30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑高效液相色譜分析方法

朱 峰，吳 瓊，廖國(guó)會(huì)，陳湘燕，秦立新，于寧波，陳明貴，陳才俊*

（1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，貴陽550009；2.貴州省農(nóng)藥檢定管理所，貴陽550001）

甲酰胺基嘧磺隆通用名稱為foramsulfuron，化學(xué)名稱為1-(4,6-二甲氧基嘧啶-2基)-3-[2-(二甲基氨基甲?；?-5-甲酰胺基苯基磺?；鵠脲，由拜耳公司于2002年開發(fā)的磺酰脲類除草劑[1]，主要用于玉米等谷物雜草防除，對(duì)一年生或多年生禾本科和闊葉雜草的防治效果顯著[2-3]。甲酰胺基嘧磺隆登記的產(chǎn)品總共有2個(gè)，其中包括1個(gè)可分散油懸浮劑及1個(gè)原藥，當(dāng)前沒有公開發(fā)表的分析方法。新研發(fā)的30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑也沒有相應(yīng)的分析方法。此外，目前尚無相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，各地藥檢機(jī)構(gòu)不能進(jìn)行有效的監(jiān)管，檢測(cè)機(jī)構(gòu)沒有相應(yīng)的方法來進(jìn)行檢測(cè)。因此，開展甲酰胺基嘧磺隆農(nóng)藥產(chǎn)品中分析方法的研究，可為標(biāo)準(zhǔn)的制定提供數(shù)據(jù)參考。

當(dāng)前，有文獻(xiàn)報(bào)道了采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的方法對(duì)甲酰胺基嘧磺隆的殘留進(jìn)行分析[4]，尚無甲酰胺基嘧磺隆產(chǎn)品中有效成分分析方法的報(bào)道。高效液相色譜法廣泛用于農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量的檢測(cè)分析，具有良好的分離和定量效果[5]。因此，本文采用高效液相色譜法對(duì)甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑的含量進(jìn)行分析，所建立的分析方法具有較好的分離效果，同時(shí)具有較好的準(zhǔn)確度和精密度，能夠滿足甲酰胺基嘧磺隆定量分析的要求，可為甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑質(zhì)量控制和該產(chǎn)品分析方法標(biāo)準(zhǔn)的建立提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器設(shè)備

Agilent HPLC 1260高效液相色譜儀（可變波長(zhǎng)檢測(cè)器），安捷倫科技（中國(guó)）有限公司；AS5150A超聲波清洗器，天津奧特賽恩斯儀器有限公司；XSR105十萬分之一電子天平，梅特勒-托利多國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司；0.45μm濾膜。

1.2 試劑

甲醇（色譜純）；超純水；磷酸（分析純）；磷酸溶液：Ψ（磷酸∶水）＝5∶1 000；甲酰胺基嘧磺隆標(biāo)樣：已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)，ω≥98.0%；甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑。以上試劑均由國(guó)家農(nóng)藥質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心提供。

1.3 色譜操作條件

色譜柱：250 mm×4.6 mm（i.d.）不銹鋼柱，內(nèi)裝Agilent 5 TC C18、5μm填充物（或具有同等效果的色譜柱）；流動(dòng)相：Ψ（甲醇∶磷酸溶液）＝50∶50，經(jīng)濾膜過濾，并進(jìn)行脫氣；柱溫：30℃（±2℃）；檢測(cè)波長(zhǎng)：232 nm；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣體積：5μL。

在上述色譜操作條件下，甲酰胺基嘧磺隆保留時(shí)間約13.0 min（圖1、2）。

圖1 甲酰胺基嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖

圖2 甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑高效液相色譜圖

1.4 溶液配制

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制

稱取0.02 g（精確至0.000 01 g）甲酰胺基嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品于100 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇，超聲波振蕩5 min，冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，搖勻。

1.4.2 試樣溶液的配制

稱取含0.02 g（精確至0.000 01 g）甲酰胺基嘧磺隆的試樣于100 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇，超聲波振蕩5 min，冷卻至室溫，用甲醇稀釋定容至刻度，搖勻，過膜。

1.5 測(cè)定方法

等待儀器穩(wěn)定之后，在所建立的色譜分析條件下，待相鄰2針樣品的峰面積變化小于1.2%后，按照標(biāo)準(zhǔn)品、樣品、標(biāo)準(zhǔn)品、樣品的順序進(jìn)樣檢測(cè)。

1.6 計(jì)算方法

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中甲酰胺基嘧磺隆峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中甲酰胺基嘧磺隆的質(zhì)量分?jǐn)?shù)按公式（1）計(jì)算。

式中：A1為甲酰胺基嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品峰面積的平均值，mAU·s；A2為試樣溶液中甲酰胺基嘧磺隆峰面積的平均值，mAU·s；m1為甲酰胺基嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量，g；m2為甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑質(zhì)量，g；P為試樣中甲酰胺基嘧磺隆的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；ω為甲酰胺基嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗(yàn)條件的選擇

甲酰胺基嘧磺隆的紫外光譜圖如圖3所示，從圖中可以看到甲酰胺基嘧磺隆在波長(zhǎng)約210～260 nm都有較好的吸收，在波長(zhǎng)232 nm處靈敏度較高，雜質(zhì)干擾較少，能夠滿足分析的要求，故將檢測(cè)波長(zhǎng)確定為232 nm。

圖3 甲酰胺基嘧磺隆的紫外吸收光譜圖

方法選擇常用的C18反相色譜柱，選擇甲醇作為溶劑，并以甲醇和磷酸溶液（甲醇∶磷酸溶液=1 000∶5）作為流動(dòng)相，所得的分離效果和峰形較好。將流動(dòng)相按不同比例在色譜柱上進(jìn)行試驗(yàn)，隨著甲醇比例的增加，保留時(shí)間減小，當(dāng)甲醇與磷酸溶液比例達(dá)到50∶50時(shí)，雜質(zhì)分離效果比較好，最終選擇Ψ（甲醇∶磷酸溶液）=50∶50作為流動(dòng)相，流速1.0 mL/min。該條件下，甲酰胺基嘧磺隆色譜峰峰形較好，與雜質(zhì)能完全分離，具有良好的精密度和準(zhǔn)確度，并且分析時(shí)間較短，提高了工作效率。

2.2 線性關(guān)系試驗(yàn)

按1.4.1標(biāo)樣溶液的制備方法，秤取0.05 g（精確至0.000 1g）標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解定容50 mL作為母液，將甲醇稀釋配制5個(gè)不同濃度的有效成分線性相關(guān)溶液，分別標(biāo)記為STD1至STD5。在上述操作條件下，待儀器穩(wěn)定后，按照STD1至STD5的順序測(cè)定每個(gè)溶液中甲酰胺基嘧磺隆的峰面積，取2次測(cè)定的平均結(jié)果。以甲酰胺基嘧磺隆質(zhì)量濃度和峰面積結(jié)果分別為橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表1、圖4。

由表1和圖4可見，當(dāng)甲酰胺基嘧磺隆質(zhì)量濃度在51.2～614.6 mg/L（進(jìn)樣體積為5μL），與相應(yīng)的甲酰胺基嘧磺隆峰面積之間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，計(jì)算得回歸方程為y=14.688x＋7.586 9，r=0.999 9，完全可以滿足定量分析要求。本方法中，甲酰胺基嘧磺隆標(biāo)樣質(zhì)量濃度為204.9 mg/L（進(jìn)樣體積為5μL）。

表1 甲酰胺基嘧磺隆線性范圍的測(cè)定

圖4 甲酰胺基嘧磺隆峰面積與質(zhì)量濃度關(guān)系圖

2.3 方法精密度試驗(yàn)

按1.4.2試樣溶液的制備方法配制5個(gè)30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑的精密度溶液，含量分別為：33.39%、33.72%、33.60%、33.06%、34.04%。5個(gè)重復(fù)樣品的平均值為33.56%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.36%，變異系數(shù)為1.09%。

2.4 方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)

稱取含0.01 g（精確至0.000 01 g）甲酰胺基嘧磺隆的30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑于100 mL容量瓶中，再加入甲酰胺基嘧磺隆標(biāo)樣0.01 g（精確至0.000 01 g），采用以上分析方法得到的甲酰胺基嘧磺隆的平均回收率為102.11%（表2）。

表2 分析方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié) 論

試驗(yàn)結(jié)果表明，利用所建立高效液相色譜分析方法對(duì)30%甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑進(jìn)行定量分析，該方法的平均回收率為102.11%，具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，線性關(guān)系良好，符合NY/T 2887—2016《農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量分析方法確認(rèn)指南》[6]要求，并且操作簡(jiǎn)便、快速，是甲酰胺基嘧磺隆水分散粒劑產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)的理想方法。