影響銀杏葉多糖提取因素的研究

（銅仁職業(yè)技術(shù)學(xué)院 貴州 554300）

引言

從目前情況來(lái)看，對(duì)銀杏的開發(fā)而得到的提取物是一種天然植物制劑。銀杏葉的活性包括多種，最為主要的就是黃酮類以及多糖類物質(zhì)，其表現(xiàn)功效是有抗氧化等。比如說，其可以對(duì)各個(gè)器官或者是中樞神經(jīng)起到一定的保護(hù)作用，另外，對(duì)于腫瘤還有其他疾病也有治療效果。目前很多資料表明，GBLP具有生物學(xué)功能、藥物功能，所以說對(duì)其開發(fā)潛力巨大。在多糖的提取中，方法是多樣的，我們最常見到的就是蒸餾法、超聲提取等。超聲提取主要是通過高頻次的振動(dòng)對(duì)細(xì)胞組織破壞，這種方法效率非常高。酶提取方法也是常見的一種，這種方法主要是通過酶反應(yīng)進(jìn)行提取有效物質(zhì)。糖類物質(zhì)的分子質(zhì)量大，因此不能使用一般的方法。同時(shí)，多糖的生物活性和分子質(zhì)量、基數(shù)等因素相關(guān)。

1.銀杏多糖概述

銀杏葉多糖主要是從其葉片、果和外種皮中提取而得。目前植物多糖已被大量應(yīng)用在保健食品和化妝品等行業(yè)中，以銀杏多糖為代表，因其特有的藥理作用如：抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、降血脂等。銀杏葉多糖，是從干燥銀杏葉片中提取出的多糖物質(zhì)，最常用的提取方法為水提醇沉法，對(duì)酶解法提取銀杏葉多糖進(jìn)行了初步研究，這次主要采取的是纖維素酶法結(jié)合的方法，首先需要銀杏葉粉10克，將其按照1:15加入到蒸餾水中，容器含量不能少于250mL。50℃恒溫振蕩2h后，加入0.5%纖維素酶（以銀杏粉重量為準(zhǔn)），同時(shí)，還需要調(diào)節(jié)pH值，大概在4.5，將其酶解50min，將剩余的藥渣再放入50mL的蒸餾水中，這種方法可以多次使用，從而提取溶液。提取后再進(jìn)行乙醇沉淀，得銀杏葉多糖，其提取率為1.67%，并證實(shí)纖維素酶法與水提法比較，提取量更高。

對(duì)于銀杏葉多糖的提取，最主要的是采取超聲波方法，這種方法主要是采用810瓦的功率，用超聲將其處理20min，再添加0.75%的纖維素酶，沉淀冷凍干燥后得銀杏葉粗多糖，其提取率為12.2%。影響銀杏葉多糖提取率的主要因素有：破碎粒度、料液比、溫度、提取時(shí)間、超聲功率、酶用量和提取次數(shù)等。使用不同的提取方法，銀杏葉多糖含量也不盡相同。如果使用水提醇沉法，得到的多糖和含量為12.58%，5.69%；如果使用酶法，水體醇沉法得到的含量則為14.12%和6.82%；使用微波-水提沉法得到的含量為13.31%和6.15%。GBLP也有一定的抗腫瘤效果，將它和其他抗腫瘤藥物進(jìn)行比較，GBLP是沒有副作用的，還可以改善肌體的新陳代謝和增強(qiáng)自身的免疫力。GBLP和它的溶液還可以對(duì)肝臟進(jìn)行排毒，也有抗氧化及抗炎的作用。

2.影響銀杏葉多糖提取相關(guān)性因素

(1)時(shí)間因素

圖1 時(shí)間的影響

在多糖的提取中，被浸提取物和提取的料液還沒有達(dá)到平衡之前，如果時(shí)間越長(zhǎng)，其產(chǎn)率也會(huì)隨之上升。換句話說，就是在料液相同的情況下，如果被浸時(shí)間越長(zhǎng)，GBLP的產(chǎn)率也就會(huì)隨之增加。在進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，可以將時(shí)間進(jìn)行設(shè)定，可以設(shè)置為1h、2h等，然后再對(duì)GBLP的濃度進(jìn)行提取。我們由圖1可以發(fā)現(xiàn)，被浸時(shí)間從1h到3h，GBLP的濃度剛開始在300.75微克到471.55微克，產(chǎn)率明顯增加；在后期的3h到4h之間，產(chǎn)率也是增加。我們可以得出，在3h階段，提取的多糖是最佳時(shí)間。

(2)溫度因素

我們知道，在熱作用下，分子的運(yùn)動(dòng)也會(huì)不斷的加速，從而使細(xì)胞內(nèi)的多糖浸出。另外，熱作用會(huì)使銀杏葉細(xì)胞壁的組織破壞掉，這樣也會(huì)使多糖更容易浸出。在本次的試驗(yàn)中，相關(guān)人員可以將溫度設(shè)定為70℃、80℃，以此類推。可以觀察圖2，隨著溫度的不斷上升，銀杏葉多糖的產(chǎn)量也在不斷的上升，在70℃上升至80℃時(shí)，銀杏葉多糖的產(chǎn)量由319.32微克上升到450.02微克，GBLP產(chǎn)率明顯增加。在溫度為80℃到90℃時(shí)，產(chǎn)率增加了4.54%，從90℃到100℃時(shí)，濃度則會(huì)逐步下降，此項(xiàng)研究我們可以知道，在溫度為80℃時(shí)，GBLP是最佳溫度。

圖2 溫度的影響

(3)料液因素

在此次研究中，料液設(shè)定為1:10、1:20等，提取到的多糖濃度見圖3，料液在1:10到1:30的時(shí)候，銀杏葉多糖的濃度從341.6微克增加到了376.75微克，可以看出得出的濃度明顯提升，這主要是由于隨著料液濃度的增加，銀杏葉細(xì)胞內(nèi)的多糖濃度差就越大，得到的多糖也就越多。當(dāng)料液在1:30到1:40的時(shí)候，多糖濃度也是增加的，但是此次增加的比較少，產(chǎn)率只增加了2.18%。這次研究可以得出，料液濃度在1:30的時(shí)候，GBLP的產(chǎn)率會(huì)比較高。

圖3 料液比的影響

圖4 破碎程度的影響

3.結(jié)論

綜上，本次研究分析中，銀杏葉的料液配比應(yīng)設(shè)置到1:30，溫度應(yīng)該設(shè)置到80℃，銀杏葉的破碎程度應(yīng)該設(shè)置到80目，將提取時(shí)間設(shè)置為3h，提取次數(shù)為兩次，采取水提醇沉法工藝，用活性炭對(duì)銀杏葉多糖進(jìn)行純化，此方法可以得到更多的GBLP產(chǎn)率。這種方法實(shí)用性強(qiáng)且安全率更高，同時(shí)也適用于大規(guī)模的生產(chǎn)，希望本次研究可以對(duì)銀杏葉多糖提取起到一定的借鑒，從而促使整個(gè)行業(yè)的健康發(fā)展。