納晶微針導(dǎo)入5%米諾地爾聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷對(duì)斑禿患者血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子及毛囊中相關(guān)分子表達(dá)的影響

江 舉，何麗霞，林佑煥，林 沂，鄭曉敏，吳小末

（福建省福州市皮膚病防治院皮內(nèi)科，福建 福州，350025）

斑禿是皮膚科常見的一種疾病，典型特征是一個(gè)或者多個(gè)清晰圓形或者橢圓形區(qū)出現(xiàn)毛發(fā)脫落的情況[1]。斑禿多表現(xiàn)為生長(zhǎng)期毛發(fā)斷裂，可發(fā)生在任何年齡段，發(fā)病通過性別無相關(guān)性，該病會(huì)對(duì)患者的外觀造成影響，使得患者往往容易出現(xiàn)心理負(fù)擔(dān)[2]。在斑禿的病機(jī)上，研究認(rèn)為T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫細(xì)胞大量分泌炎癥因子，毛囊膠質(zhì)細(xì)胞分化異常，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）過表達(dá)密切相關(guān)。復(fù)方甘草酸苷屬于一種復(fù)方制劑，目前認(rèn)為該病在皮膚科疾病中有良好抗炎及抗過敏作用，米諾地爾屬于一種鉀通道開放劑，可以強(qiáng)烈擴(kuò)張血管，臨床使用過程發(fā)現(xiàn)使用這一藥物可出現(xiàn)不同程度的多毛癥，但也被批準(zhǔn)用于斑禿治療[3]。納晶微針屬于新興透皮促滲技術(shù)，直徑為頭發(fā)的千分之一，能夠在短時(shí)間內(nèi)在皮膚表面打開諸多微細(xì)孔道，藥物經(jīng)孔道能有效透過角質(zhì)屏障，促進(jìn)藥物的吸收，發(fā)揮有效治療的目的[4]。在本次研究就探討對(duì)斑禿患者的治療中，采取納晶微針導(dǎo)入5%米諾地爾聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷的效果及對(duì)血管VEGF及毛囊中相關(guān)分子表達(dá)的影響，以為納晶微針技術(shù)的臨床推廣提供依據(jù)，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2017年1月-2020年2月收治的122例斑禿患者為研究對(duì)象。按照隨機(jī)數(shù)字表法將患者分成以下兩組：實(shí)驗(yàn)組62例，男40例，女22例；年齡18～65歲，平均年齡（44.2±1.6）歲；病程1～56個(gè)月，平均病程（28.2±2.5）個(gè)月；分型：?jiǎn)伟l(fā)斑片35例，多發(fā)斑片27例；嚴(yán)重程度：輕度斑禿44例，重度斑禿18例。對(duì)照組60例，男40例，女20例；年齡20～66歲，平均（43.9±1.5）歲；病程3～56個(gè)月，平均（28.5±2.6）個(gè)月；分型：?jiǎn)伟l(fā)斑片34例，多發(fā)斑片26例；嚴(yán)重程度：輕度斑禿40例，重度斑禿19例。兩組患者的一般資料對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

符合《中國(guó)斑禿診療指南(2019)》[5]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，通過詳細(xì)詢問病情經(jīng)過、治療史、家族史及既往病史等確診，斑禿嚴(yán)重程度分類：S0：無脫毛；S1：脫毛面積小于整個(gè)頭部的25%；S2：脫毛面積占整個(gè)頭部的35%～49%；S3：脫毛面積占整個(gè)頭部的50%～74%；S4：脫毛面積占整個(gè)頭部的75%～99%；S5：整個(gè)頭部毛發(fā)100%脫落。其中S0～S2為輕度斑禿，S3～S5為重度斑禿。

1.3 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者。（2）患者在研究前1個(gè)月以及研究期間未用其他治療方法的患者。（3）患者均有良好言語表達(dá)能力，可嚴(yán)格遵循醫(yī)囑。（4）患者均簽署知情同意書并且了解本次研究的目的。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）皮膚鏡下出現(xiàn)硬皮并及紅斑狼瘡等瘢痕性脫發(fā)患者。（2）局部存在細(xì)菌感染的患者。（3）合并嚴(yán)重心腦血管疾病及造血系統(tǒng)疾病的患者。（4）對(duì)所用藥物存在過敏反應(yīng)的患者。（5）妊娠期或者哺乳期女性。

1.4 方 法

1.4.1 儀器與藥物

復(fù)方甘草酸苷片（日本秋山片劑株式會(huì)社，批準(zhǔn)文號(hào)J20130077，規(guī)格25mg*10s*10板）；5%米諾地爾酊（浙江萬晟藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20040714，規(guī)格60ml：3.0g*1瓶）；納晶導(dǎo)入儀與納晶微針（型號(hào)5DL-G，蘇州納通生物納米技術(shù)有效公司）。

1.4.2 治療方法

兩組患者在治療前均進(jìn)行心理疏導(dǎo)及健康宣教，提高患者對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)及緩解患者負(fù)性情緒，使患者能夠在樂觀積極心態(tài)下迎接治療，且囑咐患者規(guī)律作息、清淡飲食、戒煙戒酒等，避免使脫發(fā)情況加重。

對(duì)兩組患者均給予口服復(fù)方甘草酸苷片，2～3片/次，3次/d。在5%米諾地爾酊用藥上，對(duì)照組采取外用方式，具體依據(jù)脫發(fā)面積單次噴藥量2噴/4cm2,2次/d，噴藥后指腹按摩3～5min。實(shí)驗(yàn)組在5%米諾地爾酊用藥上則是經(jīng)納晶微針導(dǎo)入，基本操作如下：先使用酒精對(duì)脫發(fā)區(qū)域進(jìn)行消毒處理，然后應(yīng)用適量5%米諾地爾酊噴灑至脫發(fā)部位并且均勻進(jìn)行涂抹，將納米晶片垂直于頭皮表面，借助點(diǎn)提法進(jìn)行上下點(diǎn)提，覆蓋所有毛發(fā)區(qū)后重復(fù)一次以上操作，1周/次。在導(dǎo)入當(dāng)天不需要外用藥物，告知患者用藥后24h避免洗頭，其余6d的5%米諾地爾酊為對(duì)照組外用藥物的方式。

兩組患者均以4周作為一個(gè)療程，均進(jìn)行3個(gè)療程的治療。

1.5 觀察指標(biāo)

（1）根據(jù)SALT評(píng)分評(píng)價(jià)兩組患者治療效果[6]。評(píng)分具體如下：A0：未有新生毳毛；A1：脫發(fā)區(qū)可見1%～24%新生毳毛；A2：脫發(fā)區(qū)可見25%～49%新生毳毛；A3：脫發(fā)區(qū)可見50%～74%新生毳毛；A4：脫發(fā)區(qū)可見75%～99%新生毳毛；A5：脫發(fā)區(qū)可見100%新生毳毛。A0～A2為無效，A3～A5為有效。治療有效率=有效/總數(shù)×100%。（2）治療前后均采集患者5ml的空腹肘靜脈血液并置入抗凝試管，經(jīng)3000r/min的離心速度持續(xù)離心15min，分離血清，采取ELISA法檢測(cè)血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-4（IL-4）與白細(xì)胞介素-10（IL-10）含量，相關(guān)檢測(cè)均嚴(yán)格參照試劑盒說明書進(jìn)行。（3）治療前后采取RT-PCR法檢測(cè)VEGF、毛囊Fas及FasL mRNA表達(dá)，檢測(cè)中所用試劑盒與引物均購自上海生工技術(shù)有限公司。（4）觀察在治療期間兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況，評(píng)價(jià)治療安全性。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS21.0軟件做統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果分析，計(jì)量資料用（±s）表示，使用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，使用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組治療效果

在對(duì)各組患者的治療效果上，實(shí)驗(yàn)組在治療有效率上明顯比對(duì)照組更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者治療效果比較

2.2 血清炎癥因子

治療前兩組血清TNF-α、IL-4與L-10水平比較無顯著差異（P＞0.05），而治療后兩組血清TNF-α降低，其實(shí)驗(yàn)組顯著低于對(duì)照組，IL-4、IL-10治療后較治療前提高，且實(shí)驗(yàn)組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），見表2。

2.3 兩組 血清VEGF、毛囊Fas 及FasL 水平

兩組治療前VEGF、毛囊Fas及FasL水平比較無顯著差異（P＞0.05），治療后VEGF均提高，實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組，治療后Fas、FasL表達(dá)低于治療前，且實(shí)驗(yàn)組低于對(duì)照組（P＜0.05），見表3。

2.4 不良反應(yīng)

對(duì)照組發(fā)生2例（3.33%）輕度瘙癢，患者可耐受并可繼續(xù)治療，實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)1例頭皮輕度脫屑及1例輕微刺痛，總發(fā)生率3.23%，均可耐受并在休息后自行緩解。對(duì)比兩組患者不良反應(yīng)總發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

斑禿屬于常見的一種皮膚系統(tǒng)疾病，典型特征是毛發(fā)脫落，這嚴(yán)重影響患者外觀，降低患者生活質(zhì)量[7]。關(guān)于斑禿的病機(jī)尚不完全，相關(guān)研究表明自身免疫反應(yīng)、血清VEGF表達(dá)與毛囊中相關(guān)因子表達(dá)同疾病發(fā)病存在密切關(guān)聯(lián)。斑禿患者因T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)免疫細(xì)胞大量分泌炎癥因子，導(dǎo)致外周血TNF-α水平明顯升高，IL-4、IL-10水平明顯降低，同時(shí)毛囊角質(zhì)細(xì)胞也異常分化，使得毛囊Fas及FasL呈現(xiàn)高表達(dá)，F(xiàn)as、FasL是一對(duì)與細(xì)胞凋亡過程密切相關(guān)的分子，斑禿的毛囊角質(zhì)細(xì)胞中 Fas/FasL 表達(dá)會(huì)誘導(dǎo)角質(zhì)細(xì)胞發(fā)生凋亡，進(jìn)而造成局部毛囊發(fā)生損傷[8-10]。因此在對(duì)斑禿的治療上，采取合理方式調(diào)節(jié)VEGF水平并且降低毛囊Fas及FasL表達(dá)水平是關(guān)鍵。

斑禿治療上，常用復(fù)方甘草酸苷聯(lián)合5%米諾地爾的治療方式，其中復(fù)方甘草酸苷是一種甘草酸苷為主，輔以半胱氨酸、甘氨酸所合成的一種復(fù)方制劑，在進(jìn)入到人體后，甘草酸苷能夠被分解成甘草次酸，發(fā)揮較強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)及抗補(bǔ)體活性作用，目前將該藥物廣泛的使用于各種皮膚炎癥疾病的治療中[11]。藥理研究表明，復(fù)方甘草酸苷可讓患者血清中的IL-4、IL-10水平提高，降低TNF-α水平水平，這樣可達(dá)到良好治療效果[12]。米諾地爾可促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)，當(dāng)前認(rèn)為藥物促進(jìn)毛發(fā)再生機(jī)制可能有以下幾點(diǎn)：第一，激發(fā)毛囊上皮細(xì)胞；第二，刺激血管增多及使局部血供豐富；第三，開放鉀離子通道；第四，使毛囊從休止期轉(zhuǎn)變?yōu)樯L(zhǎng)期。而米諾地爾在給藥上常是采取外用藥物的方式，這種方式下的藥物利用率較低，這使得治療效果往往不理想，主要是表皮角質(zhì)層具有屏障保護(hù)功能，外用藥物使得很多藥物有形成分無法有效通過屏障，這使得藥效降低[13]。而為了提高外用藥物通過表皮的幾率則衍生出多種方式，其中納晶微針導(dǎo)入就是有效方式，該方式屬于新興透皮促滲技術(shù)，針頭部分主要材料為高純度單晶硅，當(dāng)晶片作用于頭皮時(shí)刻在數(shù)秒內(nèi)就在頭皮上打開上百個(gè)給藥通道，提高水溶性藥物的透皮滲透性，使藥物輕松的被吸收，應(yīng)用納晶微針治療斑禿，在增加藥物透皮效果的同時(shí)也可作用于皮膚創(chuàng)傷修復(fù)，刺激皮膚大量釋放促進(jìn)局部修復(fù)再生的表皮生長(zhǎng)因子，促進(jìn)毛發(fā)再生[14-15]。本次研究中，結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組治療有效率顯著高于對(duì)照組；實(shí)驗(yàn)組治療后血清炎癥因子改善較對(duì)照組顯著；實(shí)驗(yàn)組治療后VEGF水平提高，毛囊Fas及FasL表達(dá)降低均較對(duì)照組顯著，兩組不良反應(yīng)總發(fā)生率無顯著差異，這提示納晶微針導(dǎo)入的輔助給藥方法治療斑禿的效果滿意，同時(shí)治療安全性也高。

表2 治療前后兩組患者血清炎癥因子水平比較(±s，ng/L)

表2 治療前后兩組患者血清炎癥因子水平比較(±s，ng/L)

注：與本組治療前相比，*P ＜0.05。

表3 治療前后兩組患者VEGF、Fas 及FasL 指標(biāo)水平變化比較(±s，%)

表3 治療前后兩組患者VEGF、Fas 及FasL 指標(biāo)水平變化比較(±s，%)

注：與本組治療前相比，*P ＜0.05。

綜上所述，在斑禿的治療上，經(jīng)納晶微針導(dǎo)入5%米諾地爾聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷的治療方式，可取得滿意的效果，改善血清炎癥因子水平，提高VEGF水平及降低毛囊相關(guān)因子的表達(dá)，促進(jìn)毛皮再生，且治療期間不良反應(yīng)發(fā)生率較低，值得推廣。