探討不規(guī)則抗體導致的新生兒溶血病實驗室檢查及臨床輸血策略

徐輝

（新泰市婦幼保健計劃生育服務(wù)中心，山東 泰安 271200）

0 引言

隨著二胎政策的實施，多次妊娠史的高齡產(chǎn)婦、稀有血型產(chǎn)婦不斷增多，母嬰血型不合就會導致新生兒溶血病，現(xiàn)已成為新生兒科常見病。不規(guī)則抗體指的是血清中除抗-A、抗-B外的血型抗體，常見的是母體內(nèi)含有不規(guī)則抗體進而引發(fā)新生兒溶血病。該病能夠引起患兒貧血、肝脾大，甚至心衰，影響智力發(fā)育、運動功能。所以，當發(fā)現(xiàn)新生兒溶血病時需要給予高度重視。本文選擇我院收治的HDN的患兒為研究對象，對實驗室檢查和臨床輸血做進一步探究。

1 資料與方法

1.1 一般資料。研究時間：2019年8月至2020年8月；研究對象：我院收治的不規(guī)則抗體導致的新生兒溶血病患兒56例，回顧性分析HDN實驗室檢查結(jié)果并提出臨床輸血策略。其中，男21例，女35例。Rh系統(tǒng)50例，Rh系統(tǒng)合并ABO系統(tǒng)溶血3例，抗D抗原遮蔽現(xiàn)象所致HDN1例。其他抗體引起HDN中MNS血型系統(tǒng)、Diego血型系統(tǒng)各1例。

1.2 方法。選擇KA-2200型免疫血清學離心機，恒溫水浴箱，微柱凝膠儀離心機，微柱寧交易空氣浴，微柱凝膠卡，抗-A、-B標準血清，譜細胞。O型篩選細胞、抗-M單克隆抗體、抗-N單克隆抗體，直接抗人球蛋白（抗-IgG+C3d），抗-D（IgG/IgM單克隆抗體）、譜細胞、A細胞、B細胞均為自制。

1.3 評價指標。①不規(guī)則抗體所致HDN抗體分布分析。②Rh系統(tǒng)合并ABO系統(tǒng)溶血病的溶血3項實驗結(jié)果分析。③分析抗-M導致的HDM譜細胞檢測結(jié)果。

1.4 數(shù)據(jù)處理。根據(jù)觀察指標統(tǒng)計相關(guān)數(shù)據(jù)，分別使用均數(shù)（Mean Value）加減標準差（Standard Deviation）和例（n）、百分率（%）來表示計量資料和計數(shù)資料，將有效數(shù)據(jù)輸入到SPSS 18.0軟件中進行統(tǒng)計分析，進行T值和χ2檢驗，當P＜0.05時組間比較具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體所致HDN抗體分布。不規(guī)則抗體所致HDN新生兒56例中，Rh系統(tǒng)共50例。其中，包含抗-D39例、抗-E10例、抗-C5例、抗-E合并抗-D2例；MNS系統(tǒng)1例；抗-Diego系統(tǒng)1例。

2.2 Rh系統(tǒng)合并ABO系統(tǒng)溶血病的溶血3項實驗結(jié)果分析。Rh系統(tǒng)合并ABO系統(tǒng)溶血病患兒，血型為A型，Rh（+）、溶血三項實驗檢查結(jié)果：直抗1+，游離試驗A細胞1+，B細胞（-），O細胞（±），放散試驗A細胞1+，B細胞1+，O細胞1+。

2.3 抗-M導致的HDM譜細胞檢測結(jié)果。根據(jù)抗-M新生兒譜細胞反應格局可知：典型抗-M所致的HDN，于鹽水中有較強的反應?？?M所致的HDN均為IgM+IgG性，詳見表1。

3 討論

新生兒溶血病指的是產(chǎn)婦和新生兒血型不符引起的免疫性疾病，新生兒新各組織器官發(fā)育不成熟，受疾病影響健康發(fā)育[1]。所以，盡早檢測、早期診斷、早期治療。HDN多發(fā)于ABD血型系統(tǒng)，其次是Rh血型系統(tǒng)，其余血型系統(tǒng)罕見。本研究中多數(shù)新生兒屬于Rh系統(tǒng)，根據(jù)檢驗結(jié)果顯示：當抗-D效價大于16時對HDN意義較大[2]。其余不規(guī)則特異性抗體大于8時對HDN有一定意義。不過，抗體效價的不同并不能用于診斷HDN發(fā)生和具體情況，還應做進一步分析。

Rh血型分為D、E、C、c，e不同抗原，D抗原的抗原性最強。所以，Rh所致抗-D導致Rh-HDN較為常見，也可見抗-E、抗-C、抗-c、Rh雙抗體與三抗體的聯(lián)合抗體報道。因為患兒A抗原發(fā)育不成熟，很多ABO-HDN血液標本直抗為弱陽性[3]。Rh-HDN直抗試驗較強通常在2+以上。所以，患兒直抗實驗陽性強弱是判斷ABO、Rh溶血病的有效依據(jù)。關(guān)于Rh產(chǎn)婦所致HDN，若產(chǎn)婦血型為是非O型的Rh陰性血，通過新生兒血漿、放散液、產(chǎn)婦血漿3套譜細胞和直抗檢測結(jié)果即可診斷HDN類型[4]。相反，產(chǎn)婦O型Rh陰性血則不僅要分析Rh-HDN，還要分析有無合并ABO-HDN。由于新生兒紅細胞在產(chǎn)婦體內(nèi)會快速損壞，因而該類新生兒抗試驗結(jié)果弱。有研究提出：若Rh陰性通過孕婦和孕育的Rh陽性新生兒的ABP血型吻合，那么Rh溶血風險達到16%l。若新生兒和產(chǎn)婦ABO血型不符其風險只有2%。臨床上，針對該類新生兒的標本建議確定與新生兒ABO血型同型的Rh陰性血液標本和新生兒血漿、放散液反應。若出現(xiàn)反應表示患兒有ABO-HDN。不過，很多學者認為：Rh-HDN主要在經(jīng)產(chǎn)婦中發(fā)生。所以，首次生產(chǎn)產(chǎn)婦通常無需做考量，但并不代表完全不可能發(fā)生Rh-HDN[5]。產(chǎn)婦為Rh陽性在新生兒時接受過Rh陽性母體血致敏，產(chǎn)婦首次妊娠時，如果胎兒血型與其不合且少量血流入母體就會產(chǎn)生一定量的Rh（IgG）抗體。本研究中，新生兒直抗實驗結(jié)果是4+強陽性，新生兒血清用鹽水IgG、IgM抗-D試劑檢驗呈陰性，產(chǎn)婦是Rh陰性血液現(xiàn)象。針對該問題可考慮為D抗原遮蔽現(xiàn)象引起抗-D假陰性。病理原因為：產(chǎn)婦體內(nèi)高效價的IgG抗-D所致患兒紅細胞上的D抗原位點封閉，使得紅細胞無較多D位點和血清試劑反應。該類樣本需要把新生兒紅細胞熱放散，取放散液定型。所以，Rh陰性血液產(chǎn)婦需要綜合分析，按照三相實驗做進一步診斷。Rh-HDN輸血治療一般血型選用Rh血型同產(chǎn)婦，ABO血型患兒血液成分選擇洗滌紅細胞與AB型血漿。在臨床實踐中，RhE陰性血搜集較為容易，RhD較為困難。

表1 抗-M導致的HDM譜細胞檢測結(jié)果

低頻抗原所致HDN增加誤診風險，該類標本直抗檢驗結(jié)果強。不過，有游離與放散試驗呈弱陽性。筆者認為：指導進行IgG類、C3類直抗檢驗。若C3類可排除HDN；IgG類則需檢驗血漿、放散液上譜細胞，如有需要可鑒定產(chǎn)婦抗體。在母嬰ABO血型吻合情況下需進行母子實驗，呈陽性應驗證低頻抗原的存在。MN血型分為M、N、MN，抗-M抗體主要為IgM型抗體，與M+N-細胞反應高于M+N+的細胞有劑量反應[6]。當該類血型樣本呈直抗試驗為（-），放散檢驗為（-）。不過，游離試驗（+）現(xiàn)象，考慮為新生兒體內(nèi)的抗-M抗體消耗?？?MHDN輸血選擇與新生兒ABP、Rh相同類型的NN型紅細胞。Dis與Dib抗原是從出生后就有的。IgG-Dia抗體可引起HDN，而Dia抗原多為東方人種特殊標記。所以，實驗室檢測抗體的進口譜細胞不含有Di（a+）細胞，國內(nèi)譜細胞可檢驗Digeo血型。該類患兒由于無法確定血清致病灶性抗體的屬性，但病情危急[7]。所以，在新生兒抗體滴度不高的情況下可進行換血治療。換血能夠移除新生兒體內(nèi)抗體，雖然會產(chǎn)生抗原體反應，減輕溶血，如有需要可再次換血[8]。

綜上所述，不規(guī)則抗體所致HDN需要給予高度關(guān)注。該類樣本需要先進行譜細胞抗體鑒定，根據(jù)三相實驗進一步分析。一些條件下，若新生兒貧血嚴重、抗體效價低、抗體被消耗等，以血液標本結(jié)果難以確診HDN時建議用父母血液樣本檢驗確診。