養(yǎng)豬場非洲豬瘟變異株監(jiān)測技術(shù)指南

1 非洲豬瘟變異株的定義

非洲豬瘟變異株包括基因缺失株、自然變異株、自然弱毒株等，與2018 年傳入的非洲豬瘟毒株相比，該類毒株的基因組序列、致病力等發(fā)生了明顯變化。生豬感染該類毒株后，潛伏期延長，臨床表現(xiàn)輕微，后期可出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、皮膚出血型壞死灶，感染母豬產(chǎn)仔性能下降、死淘率增高，出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎等。與傳統(tǒng)的流行毒株相比，生豬感染該類毒株后排毒滴度低、間歇性排毒，早期難以發(fā)現(xiàn)。

2 監(jiān)測方法

2.1 加強(qiáng)臨床巡視 時刻關(guān)注豬場各個環(huán)節(jié)豬只異常情況，想方設(shè)法提升飼養(yǎng)人員責(zé)任心，一旦發(fā)現(xiàn)豬只出現(xiàn)嗜睡、輕觸不起、采食量減少，發(fā)熱、皮膚發(fā)紅、關(guān)節(jié)腫脹或壞死、咳喘、腹式呼吸，育肥豬死淘率增高，母豬流產(chǎn)或出現(xiàn)死胎、木乃伊胎等可疑臨床表現(xiàn)時，應(yīng)第一時間采樣檢測。

2.2 改進(jìn)主動監(jiān)測 每周對豬群進(jìn)行病原和抗體檢測。在豬群進(jìn)行疫苗接種、轉(zhuǎn)群、去勢，或母豬分娩后，應(yīng)進(jìn)行采樣檢測。豬場出現(xiàn)風(fēng)險暴露或周邊豬場出現(xiàn)感染時，按需進(jìn)行采樣檢測。

2.3 抽樣策略 對可疑豬的同舍和關(guān)聯(lián)舍豬群，采集深部咽拭子和抗凝血進(jìn)行病原檢測，必要時采集血清進(jìn)行抗體檢測。對可疑豬及臨近豬接觸的地面、欄桿，以及舍內(nèi)人員接觸的物品等，采集環(huán)境樣品進(jìn)行病原檢測。病原檢測如果混檢，建議混樣數(shù)量不超過5 個；抗體檢測不得混樣。

2.4 樣品選擇 對可疑豬，按檢出概率高低排序，依次采集深部咽拭子、淋巴結(jié)（微創(chuàng)采集）、前腔靜脈抗凝血（EDTA）或尾根血、口鼻拭子。

對分娩母豬，應(yīng)采集臍帶血、胎衣；對死胎和流產(chǎn)胎兒，應(yīng)采集淋巴結(jié)、脾臟等組織樣品。

對病死豬，優(yōu)選采集部位為淋巴結(jié)、脾臟、骨髓和肺臟。

血清樣本，按常規(guī)方法制備。

3 檢測方法

3.1 病原檢測方法 采用非洲豬瘟病毒（P72/CD2v/MGF）三重?zé)晒釶CR 方法檢測核酸，詳見“農(nóng)辦牧〔2020〕39號”附件《非洲豬瘟病毒流行株與基因缺失株鑒別檢測規(guī)范》。必要時可測序鑒別。

3.2 抗體檢測方法 采用間接ELISA、阻斷ELISA等方法檢測抗體水平，詳見《非洲豬瘟診斷技術(shù)》（GB/T 18648）?！?/p>