異常，但Amelogenin基因座分型為X（圖3A）；AGCU X19 STR 試劑盒分型結果顯示所有基因座均檢見1 個等位基因峰（圖3B）；AGCU Database Y24 試劑盒分型結果顯示，除DYS458、DYS522、DYS527外，其余基因座均檢見1 個等位基因峰（圖3C）。

圖3 程某的DNA分型結果Fig.3 DNA typing results of Cheng

染色體核型分析結果顯示：陳某的染色體核型為46XY（圖4A），為正常男性染色體核型；薛某的染色體核型為45X（圖4B），缺失一條性染色體。

圖4 染色體核型分型結果Fig.4 Results of chromosome karyotyping

2 討論

案例1 中，陳某的身份信息為女性，但是Amelogenin基因座分型為XY，AGCU X12 STR 和AGCU Y18 STR 試劑盒均檢出單一等位基因峰，符合男性XY 的特征，從而鑒定其生物學性別為男性。

案例2 中，薛某的Amelogenin基因座分型為X，表明薛某的生物學性別應為女性，或生物學性別為男性，只是AmelogeninY 變異而導致未檢測出Y。但是進一步行X-STR 和Y-STR 基因座分型時，發(fā)現(xiàn)19 個X-STR 基因座均為單一等位基因，且Y-STR 均無等位基因，故推測其可能缺失1 條性染色體。染色體核型分析結果顯示只有1 條X 染色體，證實了薛某缺失1 條性染色體。

案例3 中，程某身份信息為男性，但是Amelogenin基因座為X，繼而用AGCU X19 STR 和AGCU Database Y24 試劑盒對其進一步分析，發(fā)現(xiàn)19 個X-STR基因座均有單一等位基因峰；24 個Y-STR 基因座中，除DYS458、DYS522和DYS527外，其余基因座均有1個等位基因峰。因此推測程某的Y 染色體可能存在片段缺失，缺失片段至少覆蓋了AmelogeninY、DYS458以及DYS522這3 個基因座。程某系因親子鑒定需求來本所鑒定，拒絕配合染色體核型分析。該案例在性別鑒定中，若僅根據(jù)Amelogenin基因座分型進行判定，將導致鑒定意見錯誤。

司法鑒定中，在對樣本進行生物學性別鑒定時，建議不要僅根據(jù)單一的Amelogenin基因座分型結果得出結論，最好結合X-STR、Y-STR 基因座分型以及核型分析等多種方法綜合分析后出具鑒定意見。