“皖抗6號(hào)”等六個(gè)抗松材線蟲(chóng)病馬尾松無(wú)性系選育

郝焰平，姜春武，陳雪蓮，潘婷，韋薔，徐六一

(安徽省林業(yè)科學(xué)研究院，松材線蟲(chóng)病預(yù)防與控制技術(shù)國(guó)家林業(yè)和草原局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安徽合肥 230088)

馬尾松Pinus massoniana是我國(guó)針葉林面積中分布最廣的樹(shù)種[1－2]。松材線蟲(chóng)病是危害馬尾松等松屬樹(shù)種的主要病害[3－4]。針對(duì)松材線蟲(chóng)病的各項(xiàng)研究目前都取得了一些階段性的成果，但在實(shí)際生產(chǎn)中還沒(méi)有特別有效的防治措施，防治松材線蟲(chóng)病的形勢(shì)依然嚴(yán)峻[5－9]。

松材線蟲(chóng)病由于其發(fā)病因素和傳播擴(kuò)散途徑復(fù)雜、危害嚴(yán)重、防治困難，目前對(duì)該病害的防治主要是嚴(yán)格檢疫、清除枯死木和用天敵、化學(xué)農(nóng)藥防治該病的主要傳播媒介松褐天牛[10－14]，對(duì)病害的控制尚未取得根本性的進(jìn)展。因此，開(kāi)展松材線蟲(chóng)病馬尾松抗性育種研究，選育出抗性品種，已成為防御松材線蟲(chóng)病危害的重要途徑之一[15]。

1 材料與方法

1.1 選育地概況 “皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗松材線蟲(chóng)病馬尾松無(wú)性系選育地包括3個(gè)地點(diǎn):合肥市廬陽(yáng)區(qū)林業(yè)科技示范園、滁州市全椒縣瓦山國(guó)有林場(chǎng)和滁州市南譙區(qū)安徽省林業(yè)科學(xué)研究院沙河林木良種繁育中心。

合肥林業(yè)科技示范園(31°55′N(xiāo)，117°12′E)地處合肥市廬陽(yáng)區(qū)大楊鎮(zhèn)董鋪水庫(kù)北緣，屬暖溫帶季風(fēng)大陸性氣候，四季分明、氣候溫和、日照充足。全年無(wú)霜期227 d，年平均氣溫15～15.7℃，年均日照時(shí)數(shù)為2 112 h左右，年平均降雨量986～1 300 mm，降雨量季節(jié)分配不均勻，主要集中在5—9月。園區(qū)土壤為粘盤(pán)黃棕壤，土層深厚(60～200 cm)，但質(zhì)地黏重，理化條件較差，肥力低。

全椒縣瓦山林場(chǎng)(32°10′N(xiāo)，117°50′E)位于滁州市全椒縣西王鎮(zhèn)，安徽省林業(yè)科學(xué)院沙河林木良種繁育中心(32°24′N(xiāo)，118°15′E)位于滁州市南譙區(qū)沙河鎮(zhèn)，兩地均屬暖溫帶向亞熱帶過(guò)渡的氣候型，為亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候，其主要?dú)夂蛱卣魇?季風(fēng)明顯、四季分明、氣候溫和、雨量適中、春溫多變、秋高氣爽、梅雨顯著、夏雨集中。年平均降雨量1 000 mm，年平均氣溫15.3℃，無(wú)霜期215 d。土壤為灰綠色千枚巖發(fā)育而來(lái)的普通黃棕壤，土壤pH值6.5，肥力中等，非常適于馬尾松生長(zhǎng)發(fā)育。

1.2 選育親本來(lái)源 2001—2008年，項(xiàng)目組開(kāi)展了馬尾松松材線蟲(chóng)病抗性育種研究工作[16]，在安徽省和縣、廣德縣、滁州市、宣州區(qū)、涇縣、休寧縣、黃山區(qū)、全椒縣、潛山縣和太湖縣等10個(gè)縣(區(qū))的松材線蟲(chóng)病疫區(qū)和非疫區(qū)選擇馬尾松抗病優(yōu)樹(shù)324株，通過(guò)采種、育苗，連續(xù)2 a的人工接種松材線蟲(chóng)測(cè)定評(píng)價(jià)，初選出251個(gè)馬尾松抗性候選家系，每個(gè)家系擇優(yōu)保存4～5株，共初選出1 201株馬尾松抗性候選單株。2009—2019年，將選育出的1 201株抗性候選單株分別采取穗條，通過(guò)嫁接的方法培育馬尾松無(wú)性系苗木，通過(guò)連續(xù)2 a人工接種松材線蟲(chóng)測(cè)定評(píng)價(jià)，篩選出89個(gè)馬尾松松材線蟲(chóng)病抗性無(wú)性系[17]。 (圖1)

圖1 抗性無(wú)性系選育技術(shù)路線圖Fig.1 Technical roadmap for selection and breeding of resistant clones

1.3 母樹(shù)選優(yōu) 根據(jù)各地林業(yè)部門(mén)提供的資料，在20～30 a生、林分面積在30 hm2以上且該林分曾發(fā)生或正在發(fā)生松材線蟲(chóng)病危害的馬尾松林分，或不考慮松材線蟲(chóng)病發(fā)生與否，選擇林分面積在80 hm2以上的馬尾松純林作為采種林分。在采種林分中，為保證有良好的遺傳增益，優(yōu)良單株選擇方法為“5株優(yōu)勢(shì)木法”[18]，即選擇的優(yōu)良家系，其樹(shù)高、胸徑和材積生長(zhǎng)量超眾，其單株材積比同一標(biāo)準(zhǔn)地內(nèi)3～5株優(yōu)勢(shì)木的平均材積大50%以上。樹(shù)冠較窄，不超過(guò)樹(shù)干高度的1/3～1/4，均勻?qū)ΨQ(chēng)，側(cè)枝細(xì)而短。樹(shù)干通直圓滿，自然整枝良好，無(wú)大的枯死節(jié)，枝下高為樹(shù)干總長(zhǎng)的2/3以上，樹(shù)體良好。樹(shù)皮較薄，裂紋通直，木材密度較大，容重較重，年輪的晚材比率大，干材品質(zhì)好。樹(shù)木健康，無(wú)病害感染，生長(zhǎng)態(tài)勢(shì)好。樹(shù)齡20～30 a，各項(xiàng)性狀較為穩(wěn)定。

1.4 營(yíng)建馬尾松抗性無(wú)性系種子園及子代測(cè)定林 在安徽省林科院沙河林木良種繁育中心營(yíng)建馬尾松抗性無(wú)性系種子園，種子園規(guī)模1.6 hm2。依據(jù)道路和地形地勢(shì)將抗松材線蟲(chóng)病馬尾松無(wú)性系種子園劃分為7個(gè)小區(qū)，每小區(qū)面積不等，約0.2 hm2；種子園無(wú)性系配置方式采取完全隨機(jī)排列，在排列過(guò)程中，同一無(wú)性系各個(gè)體間距離應(yīng)間隔3株以上或大于20 m，小區(qū)無(wú)性系配置數(shù)目82～89個(gè)，種子園的栽植密度4 m×6 m；建園材料來(lái)自經(jīng)過(guò)2次人工接種松材線蟲(chóng)后篩選出的抗性無(wú)性系，共89個(gè)無(wú)性系，其中Ⅰ～Ⅵ小區(qū)為89個(gè)無(wú)性系，Ⅶ小區(qū)為82個(gè)無(wú)性系；種子園采用大穴整地，規(guī)格0.8 m×0.8 m ×0.6 m，株行距為 4.0 m ×6.0 m，420株/hm2；建園無(wú)性系單株采取預(yù)先培育嫁接苗法，第1年培育嫁接苗，第2年、第3年分別人工接種松材線蟲(chóng)1次，再選擇經(jīng)過(guò)2 a接種松材線蟲(chóng)沒(méi)有出現(xiàn)死亡的抗性無(wú)性系移栽營(yíng)建種子園。無(wú)性系植株帶土球30～40 cm，定植后澆透水并適當(dāng)修剪。

建園后前3 a每年5月、9月松土除草各1次，并結(jié)合撫育施肥，對(duì)缺棵植株適時(shí)補(bǔ)植。對(duì)抗性馬尾松無(wú)性系種子園的主要病蟲(chóng)害進(jìn)行人工撲殺或化學(xué)防治。建立完整的種子園技術(shù)檔案，包括文字材料、栽植配置圖與實(shí)地標(biāo)樁標(biāo)記。每年對(duì)種子園樹(shù)木生長(zhǎng)情況進(jìn)行調(diào)查，包括樹(shù)高、胸徑、樹(shù)冠的生長(zhǎng)情況以及松材線蟲(chóng)病危害情況，分無(wú)性系調(diào)查統(tǒng)計(jì)，同時(shí)做好檔案管理工作。

當(dāng)種子園母樹(shù)開(kāi)始結(jié)實(shí)后，從中選擇表現(xiàn)性狀優(yōu)良的無(wú)性系進(jìn)行采種，營(yíng)建馬尾松抗性子代測(cè)定林。2010年和2011年秋季，采集馬尾松抗性候選家系中已結(jié)實(shí)的家系種子；于2011年和2012年分家系播種育苗，培育出抗性馬尾松候選家系子代苗木6 000多株，于育苗后的次年開(kāi)展人工接種松材線蟲(chóng)測(cè)定，115個(gè)馬尾松抗性候選家系的子代人工接種松材線蟲(chóng)測(cè)定表明，接種后兩個(gè)月只有4個(gè)家系出現(xiàn)感病癥狀，但未出現(xiàn)整株枯死現(xiàn)象。

2012年和2013年春季在全椒縣瓦山林場(chǎng)松材線蟲(chóng)病危害區(qū)分別營(yíng)建了56個(gè)和59個(gè)馬尾松抗性候選家系子代測(cè)定林0.4 hm2和0.7 hm2，造林密度2 m×3 m，6株單行小區(qū)，3次重復(fù)，對(duì)照樹(shù)種為普通馬尾松、火炬松。目前115個(gè)馬尾松抗性家系的子代在疫區(qū)長(zhǎng)勢(shì)良好，8 a生平均樹(shù)高4.0 m，平均胸徑7.7 cm，7 a生平均樹(shù)高3.2 m，平均胸徑6.4 cm。

1.5 馬尾松抗性無(wú)性系區(qū)域化試驗(yàn) 2011年春季，利用70個(gè)松材線蟲(chóng)病抗性無(wú)性系，在長(zhǎng)豐縣崗集鎮(zhèn)合肥禾景農(nóng)林科技發(fā)展有限公司營(yíng)建馬尾松無(wú)性系現(xiàn)地測(cè)定林1.3 hm2，造林密度2 m×3 m，5株小區(qū)，6次重復(fù)。

2012年春季，利用初選出健全率(健全率為接種后健全的株數(shù)占全部接種株數(shù)的百分比)超過(guò)火炬松的抗松材線蟲(chóng)病馬尾松212個(gè)無(wú)性系(包括抗性最強(qiáng)的89個(gè)無(wú)性系)以及抗性弱的74個(gè)無(wú)性系，共286個(gè)無(wú)性系，對(duì)照樹(shù)種為火炬松和普通馬尾松，在疫區(qū)全椒縣瓦山林場(chǎng)松材線蟲(chóng)病危害區(qū)營(yíng)建了馬尾松無(wú)性系現(xiàn)地測(cè)定林1.2 hm2，造林密度2 m×3 m，單株小區(qū)，6次重復(fù)。

2014年春季，利用27個(gè)松材線蟲(chóng)抗性無(wú)性系，在松材線蟲(chóng)病危害區(qū)桐城市金神鎮(zhèn)安徽環(huán)藝生態(tài)園林工程有限公司營(yíng)建了馬尾松無(wú)性系現(xiàn)地測(cè)定林0.3 hm2，造林密度2 m×3 m，3株小區(qū)，7次重復(fù)。

2011年春季，利用松材線蟲(chóng)病抗性最強(qiáng)的68個(gè)馬尾松家系、89個(gè)無(wú)性系，在安徽省林科院沙河林木良種繁育中心營(yíng)建馬尾松松材線蟲(chóng)病抗性無(wú)性系種子園1.6 hm2，造林密度4 m×6 m，單株小區(qū)，7次重復(fù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 馬尾松抗性無(wú)性系區(qū)域化試驗(yàn)結(jié)果 通過(guò)多年連續(xù)觀測(cè)，位于長(zhǎng)豐縣崗集鎮(zhèn)的各參試無(wú)性系長(zhǎng)勢(shì)良好，在自然環(huán)境下未受到松材線蟲(chóng)病危害，9 a生平均樹(shù)高5.5 m，平均胸徑11.3 cm；其中“皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗性無(wú)性系生長(zhǎng)量表現(xiàn)突出，平均樹(shù)高達(dá)6.5 m，平均胸徑達(dá)12.4 cm。全椒縣瓦山林場(chǎng)各參試無(wú)性系在松材線蟲(chóng)病疫區(qū)環(huán)境下仍未受到松材線蟲(chóng)病危害，而周邊有約40%～50%的松材線蟲(chóng)病死樹(shù)。8 a生平均樹(shù)高4.8 m，平均胸徑9.6 cm；其中“皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗性無(wú)性系生長(zhǎng)量表現(xiàn)突出，平均樹(shù)高達(dá)5.0 m，平均胸徑10.4 cm。桐城市金神鎮(zhèn)各參試無(wú)性系生長(zhǎng)良好，在松材線蟲(chóng)病疫區(qū)環(huán)境下仍未受到松材線蟲(chóng)病危害，而周邊有60%左右的松材線蟲(chóng)病死樹(shù)。6 a生平均樹(shù)高3.9 m，平均胸徑6.5 cm；其中“皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗性無(wú)性系生長(zhǎng)量表現(xiàn)突出，平均樹(shù)高達(dá)4.3 m，平均胸徑8.2 cm。安徽省林科院沙河林木良種繁育中心各參試無(wú)性系生長(zhǎng)良好，在松材線蟲(chóng)病疫區(qū)環(huán)境下仍未受到松材線蟲(chóng)病危害，而周邊有50%左右的松材線蟲(chóng)病死樹(shù)。10 a生平均樹(shù)高5.7 m，平均胸徑13.8 cm；其中“皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗性無(wú)性系生長(zhǎng)量表現(xiàn)突出，平均樹(shù)高達(dá)6.4 m，平均胸徑16.4 cm。

2.2 “皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗性無(wú)性系特性 項(xiàng)目組選育的“皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗松材線蟲(chóng)病馬尾松無(wú)性系2 a人工接種松材線蟲(chóng)后健全率為100%，對(duì)松材線蟲(chóng)病具有較高的抗性。“皖抗6號(hào)”特性主要表現(xiàn)在生長(zhǎng)量、千粒重和室內(nèi)發(fā)芽率上，其平均單株材積比同期無(wú)性系增益65.8%，比普通馬尾松增益192.8%，種子千粒重比同期抗性無(wú)性系高8.1%，室內(nèi)發(fā)芽率95%?！巴羁?號(hào)”尤其在樹(shù)干通直度上特異性表現(xiàn)明顯，均為Ⅰ級(jí)木。“皖抗8號(hào)”特性表現(xiàn)在其母株穗條的扦插生根率達(dá)95%，成苗率達(dá)90%以上?！巴羁?號(hào)”特性主要表現(xiàn)在該無(wú)性系結(jié)實(shí)量穩(wěn)定，前期結(jié)實(shí)量呈遞增趨勢(shì)?！巴羁?0號(hào)”特性表現(xiàn)在種子純度高，達(dá)到97.9%，球果大小也高于其他同期無(wú)性系。“皖抗11號(hào)”特性表現(xiàn)在冠型優(yōu)美、樹(shù)干通直度均為Ⅰ級(jí)木。室內(nèi)MuPS實(shí)驗(yàn)表明:“皖抗6號(hào)”等6個(gè)無(wú)性系與其他抗性無(wú)性系均存有差異性基因位點(diǎn)。

2.3 “皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗性無(wú)性系優(yōu)良性狀 根據(jù)馬尾松種子園調(diào)查結(jié)果(采用的是10 a生林木調(diào)查記錄)，經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)分析，得出“皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗性無(wú)性系具有抗逆性、速生豐產(chǎn)性、干型通直、冠幅冠層較大、種實(shí)品質(zhì)較好、基因差異性明顯等優(yōu)良性狀。

抗逆性強(qiáng)。馬尾松具有耐干旱瘠薄的特性，能夠在－15℃以?xún)?nèi)的溫度環(huán)境下正常生長(zhǎng)?！巴羁?號(hào)”等6個(gè)良種除了生長(zhǎng)迅速、干形通直外，對(duì)松材線蟲(chóng)病具有較強(qiáng)的抗病性。2015年國(guó)家林業(yè)公益性行業(yè)科研專(zhuān)項(xiàng)“抗松材線蟲(chóng)病馬尾松種源及抗性育種技術(shù)研究”結(jié)果表明，項(xiàng)目組選育的89個(gè)抗松材線蟲(chóng)病馬尾松無(wú)性系平均健全率為93.4%，而對(duì)照樹(shù)種普通馬尾松平均健全率僅為29.7%，抗性無(wú)線無(wú)性系株發(fā)病率比普通馬尾松減少了63.7個(gè)百分點(diǎn)，其中“皖抗6號(hào)”等6個(gè)無(wú)性系健全率達(dá)到100%，株發(fā)病率比對(duì)照減少70.3個(gè)百分點(diǎn)。

速生豐產(chǎn)性良好。馬尾松抗性種子園各無(wú)性系生長(zhǎng)都較好，10 a生馬尾松平均樹(shù)高、胸徑、單株材積分別為5.7 m、13.8 cm、0.048 9 m3。 “皖抗6號(hào)”等6個(gè)高抗無(wú)性系的平均樹(shù)高、胸徑、單株材積分別為6.4 m、16.4 cm、0.074 8 m3；6 個(gè)高抗無(wú)性系的平均樹(shù)高、胸徑、單株材積比抗性種子園無(wú)性系全體平均值分別增益12.3%、18.8%和53.0%，比對(duì)照普通馬尾松分別增益16.4%、51.2%和170.0%，說(shuō)明遺傳增益的潛力是較大、穩(wěn)定而可靠的，“皖抗6號(hào)”等6個(gè)高抗無(wú)性系具有速生豐產(chǎn)性。尤其是“皖抗6號(hào)”平均單株材積比同期無(wú)性系增益65.8%，比普通馬尾松增益192.8%，特異性明顯。(表1)

表1 抗性馬尾松無(wú)性系種子園生長(zhǎng)量Tab.1 Growth of resistant masson pine clones in the seed orchard

干形通直，冠幅、冠層均較厚。10 a生馬尾松無(wú)性系種子園，這時(shí)樹(shù)干通直與否，已經(jīng)成型，這是受遺傳基因控制的，此時(shí)進(jìn)行測(cè)定比較符合實(shí)際。全園參試的89個(gè)無(wú)性系其樹(shù)干通直度總體良好，全園I級(jí)木達(dá)到71.4%，Ⅱ級(jí)木14.3%，Ⅲ級(jí)木14.3%；平均冠幅和冠層厚度分別為5.1 m和4.7 m。“皖抗6號(hào)”等6個(gè)高抗無(wú)性系中I級(jí)木達(dá)到90.5%；Ⅱ級(jí)木9.5%；平均冠幅和冠層厚度分別為6.5 m和5.6 m。尤其是“皖抗7號(hào)”和“皖抗11號(hào)”在樹(shù)干通直度上特異性表現(xiàn)明顯，均為Ⅰ級(jí)木，“皖抗11號(hào)”冠幅和冠層厚度高于其他同期無(wú)性系，冠型優(yōu)美。(表2)

表2 種子園無(wú)性系的樹(shù)干通直度及冠幅、冠層厚度Tab.2 Trunk straightness，crown width and canopy thickness of clones in seed orchard

結(jié)實(shí)穩(wěn)定、高產(chǎn)。由于建園材料經(jīng)多層次的選擇，故樹(shù)體生長(zhǎng)、發(fā)育良好，加之集約經(jīng)營(yíng)管理和合理的定植密度，所以種子園從第1年(2011年)起即開(kāi)花結(jié)實(shí)，9年間產(chǎn)種量漸次增加，即年際間呈穩(wěn)定上升的趨勢(shì)，相對(duì)于結(jié)實(shí)第1年而言，2019年產(chǎn)量是其10.9倍，前期結(jié)實(shí)量呈遞增趨勢(shì)，表明種子園產(chǎn)種量的穩(wěn)定性。尤其是“皖抗9號(hào)”結(jié)實(shí)量穩(wěn)定，前期結(jié)實(shí)量呈遞增趨勢(shì)最為明顯。(表3)

表3 從結(jié)實(shí)始種子園歷年產(chǎn)籽量Tab.3 Annual seed production from the beginning of fruiting in the seed orchard

種實(shí)品質(zhì)好，使用價(jià)值高。2019年度各無(wú)性系球果大小、種子千粒重、純度和室內(nèi)發(fā)芽率等項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定分析表明，“皖抗6號(hào)”等6個(gè)高抗無(wú)性系的平均球果大小、千粒重、純度、室內(nèi)發(fā)芽率均高于其他同期無(wú)性系。尤其是“皖抗6號(hào)”種子千粒重比同期抗性無(wú)性系高8.1%，室內(nèi)發(fā)芽率達(dá)95%；“皖抗10號(hào)”種子純度高，達(dá)97.9%，特異性明顯。(表4)

表4 種子園抗性無(wú)性系種實(shí)品質(zhì)測(cè)定分析Tab.4 Determination and analysis of seed quality of resistant clones in seed orchard

種子園89個(gè)無(wú)性系其球果直徑平均為3.28 cm、果長(zhǎng)平均為6.38 cm，球果大小平均值和球果含籽數(shù)在正常值的范圍以?xún)?nèi)，表明種子園球果性狀發(fā)育良好?！巴羁?號(hào)”等6個(gè)良種球果平均直徑為3.77 cm，果長(zhǎng)平均為7.47 cm，超出種子園平均值14.9%和17.1%。種子園89個(gè)無(wú)性系球果千粒重平均為13.29 g。其中“皖抗6號(hào)”等6個(gè)優(yōu)良無(wú)性系的平均千粒重為13.65 g，超出種子園平均值2.7%，表明“皖抗6號(hào)”等6個(gè)無(wú)性系種子飽滿度高，可育性強(qiáng)，播種品質(zhì)好。種子純度是種子品質(zhì)的重要指標(biāo)之一，經(jīng)測(cè)定，種子園89個(gè)無(wú)性系其種子平均純度為96.14%，其中“皖抗6號(hào)”等6個(gè)優(yōu)良無(wú)性系種子平均純度為97.09%。按馬尾松種子Ⅰ級(jí)種純度為96%的指標(biāo)來(lái)衡量，種子園種子純度為上等，可謂是品質(zhì)好、使用價(jià)值高的種子，“皖抗6號(hào)”等6個(gè)無(wú)性系種子品質(zhì)更好、具有更高的使用價(jià)值。種子園89個(gè)無(wú)性系種子室內(nèi)發(fā)芽率平均為88.34%，其中“皖抗6號(hào)”等6個(gè)優(yōu)良無(wú)性系種子室內(nèi)發(fā)芽率平均為91.8%。表明種子園生產(chǎn)的種子生活力強(qiáng)、發(fā)芽率高，具有較大的推廣應(yīng)用價(jià)值，“皖抗6號(hào)”等6個(gè)無(wú)性系種子發(fā)芽率更高，具有更好的推廣價(jià)值。

基因差異性明顯。項(xiàng)目組對(duì)全部1 201個(gè)抗性無(wú)性系進(jìn)行MuPS型分析，成功建立了1 163個(gè)無(wú)性系的MuPS型數(shù)據(jù)庫(kù)[19]。1 163個(gè)無(wú)性系的樣品中獲得783個(gè)不同的MuPS型，區(qū)分率67.3%。在174個(gè)抗性水平超過(guò)火炬松的無(wú)性系中獲得130個(gè)不同的MuPS型，其中單一的MuPS型單株有102株，58.6%的無(wú)性系完全能夠識(shí)別。14對(duì)引物建立的基因數(shù)據(jù)庫(kù)顯示，“皖抗6號(hào)”等6個(gè)無(wú)性系與其他抗性無(wú)性系存有差異性基因位點(diǎn)，且相互間也存有差異性基因位點(diǎn)。(圖2、圖3)

圖2 M1引物組對(duì)64個(gè)樣品的多態(tài)型檢測(cè)Fig.2 Polymorphism detection of 64 samples by M1 primer set

圖3 M2引物組對(duì)64個(gè)樣品的多態(tài)型檢測(cè)Fig.3 Polymorphism detection of 64 samples by M2 primer set

扦插生根率高。2017年采用全光照自動(dòng)噴霧扦插技術(shù)，對(duì)選育出的抗松材線蟲(chóng)病馬尾松無(wú)性系開(kāi)展了扦插試驗(yàn)，突破了馬尾松扦插?；旆钡年P(guān)鍵技術(shù)[20]。2019年，利用馬尾松1～2 a生母樹(shù)半木質(zhì)化穗條扦插生根率平均為92%，成苗率平均為86%。尤其是“皖抗8號(hào)”特異性表現(xiàn)明顯，其母株穗條的扦插生根率達(dá)95%，成苗率達(dá)90%以上。

3 結(jié)論與討論

“皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗性無(wú)性系具有抗逆性、速生豐產(chǎn)性、干型通直、冠幅冠層較大、種實(shí)品質(zhì)較好、基因差異性明顯等優(yōu)良性狀?！巴羁?號(hào)”結(jié)實(shí)量穩(wěn)定，前期結(jié)實(shí)量呈遞增趨勢(shì)最為明顯，“皖抗8號(hào)”扦插生根率高。上述性狀是采用馬尾松種子園10 a生的林木進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計(jì)和試驗(yàn)后得出的結(jié)果，隨著樹(shù)齡的增長(zhǎng)，后期還要持續(xù)跟蹤調(diào)查和試驗(yàn)，以便得出“皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗性無(wú)性系的優(yōu)良性狀具有持續(xù)穩(wěn)定性。

“皖抗6號(hào)”等6個(gè)抗松材線蟲(chóng)病馬尾松無(wú)性系適應(yīng)性廣泛，可在安徽省淮河以南松材線蟲(chóng)病疫區(qū)栽植和推廣。