張新憲,王亮
山西農(nóng)業(yè)大學(xué)(山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院)農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮研究所(太原 030031)
馬鈴薯是四大糧食作物之一,營養(yǎng)物質(zhì)豐富,產(chǎn)量大,有“地下蘋果”的美譽[1],是我國大部分地區(qū)的優(yōu)勢經(jīng)濟(jì)作物。山西地處黃土高原,晝夜溫差大,光照充足,是農(nóng)業(yè)部確定的馬鈴薯優(yōu)勢產(chǎn)區(qū)之一,擁有眾多優(yōu)質(zhì)馬鈴薯資源。由于馬鈴薯屬于糧菜兼用的季節(jié)性農(nóng)產(chǎn)品,收獲時間相對集中且產(chǎn)量極大,僅依靠市場鮮食需求與深加工來解決馬鈴薯供給矛盾是非常困難的。通過適宜的貯藏,不僅可以調(diào)節(jié)市場供應(yīng),還可以提高馬鈴薯的經(jīng)濟(jì)價值,因此對馬鈴薯收獲后進(jìn)行貯藏保鮮尤為重要。然而馬鈴薯在貯藏期間仍繼續(xù)進(jìn)行著各種生理活動,貯藏溫度不當(dāng)容易提高發(fā)芽、失重、腐爛等[2]問題發(fā)生的頻率,導(dǎo)致貯藏品質(zhì)下降,嚴(yán)重影響馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。因此,研究馬鈴薯在貯藏期間的品質(zhì)變化,并篩選出適合馬鈴薯貯藏的溫度是實際生產(chǎn)中亟待解決的關(guān)鍵問題。
目前國內(nèi)外學(xué)者對馬鈴薯的休眠萌發(fā)機理[3-4]、種質(zhì)資源多樣性[5-6]、深加工[7]、品種選育[8]等方面的研究均取得豐碩的成果,然而對不同貯藏溫度條件下晉薯貯藏效果的研究仍鮮見報道。因此,試驗以山西旱地栽培的晉薯16號為材料,研究不同貯藏溫度對馬鈴薯貯藏期間主要營養(yǎng)物質(zhì)、生理特性指標(biāo)及相關(guān)酶活性的影響,以期為晉薯貯藏條件優(yōu)化提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。
晉薯16號,山西省嵐縣;PE保鮮袋(厚0.03 mm,規(guī)格為65 cm×70 cm的桶狀),山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮研究所。
過氧化物酶(POD)測定試劑盒,南京建成生物工程研究所有限公司;硫代巴比妥酸,上海展云化工有限公司;3,5-二硝基水楊酸(DNS),上??曝S實業(yè)有限公司;三氯乙酸,上海宏瑞化工有限公司;氫氧化鈉、草酸等所有使用化學(xué)試劑均為分析純。
恒溫冷庫,山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮研究所;Ultrospec 2000紫外-可見分光光度計,英國Pharmacia Biotech公司;Allegra X-30R低溫離心機,美國貝克曼庫爾特有限公司;CP224S電子天平,德國賽多利斯有限公司。
挑選無病蟲害、無機械傷的馬鈴薯裝入襯有PE保鮮袋的塑料周轉(zhuǎn)箱中,每箱15 kg,隨機均勻分為4組,每組3個重復(fù),分別置于2,4,6和20 ℃的恒溫冷庫中貯藏。自貯藏之日起,每30 d取樣1次測定各項指標(biāo)。
1.4.1 失重率、腐爛率、發(fā)芽率的測定
失重率參照文獻(xiàn)[9]、腐爛率參照文獻(xiàn)[10]、發(fā)芽率參照文獻(xiàn)[11]的方法進(jìn)行測定。
1.4.2 還原糖含量的測定
參照文獻(xiàn)[12]的方法進(jìn)行測定。
1.4.3 淀粉含量的測定
參照文獻(xiàn)[13]的方法進(jìn)行測定。
1.4.4 丙二醛(MDA)含量測定
參照文獻(xiàn)[9]的方法進(jìn)行測定。
1.4.5 過氧化物酶(POD)活性測定
采用過氧化物酶(POD)測定試劑盒測定。
1.4.6 多酚氧化酶(PPO)活性測定
參照文獻(xiàn)[14]的方法進(jìn)行測定。
1.4.7 淀粉酶活性測定
參照文獻(xiàn)[7]的方法進(jìn)行測定。
各試驗數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)測定后的平均值,采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和繪圖,并計算標(biāo)準(zhǔn)誤差(±SE)。采用Excel 2010進(jìn)行顯著性差異分析。
溫度是影響馬鈴薯貯藏品質(zhì)的重要因素[15-16]。如圖1~圖3所示,不同貯藏溫度條件下隨著貯藏時間的延長,馬鈴薯發(fā)芽率、失重率及腐爛率均呈逐漸上升趨勢。貯藏60 d時,2和4 ℃條件下馬鈴薯尚未發(fā)芽,6 ℃條件下發(fā)芽率為6.68%,而20 ℃條件貯藏發(fā)芽率已達(dá)100%。貯藏至150 d時,2,4,6和20 ℃條件下馬鈴薯發(fā)芽率、失重率及腐爛率分別為:10.06%,4.39%和1.22%;25.54%,6.06%和1.9%;32.82%,9.49%和5.16%;100%,25.11%和15.3%。上述結(jié)果表明,2 ℃貯藏馬鈴薯可使發(fā)芽率、失重率與腐爛率均處于較低水平,與4,6和20 ℃處理相比,2 ℃貯藏對維持馬鈴薯商品屬性有較好的效果。Janave等[17]對馬鈴薯貯藏的研究也表明低溫貯藏能夠有效降低腐爛率、失重率,抑制出芽。
如圖4所示,不同貯藏溫度條件下馬鈴薯還原糖含量呈先上升后下降的趨勢。馬鈴薯貯藏30 d時,2,4和6 ℃條件下還原糖含量小幅上升,貯藏至90 d時還原糖含量達(dá)到最大,與初始值相比分別增加了173%,144%和132%,顯著高于20 ℃條件下的馬鈴薯(p<0.05,56%)。這是由于馬鈴薯在低溫貯藏會發(fā)生“低溫糖化”效應(yīng),使淀粉大量向還原糖轉(zhuǎn)化,還原糖含量大幅升高,隨著貯藏時間的延長,馬鈴薯呼吸作用及營養(yǎng)代謝活動消耗部分還原糖,導(dǎo)致其含量降低[18]。貯藏至150 d時,2,4,6和20 ℃條件下,還原糖含量分別為0.81%,0.67%,0.61%和0.39%。上述結(jié)果表明,貯藏溫度是影響馬鈴薯還原糖含量的主要原因,2 ℃貯藏能夠減少還原糖的消耗,使還原糖含量保持在一個較高水平。
圖1 貯藏溫度對馬鈴薯發(fā)芽率的影響
圖2 貯藏溫度對馬鈴薯失重率的影響
圖3 貯藏溫度對馬鈴薯腐爛率的影響
圖4 貯藏溫度對馬鈴薯還原糖含量的影響
淀粉是馬鈴薯主要營養(yǎng)物質(zhì),淀粉含量的變化情況可以反映馬鈴薯品質(zhì)的變化。如圖5所示,不同貯藏溫度條件下馬鈴薯淀粉含量呈下降趨勢,且貯藏溫度越高,淀粉含量下降越快。但貯藏至60 d時,4 ℃貯藏的馬鈴薯淀粉含量高于2 ℃條件的馬鈴薯。這是由于2 ℃貯藏馬鈴薯時受低溫影響,出現(xiàn)“低溫糖化”現(xiàn)象。貯藏期間淀粉和還原糖之間可相互轉(zhuǎn)化,但是總體來說馬鈴薯在貯藏期間是淀粉含量逐漸減少的過程,當(dāng)貯藏溫度小于4 ℃時淀粉大量轉(zhuǎn)化還原糖的現(xiàn)象尤其明顯[19]。貯藏結(jié)束時,2,4和6 ℃馬鈴薯淀粉含量分別為初始值的73.49%,77.63%和70.33%,顯著高于20 ℃貯藏的馬鈴薯(p<0.05,60%);因此,4種貯藏溫度條件下馬鈴薯淀粉含量從高到低分別為4,2,6和20 ℃。
圖5 貯藏溫度對馬鈴薯淀粉含量的影響
MDA是膜脂氧化作用的主要產(chǎn)物之一,在細(xì)胞內(nèi)的積累可作為果蔬衰老與膜傷害的標(biāo)志[20]。如圖6所示,貯藏至150 d時,在2和4 ℃條件下馬鈴薯MDA增長幅度較為平緩,兩者M(jìn)DA含量與初始值相比分別增加35.44%和68.96%;而在6和20 ℃條件下貯藏90 d,MDA含量急劇上升,在150 d時MDA含量達(dá)到10.82和15.68 mmol/g,與初始值相比分別增加107.27%和200.38%。不同貯藏溫度條件下MDA含量增加幅度為20 ℃>6 ℃>4 ℃>2 ℃。結(jié)果說明2 ℃貯藏馬鈴薯能夠抑制MDA含量的迅速上升,從而減輕其對細(xì)胞膜的損傷。
圖6 貯藏溫度對馬鈴薯丙二醛含量的影響
POD是吲哚乙酸的側(cè)鏈氧化酶,其活性與吲哚乙酸含量呈反比關(guān)系,是調(diào)控馬鈴薯芽體萌發(fā)的關(guān)鍵酶[21]。如圖7所示,在整個貯藏期間,馬鈴薯POD活性呈先上升后下降的趨勢,且貯藏溫度越低,POD活性越高,各處理均在90 d時酶活性達(dá)到最大值。在2,4,6和20 ℃條件下貯藏馬鈴薯90 d,POD活性與初始值相比分別升高82.33%,73.45%,50.43%和35.97%,POD升高幅度表現(xiàn)為2 ℃>4 ℃>6 ℃>20 ℃。貯藏90 d后POD活性呈下降趨勢,在150 d,2 ℃貯藏馬鈴薯時POD活性顯著高于其他處理(p<0.05)。上述結(jié)果表明,將馬鈴薯貯藏于2 ℃可提高POD活性,對延緩馬鈴薯芽體的萌發(fā)有一定效果。
圖7 貯藏溫度對馬鈴薯塊莖POD活性的影響
PPO是將酚類物質(zhì)氧化成醌的關(guān)鍵酶[22],其活性水平與馬鈴薯褐變程度密切相關(guān)[23-24]。如圖8所示,在整個貯藏期間,不同貯藏溫度條件下馬鈴薯的PPO活性整體呈先上升后下降的趨勢。貯藏90 d時,20 ℃條件下馬鈴薯PPO活性達(dá)到最大值26.57 U,是初始值的2.77倍,增加較明顯。而此時2,4和6 ℃條件下的PPO活性分別為12.79,13.67和14.76 U,與初始值相比分別升高33.64%,42.84%和54.23%,PPO活性雖有小幅增加,但是增幅相對平緩,與20 ℃處理組相比差異顯著(p<0.05)。這是由于低溫抑制了酶的活性[25]。Li等[26]在鮮切馬鈴薯的研究中發(fā)現(xiàn)抑制PPO活性可以減輕馬鈴薯褐變程度。因此,馬鈴薯在2,4和6 ℃條件下貯藏其機體內(nèi)的PPO活性均能維持在較低水平,但是2 ℃與其他溫度處理相比,PPO活性更低,對抑制馬鈴薯的褐變更加有利。
淀粉酶是降解淀粉的主要酶[27]。如圖9所示,2 ℃貯藏30 d時,受“低溫糖化”作用影響[29],淀粉酶的活性顯著高于其它3組(p<0.05),30 d后淀粉酶活性逐漸下降,貯藏120 d時有上升趨勢,但整個貯藏期淀粉酶活性變化較為平緩;4和6 ℃條件下,淀粉酶活性在0~90 d變化相對平緩,隨后酶活性大幅升高,貯藏至150 d時淀粉酶活性與初始值相比分別提高154%和181%。20 ℃貯藏條件下淀粉酶活性呈先上升后下降的趨勢,90 d時酶活性達(dá)到最大值83.1 U,是初始值的3.56倍,隨著貯藏時間的延長,淀粉酶活性逐漸降低。以上結(jié)果表明:2 ℃條件能使淀粉酶在貯藏期維持在相對穩(wěn)定水平,有利于馬鈴薯的長期貯藏。
圖8 貯藏溫度對馬鈴薯PPO活性的影響
圖9 貯藏溫度對馬鈴薯淀粉酶活性的影響
以晉薯16號為試材,研究不同貯藏溫度下馬鈴薯貯藏期品質(zhì)及氧化酶活性的變化。結(jié)果表明,2 ℃條件可有效抑制馬鈴薯發(fā)芽率、失重率及腐爛率的升高,能維持淀粉含量保持在較高水平。雖然在低溫條件下貯藏會導(dǎo)致馬鈴薯還原糖含量上升,但是加工薯可在加工前進(jìn)行適當(dāng)回溫處理從而降低還原糖含量。2 ℃貯藏能夠降低MDA的積累,且能使POD活性維持在一個較高水平,同時抑制馬鈴薯PPO、淀粉酶活性的上升,有效保持晉薯16號的商品價值和食用價值,也為今后晉薯的合理貯藏提供了理論依據(jù)。