化學(xué)發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法對(duì)乙肝病毒血清學(xué)的檢驗(yàn)效果分析

梁雅婷

（西寧市第二人民醫(yī)院，青海 西寧 810003）

0 引言

乙型病毒性肝炎主要由乙肝病毒（HBV）感染引起，是常見慢性傳染病，能夠經(jīng)由血液、精液等傳播，主要表現(xiàn)為食欲減退、乏力、惡心、肝功能異常、肝大等，也可伴有發(fā)熱、黃疸，若是治療不及時(shí)，容易發(fā)展為肝硬化、肝臟惡性腫瘤，危及生命安全。相關(guān)報(bào)道指出，我國(guó)乙肝病毒感染率達(dá)到60%～70%，發(fā)病率較高，需要及時(shí)控制病毒擴(kuò)散與傳播，減少感染，延緩病情進(jìn)展，所以給予疑似乙肝患者早期檢查與診斷具有必要性[1]。目前臨床針對(duì)乙肝病毒的血清學(xué)檢測(cè)方法主要是CLIA與ELISA，均對(duì)診斷乙肝有積極作用，但也有報(bào)道指出，二者在檢驗(yàn)效果方面存在差異?；诖耍疚木虲LIA與ELISA對(duì)乙肝病毒血清學(xué)的檢驗(yàn)效果展開分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料。將2019年5月至2020年8月作為研究時(shí)間段，將隨機(jī)數(shù)字表法作為分組依據(jù)，病例選取此時(shí)間段內(nèi)我院接診的100例疑似乙肝患者，其中男55例，女45例，年齡28～76歲，平均（52.2±15.8）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均有乙肝相關(guān)癥狀；②對(duì)研究?jī)?nèi)容知情，同時(shí)簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并原發(fā)性血液疾病者；②已確診為乙肝者；③依從性不佳者；④代謝系統(tǒng)疾病者；⑤惡性腫瘤者。

1.2 方法。全部入選者均接受CLIA、ELISA檢驗(yàn)，要求患者檢驗(yàn)前一天20:00后禁食，檢驗(yàn)當(dāng)日采集5 mL空腹靜脈血，以3000 r/min的轉(zhuǎn)速實(shí)施血清分離，之后進(jìn)行檢驗(yàn)，方法為：①CLIA：經(jīng)由科美LiCA500全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀進(jìn)行檢驗(yàn)，按照儀器操作說(shuō)明有效放置反應(yīng)板條、稀釋位、吸頭等，測(cè)定5項(xiàng)乙肝指標(biāo)（HBcAb、HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBeAg）；②ELISA：試劑盒于室溫中放置30 min，按照試劑盒說(shuō)明書設(shè)置陰性、陽(yáng)性、空白對(duì)照孔，再于陽(yáng)性及陰性對(duì)照孔中注入標(biāo)準(zhǔn)液，加注特異酶，混勻、封膜，置于水浴箱（溫度為37℃）中孵育30 min，期間避免光照；最后洗板，當(dāng)顯色后需要加入終止液，并記錄5項(xiàng)乙肝指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)。①檢測(cè)陽(yáng)性率：①HBcAb：參考值為0.00-15.00 PEIU；②HBsAg：參考值為0～0.05 IU/mL；③HBsAb：參考值為0～10.00 mIU/mL；④HBeAb：參考值為0.00～3.00 PEIU；⑤HBeAg：參考值為0.00～1.00 PEIU。②5項(xiàng)乙肝指標(biāo)檢出率：分析且記錄。③不同濃度檢測(cè)靈敏度：濃度分別選取12.0、9.0、3.0、1.5 ng/mL。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。觀察數(shù)據(jù)均以SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件匯總、處理，同時(shí)以n/%表示檢測(cè)陽(yáng)性率、5項(xiàng)乙肝指標(biāo)檢出率、不同濃度檢測(cè)靈敏度，行χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示存在對(duì)比價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 分析檢測(cè)陽(yáng)性率。CLIA檢驗(yàn)的陽(yáng)性率（55.00%）高于ELISA檢驗(yàn)（41.00%），P＜0.05，見表1。

表1 檢測(cè)陽(yáng)性率對(duì)比[n（%）]

2.2 分析5項(xiàng)乙肝指標(biāo)檢出率。CLIA檢驗(yàn)的HBcAb、HBsAg檢出率高于ELISA檢驗(yàn)，P＜0.05，但兩種檢驗(yàn)方法在HBsAb、HBeAb、HBeAg方面的檢出率無(wú)明顯差異，P＞0.05，見表2。

2.3 分析不同濃度檢測(cè)靈敏度。在不同濃度下，CLIA檢驗(yàn)的檢測(cè)靈敏度均優(yōu)于ELISA檢驗(yàn)，P＜0.05，見表3。

表2 5項(xiàng)乙肝指標(biāo)檢出率對(duì)比[n（%）]

表3 不同濃度檢測(cè)靈敏度對(duì)比[n（%）]

3 討論

乙型病毒性肝炎發(fā)病后主要表現(xiàn)為乏力、腹脹、肝區(qū)疼痛、厭食等，目前尚無(wú)特效治療方法與治療藥物[2]，若是不能及時(shí)治療，容易發(fā)展為肝硬化或肝部癌變，危及生命安全，所以做好乙肝早診、早治工作至關(guān)重要，并且乙肝發(fā)病后有一定的潛伏期，此階段內(nèi)無(wú)明顯表現(xiàn)與癥狀，為早期確診病情，有必要實(shí)施乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)。

本次研究表明，CLIA比ELISA更適宜于進(jìn)行乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)，主要表現(xiàn)在CLIA檢驗(yàn)的陽(yáng)性率、HBcAb檢出率、HBsAg檢出率、檢測(cè)靈敏度均優(yōu)于ELISA檢驗(yàn)，P＜0.05。ELISA與CLIA均為常用的乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)手段，其中ELISA具有操作簡(jiǎn)單、試劑價(jià)格低廉的優(yōu)勢(shì)，所以比較適合大批量標(biāo)本檢測(cè)，不過(guò)容易發(fā)生污染情況，增加假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果，診斷準(zhǔn)確率不高。較之ELISA，CLIA靈敏度較高，并且穩(wěn)定性強(qiáng)、反應(yīng)速度快，加之使用的全自動(dòng)儀器具有標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化特征，能夠避免人為因素影響檢驗(yàn)結(jié)果，另外，CLIA還能使電磁快速消失，有利于游離抗體、復(fù)合抗體分離，是一種較為先進(jìn)的檢驗(yàn)方法，能夠用于乙肝篩查。此外，本次檢測(cè)了全部患者的乙肝5項(xiàng)指標(biāo)，其中：①HBcAb：非保護(hù)性抗體，包含IgG、IgM等，且IgG型HBcAb陽(yáng)性意味著HBV感染，若是高滴度，代表正處于感染，若是低滴度，代表既往感染；IgM型HBcAb是發(fā)生HBV感染后最早出現(xiàn)的血清特異性抗體，能夠用于診斷急性乙肝，高滴度表明病情向慢性化轉(zhuǎn)變；以往臨床在測(cè)定HBcAb時(shí)通常會(huì)采用ELISA，不過(guò)因血清中存在交叉反應(yīng)性抗體，導(dǎo)致假陽(yáng)性發(fā)生率較高，容易影響檢驗(yàn)結(jié)果，本次研究結(jié)果亦證實(shí)了這一點(diǎn)；②HBsAg、HBsAb：HBsAg屬于HBV的外膜蛋白，既是啟動(dòng)感染的關(guān)鍵性分子，也是包被病毒的蛋白，可以以管形顆粒、圓形顆粒、Dane顆粒的形式存在，亦會(huì)早期出現(xiàn)于乙肝患者血清中，可以作為普查、診斷早期乙肝的依據(jù)，且一般出現(xiàn)在急性肝炎潛伏期，早于肝功能檢測(cè)、臨床癥狀約1～7周，研究結(jié)果顯示，CLIA檢驗(yàn)的HBsAg檢出率（15.00%）高于ELISA檢驗(yàn)（4.00%）；HBsAb主要是在HBV感染恢復(fù)期、接種疫苗后產(chǎn)生的一種保護(hù)性抗體，若是其水平超過(guò)10IU/ml，表明其能保護(hù)機(jī)體，并使機(jī)體免受HBV感染；目前HBsAg、HBsAb均可進(jìn)行反向間接血凝試驗(yàn)、ELISA、固相放射免疫等檢測(cè)，且以使用CLIA與ELISA為主，通常為半定量檢測(cè)或定性檢測(cè)，不過(guò)相關(guān)報(bào)道指出[3]，CLIA在檢測(cè)HBsAg時(shí)的靈敏度優(yōu)于ELISA，與本研究結(jié)果一致，本研究結(jié)果亦指出：CLIA在不同濃度下檢測(cè)HBsAg時(shí)的靈敏度均優(yōu)于ELISA；③HBeAb、HBeAg：HBeAg屬于血清分泌性蛋白，不參與合成病毒顆粒，主要由Dane顆粒分泌，考慮與免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，若其檢測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)陽(yáng)性，預(yù)示著病毒復(fù)制活躍，有助于判斷病毒傳染性強(qiáng)弱，一般在急性感染后6～12周便能檢出，當(dāng)其轉(zhuǎn)陰后會(huì)出現(xiàn)HBeAb，但二者基本不會(huì)同時(shí)出現(xiàn)陽(yáng)性，目前在對(duì)HBeAg實(shí)施定性分析時(shí)主要采用CLIA、ELISA，而在進(jìn)行半定量分析時(shí)主要以S/CO表示，并且檢測(cè)HBeAg時(shí)要求檢測(cè)系統(tǒng)具有較高的穩(wěn)定性與靈敏度，所以采用CLIA更易取得滿意的檢測(cè)效果[4-5]。

綜上所述，由于在進(jìn)行乙肝病毒血清學(xué)檢驗(yàn)時(shí)，CLIA的陽(yáng)性率與靈敏度均優(yōu)于ELISA，所以其臨床應(yīng)用價(jià)值更為顯著。