亞硒酸鈉不同施用方法對水稻硒富集及轉(zhuǎn)化的影響

黃太慶，江澤普，邢 穎，廖 青，梁潘霞，劉永賢，潘麗萍，陳錦平

(廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所，廣西 南寧 530007)

【研究意義】硒是人體必需的微量營養(yǎng)元素，全球有5～10億人每日硒攝入量不足[1]。根據(jù)《中國居民膳食營養(yǎng)素參考攝入量(2013版)》推薦，我國正常成人硒攝入量為60.0 μg/d，而實(shí)際平均攝入量僅44.6 μg/d，61.1 %地區(qū)居民的膳食硒攝入量不足，44.4 %地區(qū)居民的硒攝入量低于人體生理需求量[2]。已有研究認(rèn)為，植物是人體攝取硒的最主要來源，土壤全硒含量低或硒有效性低均會引發(fā)植物缺硒[3]。大米是多數(shù)中國人的主食，其含硒量對國人的硒攝入具有重要影響。在天然條件下稻米的硒含量較低，目前普遍通過施用外源硒來提高稻米硒含量，但至今對外源硒在水稻籽粒中由無機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒的了解較少。因此，開展外源硒不同施用方法對水稻硒富集及轉(zhuǎn)化影響研究，對利用外源硒生產(chǎn)安全的富硒稻谷具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】施用外源硒極易提高作物硒含量，是作物硒素營養(yǎng)強(qiáng)化的重要手段，也是提高低硒地區(qū)國民硒素營養(yǎng)水平的有效措施[4-6]，但長期過量攝入硒會引起硒中毒，且從硒缺乏到硒中毒的間距極窄。岳士忠等[7]總結(jié)我國富硒大米生產(chǎn)情況及富硒效應(yīng)，認(rèn)為施用外源硒生產(chǎn)的大米只有39 %符合富硒稻谷標(biāo)準(zhǔn)，在施用無機(jī)硒條件下，有60 %樣本的硒含量超過富硒稻谷標(biāo)準(zhǔn)。因此，施用外源硒的生物強(qiáng)化技術(shù)通常容易引起人們對富硒農(nóng)產(chǎn)品硒含量超標(biāo)的安全擔(dān)憂。在生產(chǎn)中土壤條件、硒肥種類、硒肥施用方式及施用時期等多種因素均會影響植物對外源硒的吸收[8]。黃太慶等[9]研究發(fā)現(xiàn)，在抽穗期噴施含硒葉面肥的水稻對外源硒的利用率高于在孕穗時施用。Ali等[10]研究認(rèn)為，作物對外源硒酸鹽的利用率高于對亞硒酸鹽的利用率，且施用硒酸鹽更容易引發(fā)植物中毒。黃太慶等[11]研究表明，亞硒酸鹽與不同有機(jī)物料配施對水稻外源硒利用率的影響存在差異。有機(jī)硒在植物體內(nèi)的運(yùn)轉(zhuǎn)效率高于無機(jī)硒，當(dāng)外源硒進(jìn)入植物體后會迅速轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒形態(tài)[12-13]，但當(dāng)植物吸收無機(jī)硒較多時，其無機(jī)硒占比也較高。一般認(rèn)為有機(jī)硒對人體的毒性遠(yuǎn)低于無機(jī)硒，因此有機(jī)硒含量高的食物其食用安全性更高[14-16]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】目前，針對水稻硒素營養(yǎng)的研究主要集中在硒的生理轉(zhuǎn)化和外源硒調(diào)控等方面，關(guān)于不同外源亞硒酸鹽調(diào)控方法下水稻硒富集特征差異的系統(tǒng)研究鮮見報道?！緮M解決的關(guān)鍵問題】在水稻移栽至抽穗的不同時期基施或葉面噴施亞硒酸鈉，比較不同硒肥施用方法下的水稻硒含量及有機(jī)硒含量占比，為利用外源硒生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)富硒稻谷提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2017年7-11月在廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院本部農(nóng)場大棚內(nèi)進(jìn)行。盆栽土壤采自廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)農(nóng)場水稻田，其基本理化性質(zhì)為：有機(jī)質(zhì)含量26.8 g/kg，全氮含量1.5 g/kg，全磷含量1.3 g/kg，全鉀含量13.9 g/kg，全硒含量0.34 mg/kg，pH 6.3。試驗(yàn)用有機(jī)肥(桂林桂珠生物科技有限公司)基本理化性質(zhì)為：有機(jī)質(zhì)含量450.0 g/kg，全氮含量35.0 g/kg，全磷含量10.0 g/kg，全鉀含量13.0 g/kg，pH 5.8。添加的外源硒為亞硒酸鈉(Na2SeO3,山東西亞試劑公司，分析純98.0 %，硒含量≥44.7 %)。盆栽種植常規(guī)秈稻品種為桂育9號。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計

設(shè)10個盆栽處理，分別為亞硒酸鈉基施(BF處理)、分蘗期葉面噴施(LT處理)、拔節(jié)期葉面噴施(LJ處理)、抽穗前葉面噴施(LH處理)、基施+拔節(jié)期葉面噴施(BF+LJ處理)、基施+抽穗前葉面噴施(BF+LH處理)、分蘗期葉面噴施+拔節(jié)期葉面噴施(LT+LJ處理)、分蘗期葉面噴施+抽穗前葉面噴施(LT+LH處理)和拔節(jié)期葉面噴施+抽穗前葉面噴施(LJ+LH處理)，以不施用亞硒酸鈉為對照(CK)。每處理重復(fù)4次。其中將拔節(jié)前的營養(yǎng)生長期定為水稻生長前期，拔節(jié)開始后的生殖生長期定為水稻生長后期。各處理外源硒用量見表1。

先將采集的土壤晾干、粉碎、過2 mm篩后裝入直徑30 cm、高22 cm的塑料盆中，裝土量8.0 kg/盆。水稻移栽前，使每盆保持水層1～2 cm，將土壤浸泡10 d以上，后加入基肥，攪拌均勻，沉淀12 h后移栽水稻。水稻進(jìn)行常規(guī)育秧，秧齡為20 d，每盆種植2穴，每穴2苗。盆栽進(jìn)行常規(guī)管理：基肥為復(fù)合肥(15-15-15)0.25 g/kg土，有機(jī)肥為1.25 g/kg土；移栽后10 d第1次追肥，追施尿素0.09 g/kg土；孕穗期進(jìn)行第2次追肥，追施尿素0.04 g/kg土和氯化鉀0.06 g/kg土；在水稻分蘗后期曬田7～10 d控制無效分蘗，其余時間保持水層3～4 cm；統(tǒng)一防控病蟲害。作基肥施用的外源硒，在移栽水稻前先溶解，再按試驗(yàn)方案添加到土壤中，并混合均勻；作葉面噴施的外源硒，先配制成溶液，再按不同處理在不同生育期均勻噴施水稻葉片。

表1 盆栽水稻亞硒酸鈉施用時期及用量

1.3 樣品采集

1.3.1 樣品采集與制備 水稻成熟后，采收并統(tǒng)計水稻有效穗數(shù)、結(jié)實(shí)率、千粒重、籽粒產(chǎn)量、根干重和莖葉干重等產(chǎn)量性狀數(shù)據(jù)。籽粒樣品：剪下每個有效穗并脫粒，用水選法分離實(shí)粒和空癟粒，曬干后分別稱重，利用礱谷機(jī)將全部稻谷脫去穎殼，得到糙米；稱取20.0 g糙米，用精米機(jī)打成精米；將空癟粒與谷殼混勻，視為谷殼；糙米、精米和谷殼稱重后分別用粉碎機(jī)粉碎，分別制成糙米、精米和谷殼樣品。稻稈樣品：地上部稻稈和脫粒后的穗枝用自來水沖洗數(shù)遍后再用去離子水沖洗1遍，烘干后稱重，粉碎制備成稻稈樣品。稻根樣品：水稻收獲后，將盆栽土風(fēng)干、粉碎，篩選出全部根系，用自來水沖洗附著的土壤，再用去離子水沖洗1遍，烘干后稱重，粉碎制備成稻根樣品。

1.3.2 植物全硒含量測定 稱取以上制備好的各樣品0.3000 g至微波消解管中，加入8.0 mL濃硝酸，在120 ℃電爐下預(yù)消解30 min后轉(zhuǎn)移到微波消解爐中，消解條件：在10 min內(nèi)將功率從0升至800 W；在800 W保持5 min；再在10 min內(nèi)將功率提高至1400 W，保持20 min；冷卻至60 ℃后，取出樣品。從微波消解爐中取出的樣品還需在120 ℃電爐上趕酸至液體體積剩2.0 mL，加入5.0 mL 1∶1鹽酸溶液后再消煮15 min。之后把消煮液轉(zhuǎn)移至50.0 mL容量瓶中，用水定容。搖勻后用原子熒光光度計(吉天AFS-8330)測定全硒含量。

1.3.3 有機(jī)硒含量測定 有機(jī)硒含量參考GB 5009.93-2010 《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中硒的測定》和GB 1903.21-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品營養(yǎng)強(qiáng)化劑 富硒酵母》稍作改進(jìn)后進(jìn)行測定。以總硒含量減去無機(jī)硒含量，得到有機(jī)硒含量。無機(jī)硒含量測定步驟：稱取精米樣品2.000 g于50.0 mL三角瓶，加入20.0 mL 1∶1 HCl水溶液，磁力攪拌5 min，再超聲溶解30 min后定容至50.0 mL容量瓶，離心，吸取澄清濾液10.0 mL于50.0 mL消煮管，加5.0 mL混合酸(硝酸∶高氯酸=4∶1)，在185 ℃電爐上消煮至溶液剩約2.0 mL，冷卻，加5.0 mL 1∶1 HCl后再煮10 min，后定容于25.0 mL容量瓶，用原子熒光光度計(吉天 AFS-8330)測定無機(jī)硒含量。

有機(jī)硒含量占比( %)=(樣品全硒含量-樣品無機(jī)硒含量)/全硒含量×100

外源硒綜合利用率( %)=(外源硒處理各部位硒累積量-CK對應(yīng)部位的硒累積量)/外源硒施用總量×100

1.4 統(tǒng)計分析

采用Excel 2007進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)整理和圖表制作，以SPSS 22.0進(jìn)行統(tǒng)計分析，用LSD法對各樣本平均數(shù)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 亞硒酸鈉不同施用方法對水稻產(chǎn)量性狀的影響

由表2可知，施用亞硒酸鈉各處理的水稻籽粒產(chǎn)量均低于CK，但差異不顯著(P>0.05，下同)，其中BF、BF+LJ和BF+LH處理的籽粒產(chǎn)量降幅較明顯，分別降低14.0 %、13.8 %和13.6 %，說明基施亞硒酸鈉對水稻產(chǎn)量具有一定的負(fù)面影響；CK的籽粒產(chǎn)量最高，主要得益于其有效穗數(shù)最高和結(jié)實(shí)率較高，其中，有效穗數(shù)分別顯著高于BF、LT、BF+LJ、LT+LJ和LT+LH處理21.2 %、19.3 %、28.0 %、19.3 %和19.3 %(P<0.05，下同)。各處理結(jié)實(shí)率排序?yàn)長T+LJ>LT>LT+LH>BF+LJ>CK>LJ>BF>BF+LH>LJ+LH>LH，其中LT+LJ、LT、LT+LH和BF+LJ處理的結(jié)實(shí)率分別較CK高1.9 %、1.4 %、0.5 %和0.2 %，LJ、BF、BF+LH、LJ+LH和LH處理的結(jié)實(shí)率分別較CK低1.9 %、2.7 %、2.7 %、3.1 %和3.5 %；在千粒重方面，LT+LH處理最高，且顯著高于除LJ處理外的其他處理，其他處理間差異不顯著；早期施用亞硒酸鈉(BF、LT和LJ處理)的水稻根干重較低，且顯著低于CK；LJ+LH和LJ處理的地上部生物量高于CK，但差異不顯著，其他處理的地上部生物量均低于CK，但差異不顯著?？梢姡煌瑏單徕c施用方法對水稻產(chǎn)量及部分產(chǎn)量性狀(如有效穗和結(jié)實(shí)率等)產(chǎn)生一定的消極影響。

表2 亞硒酸鈉不同施用方法下的盆栽水稻產(chǎn)量性狀比較

2.2 亞硒酸鈉不同施用方法下硒在水稻植株內(nèi)的分布特征

從圖1-A可看出，亞硒酸鈉處理的水稻根系硒含量均高于CK(5.8 %～61.5 %)。其中，亞硒酸鈉基施處理(BF+LH、BF和BF+LJ)顯著高于除LT+LH和LJ+LH處理外的其他處理；LT+LH和LJ+LH處理顯著高于CK，其他處理與CK差異不顯著。說明施用亞硒酸鈉能明顯提高水稻根系的硒含量，且基施的提高幅度大于葉面噴施方式。

從圖1-B可看出，LT處理稻稈的硒含量最低，較CK降低12.9 %，但差異不顯著，其他亞硒酸鈉處理均能提高稻稈的硒含量，提高幅度為32.2 %～528.6 %。其中，LJ、LH、BF+LJ、BF+LH、LT+LJ、LJ+LH和LT+LH處理的稻稈硒含量均顯著高于CK，尤其在抽穗前期噴施處理(如LJ+LH、BF+LJ和LT+LH)的稻稈硒含量更高；在葉面噴施1次亞硒酸鈉的處理(LT、LJ和LH)中，LH處理的稻稈硒含量顯著高于LJ處理，LJ處理顯著高于LT處理；在葉面噴施2次的處理(LT+LJ、LT+LH和LJ+LH)中，LJ+LH處理的稻桿硒含量顯著高于LT+LH處理，且二者均顯著高于LT+LJ處理；各處理稻稈硒含量排序?yàn)長J+LH > BF+LH > LT+LH > BF+LJ > LT+LJ > LH > LJ > BF > CK > LT。說明在水稻生長后期葉面噴施亞硒酸鈉越遲越有利于提高稻稈硒含量，而在水稻生育期早期(分蘗期)葉面噴施亞硒酸鈉對提高稻稈硒含量的作用有限。

從圖1-C可看出，亞硒酸鈉處理的糙米硒含量均高于CK(55.3 %～569.7 %)。其中，除LT處理的糙米硒含量高于CK外，其他各處理的糙米硒含量排序與稻稈的硒含量排序相似；在葉面噴施1次的處理中，LH與LJ處理差異不顯著，但二者均顯著高于LT處理；在基肥+葉面噴施處理中，BF+LH處理顯著高于BF+LJ處理；在葉面噴施2次的處理中，LJ+LH處理顯著高于LT+LH和LT+LJ處理，而LT+LH與LT+LJ處理差異不顯著。說明施用亞硒酸鈉能有效提高水稻糙米硒含量，且在水稻生長后期葉面噴施越遲，對提高糙米硒含量的效果越佳。

從圖1-D可看出，在抽穗前葉面噴施亞硒酸鈉(LH、BF+LH、LT+LH和LJ+LH處理)的谷殼硒含量顯著高于其他處理；其他處理中，除LT+LJ處理顯著高于LT處理和CK外，CK、BF、LT、LJ和BF+LJ處理間的的谷殼硒含量差異不顯著。說明在抽穗前葉面噴施亞硝酸鈉可使谷殼積累更多的硒。結(jié)合硒在水稻其他部位中的含量狀況分析發(fā)現(xiàn)，葉面噴施亞硝酸鈉水稻糙米硒含量與谷殼硒含量的相關(guān)性不如與稻稈硒含量的相關(guān)性密切，推測谷殼中的硒很難通過水稻果皮和種皮直接轉(zhuǎn)移至稻谷中。

綜上所述，不同的亞硒酸鈉施用方法對水稻各部位硒含量的影響不同，在水稻生長早期(如分蘗期)葉面噴施會降低水稻某些部位的硒含量，而基施或水稻生長后期葉面噴施均能提高水稻各部位硒含量。具體而言，亞硒酸鈉基施對提高水稻根系硒含量的幅度高于葉面噴施；在水稻生長前期(分蘗期)葉面噴施亞硒酸鈉處理的稻桿、糙米和谷殼的硒含量低于亞硒酸鈉基施處理，而在水稻生長后期葉面噴施亞硒酸鈉處理的稻桿、糙米和谷殼的硒含量高于亞硒酸鈉基施處理(LJ處理的谷殼硒含量除外)，且在水稻生長后期葉面噴施越遲，各部位的硒含量越高。

2.3 亞硒酸鈉不同施用方法對水稻精米硒含量及其有機(jī)硒含量占比的影響

從圖2可看出，施用亞硒酸鈉均能提高水稻精米的硒含量。其中，LJ+LH處理精米的硒含量最高(0.58 mg/kg)，且顯著高于除BF+LH處理外的其他處理；LT處理精米的硒含量最低(0.14 mg/kg)，僅略高于CK處理(0.10 mg/kg)，但均顯著低于其他亞硒酸鈉處理；葉面噴施2次亞硒酸鈉處理的精米硒含量高于噴施1次的處理；在施用1次亞硒酸鈉的處理中，LH處理的精米硒含量最高，且顯著高于LJ、BF和LT處理，而LJ處理略高于BF處理，但二者間差異不顯著；在施用2次亞硒酸鈉的處理中，LJ+LH處理的精米硒含量最高，其次為BF+LH處理，二者顯著高于LT+LH和LT+LJ處理，但與BF+LJ處理差異不顯著，LT+LH、LT+LJ和BF+LJ處理間差異也不顯著。考慮到亞硒酸鈉基施的用量遠(yuǎn)高于葉面噴施量，說明亞硒酸鈉葉面噴施方式對水稻精米的富硒效應(yīng)優(yōu)于基施方式，且在水稻生長后期葉面噴施越遲，精米的硒含量提高幅度就越大。

從圖2還可看出，CK的精米有機(jī)硒占比最高，達(dá)95.0 %；各亞硒酸鈉基施處理(BF、BF+LJ和BF+LH)的精米有機(jī)硒含量占比次之，分別為84.0 %、81.0 %和76.0 %，其中BF處理的精米有機(jī)硒占比顯著高于BF+LH處理；葉面噴施亞硒酸鈉處理(LT、LJ、LH、LT+LJ、LT+LH和LJ+LH)精米的有機(jī)硒含量占比較低，在60.0 %～71.0 %，且顯著低于CK和基施處理；在水稻生長后期葉面噴施越遲，精米的有機(jī)硒含量占比越低；葉面噴施2次亞硝酸鈉的精米有機(jī)硒含量占比低于葉面噴施1次的精米有機(jī)硒含量占比?？梢姡┯脕單徕c會降低水稻精米的有機(jī)硒含量占比，而在水稻生長后期施用越遲降低越明顯。

2.4 成熟期水稻對外源硒的綜合利用率

由表3可知，在水稻生長后期(拔節(jié)期或抽穗前)葉面噴施亞硝酸鈉處理(LJ、LH、LT+LJ、LT+LH和LJ+LH)的水稻植株對外源硒的綜合利用率最高，為35.81 %～79.61 %，顯著高于其他處理；其次為亞硒酸鈉基施+葉面噴施處理(BF+LJ和BF+LH)，水稻植株對外源硒的綜合利用率為15.34 %～20.57 %，顯著高于BF處理；BF處理對外源硒的綜合利用率較低，僅2.92 %；而LT處理水稻植株對外源硒的綜合利用率為負(fù)值(-4.65 %)，說明其植株硒的累積量少于CK的累積量，可能是某部位的生物量或硒含量低于CK所引起?？梢?，亞硒酸鈉不同施用方法的水稻外源硒利用率存在差異。

從表3還可看出，亞硒酸鈉不同施用方法的稻根對外源硒的綜合利用率均較低(-0.50 %～0.57 %)，其中LJ+LH和LT+LH處理的外源硒利用率較高，分別為0.48 %和0.57 %，高于亞硒酸鈉基施處理(BF、BF+LJ和BF+LH)，顯著高于LT和LJ處理。說明葉面噴施2次亞硒酸鈉的稻根對外源硒的利用率高于噴施1次處理，基施處理的稻根外源硒利用率介于二者之間。

在抽穗前進(jìn)行葉面噴施處理(LJ+LH、LH和LT+LH)的稻稈外源硒綜合利用率均在45.00 %以上，且顯著高于其他處理；LJ和LT+LJ處理稻稈的硒綜合利用率較高，為29.41 %和30.17 %，二者均顯著高于亞硒酸鈉基施(BF+LH、BF+LJ和BF處理)和僅分蘗期葉面噴施1次的處理(LT)；基施+葉面噴施處理(BF+LJ和BF+LH)的稻稈外源硒綜合利用率為12.85 %～16.12 %，顯著高于BF和LT處理；LT處理的稻稈外源硒綜合利用率為負(fù)值，且顯著低于其他處理。說明亞硒酸鈉施用方法不同會造成水稻對外源硒的綜合利用率存在明顯差異，而在水稻生長后期葉面噴施亞硒酸鈉其莖稈對外源硒的綜合利用率高于基施處理和在生長前期葉面噴施處理。

表3 亞硒酸鈉不同施用方法對水稻各部位硒綜合利用率的影響

從表3還可看出，抽穗前葉面噴施1次或配合其他生長期葉面噴施2次亞硒酸鈉處理的水稻籽粒外源硒綜合利用率較高，為10.39 %～18.32 %，顯著高于除LJ處理外的其他處理；LJ和LT+LJ處理的籽粒外源硒綜合利用率次之，分別為6.75 %和5.96 %，顯著高于BF+LJ、BF和LT處理；亞硒酸鈉基施+葉面噴施處理(BF+LJ和BF+LH)的外源硒綜合利用率為2.26 %～4.25 %，其中BF+LH處理顯著高于BF和LT處理；BF和LT處理的籽粒外源硒綜合利用率僅分別為1.34 %和1.00 %，顯著低于除BF+LJ處理外的其他處理。說明在水稻生長后期施用外源硒越遲，成熟期水稻籽粒對外源硒的綜合利用率越高。

3 討 論

Zhang等[17]研究表明，亞硒酸鈉土施能顯著提高水稻籽粒產(chǎn)量，而遲鳳琴等[18]研究顯示，葉面噴施外源硒酸鈉或亞硒酸鈉可顯著提高水稻籽粒產(chǎn)量，土施不能提高水稻籽粒產(chǎn)量。張銘誠等[19]研究認(rèn)為，土施和葉面噴施硒酸鈉對水稻產(chǎn)量均無顯著影響，但葉面噴施的產(chǎn)量略低于CK，土施的產(chǎn)量略高于CK。本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果存在差異，與黃太慶等[20]的研究結(jié)果一致。本研究發(fā)現(xiàn)，以不同方法施用亞硒酸鈉的水稻產(chǎn)量均有不同程度降低，對提高水稻有效穗數(shù)、結(jié)實(shí)率、根系和莖葉生物量的作用更明顯，并表現(xiàn)出基施或在水稻生長早期施用對有效穗數(shù)和水稻根系影響較大、葉面噴施(尤其在水稻生長后期噴施)對結(jié)實(shí)率和地上部生物量影響較大的趨勢，可能與根系生長對硒在根部累積較敏感及水稻生長后期施用硒肥影響水稻的營養(yǎng)過程有關(guān)?？梢?，外源硒對水稻生長的影響程度可能還取決于土壤條件、農(nóng)田管理措施和外源硒類型等。

本研究中，施用亞硒酸鈉可明顯影響水稻各部位的硒含量，與Chilimba等[21]、Deng等[22]的研究結(jié)果相似；亞硒酸鈉不同施用方法也影響硒在水稻植株內(nèi)的累積和分布，其中，在水稻生長后期施用等量亞硒酸鈉水稻各部位的硒含量均高于在水稻生長前期施用，與Chilimba等[21]、Govasmark等[23]、穆婷婷等[24]、Winkel等[25]的研究結(jié)果相似。此外，葉面噴施亞硒酸鈉水稻成熟期根系的全硒含量高于CK，說明水稻葉片吸收的硒可通過植物組織運(yùn)輸?shù)礁浚康奈赡芤苑置谖镄问脚懦鲋参矬w進(jìn)入土壤，與Dinh等[26]的研究結(jié)果一致。因此，在水稻生長早期施用外源硒會經(jīng)代謝揮發(fā)、轉(zhuǎn)移及植物凋零流失而降低硒在水稻植株內(nèi)的累積量。

植物根系及葉片均能吸收硒，但外源硒不同施用方法會導(dǎo)致硒在植物體內(nèi)的轉(zhuǎn)移過程及富集部位存在差異。本研究結(jié)果顯示，基施亞硒酸鈉水稻根系的硒含量高于葉面噴施水稻根系，而葉面噴施亞硒酸鈉水稻的地上部硒含量顯著高于基施水稻根系，說明進(jìn)入植物體內(nèi)的硒通過轉(zhuǎn)移、轉(zhuǎn)化后才在各組織中累積。黃太慶等[11]研究顯示，土施亞硒酸鹽水稻根系的硒含量顯著高于其他部位。陳錦平等[27]研究表明，植物從根系吸收硒時，硒酸鹽最容易轉(zhuǎn)移到地上部累積，其次為有機(jī)態(tài)硒，亞硒酸鹽較難轉(zhuǎn)移。目前對植物葉片吸收硒元素后硒在植物體內(nèi)各組織間轉(zhuǎn)移機(jī)制的了解甚少，但無論葉面噴施硒酸鹽還是亞硒酸鹽，硒均主要累積于地上部[28]。

一般而言，無機(jī)硒對人體的毒性高于有機(jī)硒，植物吸收的無機(jī)硒大部分會轉(zhuǎn)化為硒代胱氨酸(SeCys)或硒代蛋氨酸(SeMet)[29]，并以有機(jī)硒形態(tài)在植物體內(nèi)累積。本研究中，施用外源硒均可不同程度降低有機(jī)硒在稻米中的含量占比，但外源亞硒酸鈉土施處理的稻米有機(jī)硒含量占比顯著高于葉面噴施處理，在水稻生長早期葉面噴施處理的稻米有機(jī)硒含量占比高于生長后期噴施處理，原因是植物根部吸收的四價硒，大部分需在根部轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒才能轉(zhuǎn)移至植物地上部，而當(dāng)葉面噴施硒肥時，植物地上部直接吸收、轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)移無機(jī)態(tài)硒[27]，未完成有機(jī)轉(zhuǎn)化。此外，無機(jī)硒在水稻植株內(nèi)的轉(zhuǎn)化是一個需要時間的過程，當(dāng)葉面噴施亞硒酸鈉時，越早噴施其轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒的比例自然就越高。

硒是一種稀缺有益資源，但人體長期攝入過量的硒同樣會影響身體健康。硒肥因未被作物吸收而殘留于環(huán)境中，長此以往不僅浪費(fèi)寶貴的硒資源，還可能給環(huán)境帶來潛在風(fēng)險。因此，施用外源硒時有必要評估作物對硒的綜合利用率。Deng等[22]研究表明，葉面噴施亞硒酸鈉水稻植株的硒綜合利用率為22.90 %～36.50 %，糙米的硒綜合利用率為3.80 %～9.90 %；葉面噴施亞硒酸鈉時，水稻植株的硒綜合利用率為33.40 %～56.90 %，糙米的硒綜合利用率為7.10 %～20.80 %。Jiang等[30]研究顯示，蕎麥葉面噴施亞硒酸鈉其籽粒的硒綜合利用率不超過3.00 %，土施亞硒酸鈉其籽粒的硒綜合利用率不超過2.00 %。黃太慶等[11，20]研究發(fā)現(xiàn)，水稻土施外源硒時其全株對硒肥的綜合利用不超過5.00 %，籽粒的硒綜合利用率不超過1.50 %。可見，不同的外源硒形態(tài)和施用方法對硒的綜合利用率均具有極大影響。本研究中，在水稻生長后期葉面噴施亞硒酸鈉其外源硒的綜合利用率高于全部基施處理，應(yīng)與基施處理?xiàng)l件下施入土壤的亞硒酸鈉受到土壤礦物質(zhì)、膠體等物質(zhì)的吸附固定而變?yōu)闊o效態(tài)硒不能為水稻吸收利用有關(guān)；而葉面噴施的硒只經(jīng)歷氧化還原、揮發(fā)或凝結(jié)等過程，其有效態(tài)硒含量占比較高，會更多地被水稻吸收和累積；且越早葉面噴施其綜合利用率越低，原因可能是葉面噴施的硒發(fā)生揮發(fā)、老葉凋零、根系分泌等作用而流失；在分蘗期葉面噴施亞硝酸鈉的水稻出現(xiàn)硒綜合利用率為負(fù)值現(xiàn)象，說明在水稻生長早期葉面噴施亞硒酸鈉可能影響其根系從土壤中吸收硒或稻株生長消耗了硒，導(dǎo)致在水稻某部位的硒含量或生物量低于CK，使得施用亞硝酸鈉的水稻植株硒總累積量低于CK，提示外源硒綜合利用率不能完全真實(shí)反映作物對外源硒的利用狀況，外源硒綜合利用率的計算方法可能存在缺陷，今后應(yīng)加強(qiáng)利用硒同位素技術(shù)對硒肥轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)化過程的研究。

4 結(jié) 論

盆栽優(yōu)質(zhì)常規(guī)稻施用亞硒酸鈉的稻谷精米有機(jī)硒含量占比排序?yàn)榛?基施+葉面噴施>葉面噴施，外源硒綜合利用率排序?yàn)樗旧L后期葉面噴施>基施+葉面噴施>基施>水稻生長前期葉面噴施。因此，基施+葉面噴施亞硒酸鈉的外源硒施用方式在保障稻米較高有機(jī)硒含量占比的同時，能提高水稻對硒的綜合利用率，可在富硒水稻生產(chǎn)上推廣應(yīng)用。