• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    甘薯塊根淀粉酶特性及糖化效應(yīng)研究

    2021-06-04 01:43:26沈升法吳列洪羅志高
    中國(guó)糧油學(xué)報(bào) 2021年5期
    關(guān)鍵詞:塊根甘薯淀粉酶

    項(xiàng) 超 沈升法 吳列洪 李 兵 羅志高

    (浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物與核技術(shù)利用研究所,杭州 310021)

    甘薯[Ipomoeabatatas(L.) Lam.]是中國(guó)重要的糧食作物[1]。近年來,隨著人們生活水平的提高和對(duì)消費(fèi)需求的不斷改變,鮮食的消費(fèi)比例持續(xù)增加,甘薯加工產(chǎn)品呈現(xiàn)多樣化、營(yíng)養(yǎng)化、細(xì)分化以及休閑食品銷量逐步上升等趨勢(shì),對(duì)優(yōu)質(zhì)鮮食甘薯和加工專用品種的需求日益增長(zhǎng)[2]。甘薯塊根富含淀粉和淀粉酶,α-淀粉酶和β-淀粉酶是促進(jìn)淀粉分解的主要酶[3,4]。其中,α-淀粉酶將淀粉分子的α-1,4糖苷鍵任意切斷成長(zhǎng)短不一的短鏈糊精及少量的麥芽糖和葡萄糖,β-淀粉酶可以從淀粉的非還原性末端降解α-1,4糖苷鍵,生成麥芽糖[4]。淀粉酶的活性是決定淀粉糖化程度主要因素,也是甘薯品質(zhì)的重要指標(biāo)之一[5]。

    甘薯品種的糖化特性存在基因型差異,具體表現(xiàn)在淀粉率、可溶性糖含量、還原糖含量和淀粉酶活性等指標(biāo)的差異[3-9]。史春余等[4]研究表明食用型品種塊根膨大后期,由于淀粉酶的作用導(dǎo)致薯塊總淀粉含量較低、可溶性總糖含量較高。陳顯讓等[6]研究發(fā)現(xiàn)在塊根膨大后期,β-淀粉酶和總淀粉含量多數(shù)呈顯著的負(fù)相關(guān),可以為選擇提取β-淀粉酶的優(yōu)質(zhì)甘薯來源提供參考。陸國(guó)權(quán)等[7]研究表明不同干率類型的甘薯品種間淀粉酶活性存在差異,高干型、低干型與中干型品種淀粉酶活性存在極顯著差異。謝逸萍等[8]報(bào)道了不同基因型品種淀粉率在整個(gè)貯藏期均有所下降, 不同淀粉含量品種的淀粉酶活性存在明顯差異。不同品種間塊根淀粉酶活性的差異可能預(yù)示著其塊根中淀粉水解所需的最低淀粉酶活性是不同的,這與淀粉糊化和相關(guān)淀粉酶活性保持條件有關(guān)[4, 10-14]。Mensah等[12]研究發(fā)現(xiàn)β-淀粉酶活性受溫度、基因型、加熱時(shí)間以及基因型與溫度交互作用影響,升溫和延長(zhǎng)加熱時(shí)間通常會(huì)降低β-淀粉酶的活性并導(dǎo)致糖分的變化。

    隨著鮮食甘薯消費(fèi)需求和加工原料需求的變化,提前在夏季或高溫季節(jié)陸續(xù)進(jìn)行甘薯收獲,但一般此時(shí)鮮薯糖分結(jié)累少、甜度低,其淀粉酶活性可能還不足以促進(jìn)淀粉的迅速水解[4]。關(guān)于夏季或高溫季節(jié)收獲的甘薯淀粉酶糖化特性及不同類型內(nèi)源淀粉酶活性保持條件的研究鮮有報(bào)道。因此,本實(shí)驗(yàn)通過測(cè)定甘薯在蒸煮熟化前后其塊根中可溶性糖、還原糖含量以及不同類型淀粉酶活性變化,開展淀粉酶對(duì)甘薯淀粉的酶解特性研究,并進(jìn)行生淀粉體外糖化的分析,不僅為系統(tǒng)了解加工過程中甘薯淀粉酶特性及糖化效應(yīng),而且為篩選鮮食或加工專用品種,有效開發(fā)甘薯資源,提高其加工產(chǎn)品質(zhì)量、功能及其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    供試甘薯材料為浙薯13、浙薯75和浙薯33;葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0 mg/mL)、硫酸銅、亞甲藍(lán)、酒石酸鉀鈉、氫氧化鈉、鹽酸,均為分析純;超純水;α-淀粉酶測(cè)定的K-CERA試劑盒、β-淀粉酶測(cè)定的K-BETA3試劑盒。

    1.2 儀器與設(shè)備

    C21-SK2108多功能電磁爐(蒸煮模式,1 100 W),DKS-24恒溫水浴鍋,DS-1高速組織搗碎機(jī),Eppendorf Centrifuge 5810R離心機(jī),752紫外可見分光光度計(jì)。

    1.3 方法

    1.3.1 薯塊樣品處理

    薯塊于8月15日(夏季)收獲,生育期109 d。選取3個(gè)中等大小(250 g左右)的新鮮薯塊,每個(gè)薯塊為一個(gè)重復(fù),橫向中間對(duì)切,其中半個(gè)薯塊用電磁爐隔水蒸煮1 h,鮮薯蒸熟后冷卻至室溫,切除切面1 cm左右薯肉,從整個(gè)橫切面均勻刮取1.0 g薯泥樣品,用于熟薯糖分的測(cè)定;另外半個(gè)薯塊從橫切面均勻刮取兩份1.0 g薯泥樣品,分別用于淀粉酶及生薯糖分的測(cè)定。

    1.3.2 還原糖和可溶性糖含量的測(cè)定

    參照GB/T 5009.7—2016直接滴定,對(duì)生薯和熟薯樣品進(jìn)行還原糖和可溶性糖含量測(cè)定。取已備好的生薯和熟薯樣品各1.0 g,分別加水9 mL,置于60 ℃恒溫水浴中保溫2 h,冷卻后以1 789 g速度離心10 min,各吸取上清液6 mL,每份上清液平均分成兩份,一份用于還原糖含量測(cè)定,另一份加入6 mol/L鹽酸在68 ℃水解后用于可溶性糖含量測(cè)定。

    1.3.3 淀粉酶活性的測(cè)定

    采用K-CERA和K-BETA3試劑盒分別測(cè)定α-淀粉酶[14,15]和β-淀粉酶活性[14,16]。取1.0 g鮮薯樣品,加入1 mL提取緩沖劑進(jìn)行研磨,再加入4 mL提取緩沖劑分三次對(duì)研磨的鮮薯樣品進(jìn)行沖洗并轉(zhuǎn)移到15 mL塑料離心管中,以447 g速度離心10 min,吸取上清液0.2 mL,然后加入0.2 mL α-淀粉酶測(cè)定反應(yīng)底物,置于40 ℃恒溫水浴中保溫10 min,加3 mL終止液,在400 nm處測(cè)定吸光度值。取0.2 mL上清液,加入3 mL稀釋緩沖液進(jìn)行稀釋,從中吸取0.2 mL溶液,然后加入0.2 mL β-淀粉酶測(cè)定反應(yīng)底物,置于40 ℃恒溫水浴中保溫10 min,加3 mL終止液,在400 nm處測(cè)定吸光度值。其中待測(cè)酶液和底物,均事先置于40 ℃恒溫水浴中保溫5 min。測(cè)完后按照試劑盒提供的計(jì)算公式及稀釋倍數(shù),換算成以鮮薯計(jì)算的酶活性單位(U)。

    1.3.4 淀粉酶熱穩(wěn)定性的測(cè)定

    參考淀粉酶活性測(cè)定方法,分別測(cè)定樣品在50、60、70、80、90 ℃時(shí)的酶活性,由于品種間及不同溫度下酶活性差距大,需要調(diào)整適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù),確保吸光度在量程范圍內(nèi),再按各自的稀釋倍數(shù),統(tǒng)一轉(zhuǎn)換到淀粉酶活性測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)稀釋倍數(shù)下的吸光度。其中β-淀粉酶熱穩(wěn)定性測(cè)定增加75 ℃的處理。參考淀粉酶活性測(cè)定方法,在60 、70 、75 、80 ℃條件下測(cè)定20 min內(nèi)每2 min時(shí)的β-淀粉酶活性,以標(biāo)準(zhǔn)稀釋倍數(shù)下的吸光度來表示。

    1.3.5 生淀粉體外糖化的測(cè)定

    選取3個(gè)品種的新鮮薯塊,切絲后用高速組織搗碎機(jī)搗碎后,使用清水沖洗,180目篩網(wǎng)過濾2次,所得濾液以447 g速度離心10 min,棄上清液得到淀粉。稱取新鮮濕淀粉0.20 g置于15 mL塑料離心管,加入1.3.3中的上清液0.4 mL和5 mL蒸餾水,置于75 ℃水浴鍋,并控制水浴鍋在15 min左右升到85 ℃,期間不斷振蕩離心管。達(dá)到85 ℃后迅速取出,置入冷水中冷卻。以加入5.4 mL蒸餾水為對(duì)照,測(cè)定反應(yīng)產(chǎn)生的還原糖含量,換算成以鮮薯計(jì)的還原糖含量。

    1.3.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

    3次重復(fù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,其中組間平均值比較采用Duncan分析(P<0.05)。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 β-淀粉酶活性變化

    對(duì)3個(gè)甘薯品種的β-淀粉酶活性進(jìn)行多因素實(shí)驗(yàn)的方差分析(表1),結(jié)果表明,甘薯塊根中β-淀粉酶活性高低受品種、加熱溫度和保溫時(shí)間極顯著的影響,也取決于品種和反應(yīng)條件(包括溫度和時(shí)間)之間的相互作用。其中,加熱溫度占總方差比例最大。

    表1 加熱溫度和保溫時(shí)間對(duì)不同甘薯品種塊根中β-淀粉酶活性的影響

    當(dāng)加熱溫度高于酶的最適溫度時(shí),酶的活性就會(huì)逐漸失去;隨著加熱時(shí)間的延長(zhǎng),薯塊中淀粉酶的失活率升高,并且這個(gè)過程是不可逆的。因此,適宜的加熱溫度和保溫時(shí)間,在保持甘薯淀粉酶活性的穩(wěn)定性方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。溫度對(duì)β-淀粉酶活性的影響由圖1所示,3個(gè)甘薯品種的β-淀粉酶活性在不同溫度條件下變化趨勢(shì)基本一致,變化的程度有所不同。當(dāng)溫度低于60 ℃時(shí),β-淀粉酶活性隨溫度的升高而增大;當(dāng)溫度高于60 ℃時(shí),β-淀粉酶活性隨著溫度的升高呈下降趨勢(shì)。供試品種在60 ℃溫度條件下可以較好地保持甘薯淀粉酶活性,與前人研究結(jié)果基本一致[14,17]。β-淀粉酶不能水解天然淀粉,能水解糊化的甘薯淀粉[14]。本研究中β-淀粉酶在75 ℃和80 ℃仍有較強(qiáng)的活性,80 ℃時(shí)其糖化能力已經(jīng)大大降低,說明其不能耐受80 ℃以上的高溫。在70~90 ℃范圍內(nèi),浙薯13的β-淀粉酶活性下降幅度顯著小于浙薯33,與浙薯75無顯著差異;說明浙薯13的β-淀粉酶熱穩(wěn)定性較強(qiáng)。當(dāng)反應(yīng)溫度一定時(shí),在保溫時(shí)間在20 min以內(nèi)時(shí),β-淀粉酶活性總體上都是隨保溫時(shí)間延長(zhǎng)而增大;當(dāng)溫度高于60 ℃時(shí),糖化速度隨保溫時(shí)間的延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì),β-淀粉酶活性趨于平穩(wěn)(圖2)。另外,對(duì)3個(gè)甘薯品種之間比較分析發(fā)現(xiàn),浙薯33的淀粉酶活性在同樣反應(yīng)條件下最高,浙薯13次之,浙薯75最低。與保溫時(shí)間和品種兩個(gè)因素相比,溫度是影響β-淀粉酶活性的主要因素。因此,在甘薯蒸煮食用及其產(chǎn)品加工過程中應(yīng)嚴(yán)格控制加熱的溫度。

    圖1 不同溫度條件下β-淀粉酶活性變化

    圖2 不同溫度及不同加熱時(shí)間處理對(duì)三個(gè)品種甘薯β-淀粉酶熱穩(wěn)定性的影響

    3個(gè)甘薯品種中,浙薯13和浙薯33能夠很好地保持其中的淀粉酶活性,浙薯13的耐熱性更強(qiáng)。浙薯13和浙薯33因含有相對(duì)較高的β-淀粉水解潛力使其成為薯脯干加工的良好原料。

    2.2 α-淀粉酶活性變化

    方差分析結(jié)果表明,甘薯塊根中α-淀粉酶活性不僅受品種和加熱溫度極顯著的影響,而且受品種與加熱溫度之間互作效應(yīng)極顯著的影響(表2)。其中,加熱溫度占總方差比例最大。與品種相比,加熱溫度是影響α-淀粉酶活性的主要因素。溫度對(duì)α-淀粉酶活性的影響由圖3所示,α-淀粉酶活性隨溫度的升高而下降;當(dāng)溫度高于50 ℃時(shí),其糖化能力已經(jīng)大大降低;在50~70 ℃范圍內(nèi),3個(gè)品種的α-淀粉酶活性均大幅下降,其中浙薯13的α-淀粉酶活性下降幅度最小且顯著低于浙薯75,與浙薯33下降幅度無明顯差異。當(dāng)溫度超過80 ℃時(shí),酶開始變性失活,從而抑制了糖化反應(yīng)的進(jìn)行。3個(gè)甘薯品種的α-淀粉酶活性在不同溫度條件下變化趨勢(shì)基本一致,變化的程度有所不同。對(duì)圖1和圖3的結(jié)果進(jìn)行比較可以發(fā)現(xiàn),各品種塊根中α-淀粉酶活性都遠(yuǎn)低于β-淀粉酶活性,這與前人的研究結(jié)果一致。

    表2 加熱溫度對(duì)不同甘薯品種塊根中α-淀粉酶活性的影響

    圖3 不同溫度條件下α-淀粉酶活性變化

    2.3 還原糖、可溶性糖含量變化

    β-淀粉酶催化可溶性淀粉向糖的轉(zhuǎn)化,從而增加了游離糖的組成和加工產(chǎn)品的甜度[12]。從圖4可以看出,不同品種在蒸煮之后的可溶性糖和還原糖含量均顯著增加,且還原糖含量的增幅較可溶性糖含量更大。不同品種間熟薯可溶性糖含量和還原糖含量均存在顯著差異;可溶性糖含量和還原糖含量的增量和增幅均是浙薯33最大,浙薯13次之,浙薯75最小。以上結(jié)果可以推斷,甘薯蒸煮過程中,達(dá)到淀粉糊化溫度后,β-淀粉酶仍存在較大活性,對(duì)糊化淀粉的糖化作用導(dǎo)致甘薯蒸煮過程中糖分的變化[5,18-20]。進(jìn)一步的生淀粉體外糖化實(shí)驗(yàn)證明,在75~85 ℃條件下,以還原糖含量為指標(biāo),含β-淀粉酶的甘薯提取液能使生淀粉在糊化的同時(shí)實(shí)現(xiàn)糖化。β-淀粉酶活性高的品種,其糖化產(chǎn)率,即還原糖含量也相應(yīng)較高。夏季或高溫季節(jié)進(jìn)行甘薯收獲時(shí),鮮薯糖分結(jié)累少,甜度低,而β-淀粉酶能在蒸煮過程中大幅度增加糖分,因此選擇β-淀粉酶活性高、熱穩(wěn)定性好的品種,適合夏季收獲,作為鮮食或加工品種應(yīng)用。

    注:同一類型的糖分柱上不同字母的表示處理間差異顯著(P<0.05)。圖4 不同品種蒸煮前后糖分變化

    注:不同字母的表示處理間差異顯著(P< 0.05)。圖5 生淀粉體外糖化結(jié)果

    在適宜條件下,α-淀粉酶隨機(jī)作用于淀粉鏈內(nèi)部的α-1,4-糖苷鍵,產(chǎn)物是糊精及少量的麥芽糖和葡萄糖;β-淀粉酶可以從淀粉的非還原性末端降解α-1,4-糖苷鍵,生成麥芽糖[4]?;谝陨献饔脵C(jī)理,Mensah等[12]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,α-淀粉酶和β-淀粉酶水解淀粉存在很好的協(xié)同作用。甘薯塊根中含有一定量的α-淀粉酶,在高溫下,它的存在可能增強(qiáng)了淀粉向麥芽糖的轉(zhuǎn)化,而升溫和增加加熱時(shí)間通常會(huì)降低β-淀粉酶的活性并增強(qiáng)麥芽糖的形成[10]。本研究中β-淀粉酶的最佳溫度在60 ℃左右,加熱到75 ℃仍可保留相對(duì)較高比例的內(nèi)源淀粉酶[12,21]。因此,較高溫度下還原糖含量的差異可能是由于α-淀粉酶和β-淀粉酶的協(xié)同作用。

    3 結(jié)論

    甘薯塊根中β-淀粉酶活性受品種、加熱溫度和保溫時(shí)間極顯著的影響;與保溫時(shí)間和品種這兩個(gè)因素相比,溫度是影響β-淀粉酶活性的主要因素。甘薯塊根中α-淀粉酶活性受品種、加熱溫度以及兩者之間互作效應(yīng)極顯著的影響;與品種相比,加熱溫度是影響α-淀粉酶活性的主要因素。因此,在甘薯蒸煮食用及其產(chǎn)品加工過程中應(yīng)嚴(yán)格控制加熱的溫度。3個(gè)甘薯品種中,浙薯13和浙薯33能夠很好地保持其中的β-淀粉酶活性,浙薯13的耐熱性更強(qiáng)。β-淀粉酶活性高的品種,其糖化產(chǎn)率也相對(duì)較高。甘薯品種浙薯13和浙薯33因含有相對(duì)較高的β-淀粉水解潛力和耐熱性,適合在夏季或高溫季節(jié)收獲作為鮮食和加工的良好原料。

    猜你喜歡
    塊根甘薯淀粉酶
    異淀粉酶法高直鏈銀杏淀粉的制備
    多管齊下 防好甘薯黑斑病
    德欽烏頭塊根化學(xué)成分的研究
    中成藥(2018年2期)2018-05-09 07:19:50
    塊根塊莖類植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用
    木薯塊根拔起的最大應(yīng)力數(shù)值模擬及試驗(yàn)
    甘薯抗旱鑒定及旱脅迫對(duì)甘薯葉片生理特性的影響
    藥用植物珠子參新鮮塊根DNA提取方法研究
    α-淀粉酶的基因改造與菌種選育研究進(jìn)展
    α-淀粉酶的改性技術(shù)研究進(jìn)展
    Bacillus subtilis ZJF-1A5產(chǎn)中溫α-淀粉酶發(fā)酵工藝優(yōu)化
    成人亚洲精品av一区二区| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 九色成人免费人妻av| 久久99热这里只频精品6学生 | 久久草成人影院| 免费观看精品视频网站| 精品人妻偷拍中文字幕| 美女国产视频在线观看| 一区二区三区免费毛片| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲在久久综合| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲18禁久久av| 午夜福利在线观看吧| 热99re8久久精品国产| 欧美一级a爱片免费观看看| 免费av不卡在线播放| 精华霜和精华液先用哪个| 九九热线精品视视频播放| 狠狠狠狠99中文字幕| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 一区二区三区高清视频在线| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久久国产成人免费| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 欧美三级亚洲精品| 国产成年人精品一区二区| 亚洲五月天丁香| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美+日韩+精品| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲av.av天堂| 99久久无色码亚洲精品果冻| 精品人妻一区二区三区麻豆| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 成人三级黄色视频| 日韩av在线大香蕉| 又爽又黄a免费视频| 岛国毛片在线播放| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 九九在线视频观看精品| 亚洲精品色激情综合| 日韩欧美精品免费久久| 精品久久久噜噜| 国语自产精品视频在线第100页| www日本黄色视频网| 亚洲av一区综合| 99在线视频只有这里精品首页| 99热这里只有是精品50| 国产免费福利视频在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 国产麻豆成人av免费视频| 久久久a久久爽久久v久久| 在线观看66精品国产| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产成人a∨麻豆精品| 超碰97精品在线观看| 亚洲丝袜综合中文字幕| 日韩人妻高清精品专区| 嫩草影院精品99| 在线免费观看不下载黄p国产| 99久久精品一区二区三区| 永久免费av网站大全| 亚洲av福利一区| 美女cb高潮喷水在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| av天堂中文字幕网| 国产亚洲91精品色在线| 精品人妻熟女av久视频| 国产精品不卡视频一区二区| 婷婷色综合大香蕉| 色播亚洲综合网| 精品无人区乱码1区二区| 国产淫片久久久久久久久| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲中文字幕日韩| ponron亚洲| 久久久国产成人精品二区| 精品久久久久久久久av| 国产精品精品国产色婷婷| 男女啪啪激烈高潮av片| 边亲边吃奶的免费视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 有码 亚洲区| av国产久精品久网站免费入址| 在线免费观看不下载黄p国产| 欧美成人a在线观看| 水蜜桃什么品种好| 高清毛片免费看| 免费观看精品视频网站| 不卡视频在线观看欧美| 国产伦在线观看视频一区| 不卡视频在线观看欧美| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲第一区二区三区不卡| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲av成人av| 亚洲欧洲日产国产| 69人妻影院| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 乱系列少妇在线播放| 久热久热在线精品观看| 国产 一区 欧美 日韩| 国产淫语在线视频| 边亲边吃奶的免费视频| 日韩制服骚丝袜av| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲精品影视一区二区三区av| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产麻豆成人av免费视频| 国产 一区 欧美 日韩| 人妻系列 视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 久久久久久久亚洲中文字幕| 久久久久免费精品人妻一区二区| 午夜日本视频在线| 18禁动态无遮挡网站| 简卡轻食公司| 日本欧美国产在线视频| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 免费人成在线观看视频色| a级一级毛片免费在线观看| 国产精品人妻久久久久久| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 青春草视频在线免费观看| 少妇的逼水好多| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲电影在线观看av| ponron亚洲| 国产一区二区三区av在线| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲国产欧美人成| 国产精品精品国产色婷婷| 午夜亚洲福利在线播放| 美女内射精品一级片tv| 91久久精品国产一区二区成人| 亚洲va在线va天堂va国产| 99在线视频只有这里精品首页| 久久精品国产亚洲av天美| 国产av码专区亚洲av| 国产精品一区二区三区四区久久| 欧美3d第一页| 国产精品久久久久久久电影| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲av电影不卡..在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 少妇人妻精品综合一区二区| 国内精品一区二区在线观看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 99热6这里只有精品| 国产午夜精品一二区理论片| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 午夜福利视频1000在线观看| 91精品一卡2卡3卡4卡| 免费看a级黄色片| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 中文字幕久久专区| 成人三级黄色视频| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 少妇人妻一区二区三区视频| 最近手机中文字幕大全| 国产成人一区二区在线| 99久久中文字幕三级久久日本| 久99久视频精品免费| 91狼人影院| 亚洲伊人久久精品综合 | 国产毛片a区久久久久| 99热网站在线观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国内精品一区二区在线观看| 99在线人妻在线中文字幕| 少妇熟女欧美另类| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲国产欧美人成| 亚洲久久久久久中文字幕| 我的老师免费观看完整版| 国产精品精品国产色婷婷| 直男gayav资源| 我的老师免费观看完整版| 青青草视频在线视频观看| 亚洲不卡免费看| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲欧洲日产国产| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 成人毛片60女人毛片免费| 成人漫画全彩无遮挡| 亚洲精品一区蜜桃| 免费看a级黄色片| videossex国产| 内地一区二区视频在线| 亚洲在线观看片| 女人久久www免费人成看片 | 亚洲真实伦在线观看| 最新中文字幕久久久久| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 成年av动漫网址| 国产真实乱freesex| 国产视频内射| 国产在线一区二区三区精 | 欧美高清成人免费视频www| 美女被艹到高潮喷水动态| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 亚洲美女搞黄在线观看| 老司机福利观看| 免费黄网站久久成人精品| 岛国毛片在线播放| 国内揄拍国产精品人妻在线| 欧美成人一区二区免费高清观看| 美女高潮的动态| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲精品成人久久久久久| 97超视频在线观看视频| 国产精品女同一区二区软件| 两个人视频免费观看高清| 国产91av在线免费观看| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产亚洲精品av在线| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 中文亚洲av片在线观看爽| 久久99热这里只有精品18| 国产亚洲精品久久久com| 国产大屁股一区二区在线视频| 伊人久久精品亚洲午夜| 一个人看的www免费观看视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 一区二区三区乱码不卡18| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 欧美日本视频| av播播在线观看一区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 在线免费十八禁| 国产av码专区亚洲av| 热99在线观看视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 免费黄色在线免费观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 老司机影院毛片| 在线免费观看的www视频| 最近中文字幕高清免费大全6| 午夜激情福利司机影院| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 欧美成人一区二区免费高清观看| 免费观看精品视频网站| 国产三级中文精品| 欧美精品国产亚洲| 久久久久九九精品影院| 欧美高清性xxxxhd video| 伊人久久精品亚洲午夜| 欧美精品一区二区大全| 亚洲18禁久久av| 男插女下体视频免费在线播放| 色播亚洲综合网| 中国国产av一级| 秋霞在线观看毛片| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲中文字幕日韩| 免费电影在线观看免费观看| 美女国产视频在线观看| 精品久久久久久久久av| 国产片特级美女逼逼视频| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国内精品美女久久久久久| 成人特级av手机在线观看| 国产亚洲一区二区精品| 国产精品国产高清国产av| 精品午夜福利在线看| 国产中年淑女户外野战色| 内射极品少妇av片p| 五月伊人婷婷丁香| 日本爱情动作片www.在线观看| 中文字幕亚洲精品专区| 大话2 男鬼变身卡| 九九热线精品视视频播放| 成年av动漫网址| 91久久精品电影网| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产 一区 欧美 日韩| 中文字幕av成人在线电影| 日韩成人av中文字幕在线观看| 日本与韩国留学比较| 亚洲av.av天堂| 色播亚洲综合网| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 在线免费观看的www视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 中文字幕av在线有码专区| 成人毛片60女人毛片免费| 日韩三级伦理在线观看| 日韩亚洲欧美综合| 九九爱精品视频在线观看| 色5月婷婷丁香| 天堂中文最新版在线下载 | 观看免费一级毛片| 色5月婷婷丁香| 久久欧美精品欧美久久欧美| 精品一区二区免费观看| 99在线人妻在线中文字幕| 国内精品宾馆在线| 免费黄网站久久成人精品| 成年版毛片免费区| 免费电影在线观看免费观看| 好男人视频免费观看在线| 久久久久久久亚洲中文字幕| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲av免费在线观看| 最近手机中文字幕大全| 在线播放国产精品三级| 日韩在线高清观看一区二区三区| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 婷婷色综合大香蕉| 天美传媒精品一区二区| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 一区二区三区高清视频在线| 成人特级av手机在线观看| 一级黄片播放器| 国产毛片a区久久久久| 亚洲av成人av| 大香蕉97超碰在线| 中文字幕av在线有码专区| 搡女人真爽免费视频火全软件| 热99re8久久精品国产| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲精品国产成人久久av| 99久国产av精品| 国产伦在线观看视频一区| 婷婷色综合大香蕉| 性色avwww在线观看| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 日韩欧美精品v在线| 日韩欧美在线乱码| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲内射少妇av| 三级国产精品片| 在线天堂最新版资源| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 午夜福利在线在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产美女午夜福利| 日日啪夜夜撸| 国产69精品久久久久777片| 人妻夜夜爽99麻豆av| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| .国产精品久久| 国产精品久久久久久av不卡| av天堂中文字幕网| 一区二区三区免费毛片| 高清午夜精品一区二区三区| 国产在视频线精品| 国内精品美女久久久久久| 大香蕉97超碰在线| 永久免费av网站大全| 国产精华一区二区三区| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产精品熟女久久久久浪| av.在线天堂| 色播亚洲综合网| 国产毛片a区久久久久| av在线播放精品| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 欧美zozozo另类| 久久鲁丝午夜福利片| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产伦一二天堂av在线观看| 免费观看性生交大片5| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲最大成人av| 亚洲成av人片在线播放无| 精品久久久久久电影网 | 国产精品av视频在线免费观看| 99久国产av精品| 少妇人妻一区二区三区视频| 人妻系列 视频| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产亚洲一区二区精品| av免费观看日本| 成人亚洲精品av一区二区| 91aial.com中文字幕在线观看| 1024手机看黄色片| 两个人的视频大全免费| 亚洲国产精品成人久久小说| 日韩精品青青久久久久久| 好男人在线观看高清免费视频| 全区人妻精品视频| 男人的好看免费观看在线视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 亚洲av熟女| 黄色一级大片看看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 大话2 男鬼变身卡| 免费黄色在线免费观看| 国产 一区精品| 久久草成人影院| 男人舔女人下体高潮全视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产成年人精品一区二区| 内地一区二区视频在线| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产 一区 欧美 日韩| 国产高清视频在线观看网站| 成人欧美大片| 亚洲精品国产成人久久av| 亚洲无线观看免费| 日韩av在线大香蕉| 亚洲国产高清在线一区二区三| 精品欧美国产一区二区三| 精品一区二区三区人妻视频| 久久人人爽人人片av| 亚洲自拍偷在线| 亚洲av电影不卡..在线观看| 色吧在线观看| 国产激情偷乱视频一区二区| 免费观看人在逋| 免费看光身美女| 毛片一级片免费看久久久久| 国产熟女欧美一区二区| 能在线免费观看的黄片| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 欧美3d第一页| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产在视频线在精品| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲在线自拍视频| 亚洲最大成人av| 伊人久久精品亚洲午夜| 日韩欧美精品免费久久| 男的添女的下面高潮视频| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 99久久人妻综合| 最近最新中文字幕免费大全7| 中文字幕久久专区| 国产视频首页在线观看| 岛国毛片在线播放| 国产亚洲av嫩草精品影院| 99视频精品全部免费 在线| 午夜精品在线福利| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 女人被狂操c到高潮| www日本黄色视频网| av黄色大香蕉| 国产精品,欧美在线| 天堂网av新在线| 国产精品三级大全| 久久久久免费精品人妻一区二区| av卡一久久| 精品国产露脸久久av麻豆 | 日本黄色片子视频| 最新中文字幕久久久久| 精品久久久噜噜| 亚洲国产欧美人成| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 成人毛片a级毛片在线播放| 51国产日韩欧美| 日本与韩国留学比较| 成年av动漫网址| 色吧在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 最近中文字幕高清免费大全6| 在线a可以看的网站| 亚洲av免费高清在线观看| 日日啪夜夜撸| 高清毛片免费看| 日韩大片免费观看网站 | 国产不卡一卡二| 久久人妻av系列| 一级毛片电影观看 | 亚洲国产欧美在线一区| 尾随美女入室| av视频在线观看入口| av天堂中文字幕网| 亚洲欧美一区二区三区国产| 日本五十路高清| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 欧美+日韩+精品| 丝袜美腿在线中文| 精品国产露脸久久av麻豆 | 一级av片app| 国产成人免费观看mmmm| 看黄色毛片网站| 最近中文字幕高清免费大全6| 老司机影院毛片| 成人av在线播放网站| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 欧美另类亚洲清纯唯美| 高清av免费在线| 亚洲性久久影院| 六月丁香七月| 久久精品人妻少妇| 又爽又黄无遮挡网站| 日日撸夜夜添| 成人午夜精彩视频在线观看| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产精品久久久久久久电影| 午夜激情欧美在线| 国产精品av视频在线免费观看| 精品国内亚洲2022精品成人| 狠狠狠狠99中文字幕| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 能在线免费观看的黄片| 在线观看一区二区三区| 国产综合懂色| 国产精品精品国产色婷婷| 在线a可以看的网站| 欧美xxxx性猛交bbbb| 三级经典国产精品| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 26uuu在线亚洲综合色| 联通29元200g的流量卡| 日日干狠狠操夜夜爽| 亚洲国产高清在线一区二区三| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲国产精品专区欧美| 看黄色毛片网站| 亚洲高清免费不卡视频| 日本免费一区二区三区高清不卡| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 天堂√8在线中文| 亚洲最大成人中文| 国内精品宾馆在线| 亚洲精品日韩av片在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 国国产精品蜜臀av免费| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 99久国产av精品国产电影| 国产真实伦视频高清在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 中文字幕熟女人妻在线| 免费无遮挡裸体视频| 精品一区二区三区视频在线| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲人成网站在线播| 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 免费观看的影片在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲av不卡在线观看| 精品久久久久久久久av| 九草在线视频观看| 亚洲最大成人手机在线| 欧美日韩在线观看h| 高清在线视频一区二区三区 | 国产乱人偷精品视频| 成人特级av手机在线观看| www.av在线官网国产| 禁无遮挡网站| 精华霜和精华液先用哪个| 联通29元200g的流量卡| 成人午夜高清在线视频| 永久免费av网站大全| 成年av动漫网址| 久久久久久大精品| 精品国产露脸久久av麻豆 | 久久精品国产亚洲av天美| 国产成年人精品一区二区| 久久久久久久久久成人| 午夜免费激情av| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产成人精品一,二区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 久久精品91蜜桃| 久久精品久久久久久久性| 亚洲国产欧美在线一区| 伦理电影大哥的女人| 国产人妻一区二区三区在| www日本黄色视频网| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 能在线免费看毛片的网站| 91午夜精品亚洲一区二区三区| av黄色大香蕉| 天美传媒精品一区二区| 91久久精品电影网| 在线播放国产精品三级| 免费观看人在逋| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 99久久成人亚洲精品观看| 国产视频首页在线观看| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 免费在线观看成人毛片| 国产成人91sexporn| 午夜免费男女啪啪视频观看| 最后的刺客免费高清国语| 少妇人妻一区二区三区视频| av专区在线播放| 最后的刺客免费高清国语| 日本与韩国留学比较| 国产淫语在线视频| 久久6这里有精品| 最近中文字幕2019免费版| 国产一级毛片在线| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 精品一区二区三区视频在线| 26uuu在线亚洲综合色| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久国内精品自在自线图片| 最新中文字幕久久久久| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美色视频一区免费| 精品一区二区免费观看| 亚洲在久久综合| 久久精品夜色国产| 亚洲精品色激情综合| 久久久久久久久久久免费av| 在线免费十八禁|