李紅 郭華偉 肖強(qiáng) 殷坤山 唐美君
關(guān)鍵詞茶尺蠖;產(chǎn)卵條;制作;灰茶尺蠖
在昆蟲大量飼養(yǎng)過程中,取卵是一項(xiàng)重要的技術(shù)環(huán)節(jié)。根據(jù)昆蟲的習(xí)性,用簡(jiǎn)便的方法獲得大量的卵是昆蟲大量飼養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵。產(chǎn)卵條制作就是一項(xiàng)實(shí)現(xiàn)昆蟲大量飼養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)。產(chǎn)卵條的制作雖然簡(jiǎn)單,但意義重大,在整個(gè)飼養(yǎng)過程中起著十分重要的作用。
茶尺蠖Ectropis obliqua Prout和灰茶尺蠖E.grisescens Warren是茶園發(fā)生最普遍的害蟲,是研究者最主要的研究對(duì)象。在各項(xiàng)研究過程中均需進(jìn)行茶尺蠖或灰茶尺蠖的大量飼養(yǎng)。用產(chǎn)卵紙條供其產(chǎn)卵不但取卵方便,而且還便于卵的冷藏存放,在茶尺蠖病毒生產(chǎn)過程中也十分有用。
過去鱗翅目昆蟲飼養(yǎng)常用瓦楞紙供其產(chǎn)卵,但茶尺蠖在瓦楞紙上產(chǎn)卵極少。前人對(duì)茶尺蠖產(chǎn)卵條已有報(bào)道,但在應(yīng)用時(shí)發(fā)現(xiàn),該產(chǎn)卵條產(chǎn)卵效果時(shí)好時(shí)壞。本研究對(duì)該產(chǎn)卵條作了改進(jìn),并進(jìn)行了對(duì)比試驗(yàn),找到一種產(chǎn)卵效果更佳的產(chǎn)卵條制作方法,并在茶尺蠖和灰茶尺蠖的飼養(yǎng)中應(yīng)用,效果很好。現(xiàn)將研究結(jié)果總結(jié)如下,為茶尺蠖和灰茶尺蠖的大量飼養(yǎng)提供依據(jù)。
1材料與方法
1.1供試蟲源
茶尺蠖為浙江余杭(119.90°E,30.39°N)種群,灰茶尺蠖為浙江樂清(121.08°E,28.36°N)種群,均為田間采集幼蟲在養(yǎng)蟲室用新鮮茶葉連續(xù)飼養(yǎng)多代的健康蟲種。飼養(yǎng)條件:溫度(23±1)℃;光周期L//D=12 h//12h;相對(duì)濕度75%~80%。
1.2產(chǎn)卵條
設(shè)計(jì)制作了4種產(chǎn)卵條,其中A為將紙片3次折疊,形成4層紙3條縫的產(chǎn)卵條;B為將紙片2次折疊,形成3層紙2條縫的產(chǎn)卵條;C為將紙片1次折疊,形成2層紙1條縫的產(chǎn)卵條(同參考文獻(xiàn)[4]);D為無縫的產(chǎn)卵條,做法是將產(chǎn)卵條B的兩條縫隙用膠水緊密粘合起來,自然晾干。
將A4打印紙先裁切成一定大小的小紙片,折疊后兩端用訂書機(jī)訂合,形成長(zhǎng)100mm、寬18mm的紙條。以B為例,先裁切成長(zhǎng)100minx寬54mm的紙片,折疊訂合后形成長(zhǎng)100mm×寬18mm的產(chǎn)卵條(圖1)。A和C的起始紙片大小分別為長(zhǎng)100mmx寬72mm、長(zhǎng)100mmx寬36mm,D的起始紙片大小同B。
1.3單一卵條的產(chǎn)卵試驗(yàn)
用同一批飼養(yǎng)的茶尺蠖成蟲進(jìn)行產(chǎn)卵試驗(yàn),將上述A、B、C、D4種產(chǎn)卵條分別放人500mL養(yǎng)蟲瓶中,每瓶中放人1個(gè)產(chǎn)卵條,接入1對(duì)剛羽化未交配的成蟲進(jìn)行配對(duì)產(chǎn)卵,瓶?jī)?nèi)放入一片茶葉保濕,用白紙和牛皮筋將瓶口封住。1個(gè)養(yǎng)蟲瓶為1個(gè)重復(fù),每處理9次重復(fù)。飼養(yǎng)條件為:(22.54±0.5)℃,L//c=10 h//14 h。3 d后取產(chǎn)卵條檢查記錄著卵量。
1.4不同產(chǎn)卵條的選擇性試驗(yàn)
在同一個(gè)養(yǎng)蟲瓶中放人2種不同產(chǎn)卵條,共設(shè)A+B、B+C、A+C 3種組合,每瓶接入2對(duì)剛羽化未交配的茶尺蠖成蟲進(jìn)行配對(duì)產(chǎn)卵試驗(yàn),瓶?jī)?nèi)放人1片茶葉保濕,用白紙和牛皮筋封住瓶口。1個(gè)養(yǎng)蟲瓶為1個(gè)重復(fù),每處理6次重復(fù)。飼養(yǎng)條件同1.3。3 d后取產(chǎn)卵條檢查記錄著卵量。
1.5產(chǎn)卵條B在茶尺蠖和灰茶尺蠖大量飼養(yǎng)中的應(yīng)用
茶尺蠖和灰茶尺蠖的大量飼養(yǎng):每批次50~100瓶,每瓶接入一對(duì)成蟲,并放置1~2個(gè)產(chǎn)卵條B取卵,以確保每批次的幼蟲數(shù)量達(dá)1~2萬頭。成蟲配對(duì)及飼養(yǎng)方法同1.3。每天定時(shí)取出有卵的產(chǎn)卵條,連續(xù)取3 d。將同一天取的卵條集中放置在同一個(gè)養(yǎng)蟲瓶中冷藏保存,每瓶保存25~30張卵條。成蟲產(chǎn)卵結(jié)束后,分別從不同時(shí)問點(diǎn)保存的卵條中抽取5張,茶尺蠖和灰茶尺蠖各取15張,檢查著卵量。
1.6卵量檢查及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
用醫(yī)用微型剪刀將卵條從卵塊附近的空白處剪開,并剪取有卵的紙片,卵塊朝上放在解剖鏡載物臺(tái)de,開啟透射燈,光線自下而上,透過紙片和卵粒進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。所得數(shù)據(jù)用DPS軟件進(jìn)行方差分析和多重比較。
2結(jié)果與分析
2.1單一產(chǎn)卵條的產(chǎn)卵試驗(yàn)
試驗(yàn)結(jié)果(表1)表明,產(chǎn)卵條制作方法不同,產(chǎn)卵效果有顯著差異(F=13.967,P=0)。供試的4種產(chǎn)卵條中產(chǎn)卵條B的著卵效果最好,與前人報(bào)道的產(chǎn)卵條相比,卵條上著卵量顯著增加,提高45.95%。產(chǎn)卵條A的縫隙雖有3個(gè),但卵條上著卵量與產(chǎn)卵條B相比略少,兩者沒有顯著差異。試驗(yàn)還表明,產(chǎn)卵條D著卵量非常少,成蟲將卵產(chǎn)于養(yǎng)蟲瓶中,卵條上沒有卵或只有極少的卵,可見縫隙對(duì)產(chǎn)卵的影響很大。
2.2不同產(chǎn)卵條的選擇性試驗(yàn)
在同一個(gè)養(yǎng)蟲瓶中放入2種不同產(chǎn)卵條,成蟲有明顯的選擇喜好(圖2)。B與C組合時(shí),成蟲偏好選擇B產(chǎn)卵條產(chǎn)卵,兩者產(chǎn)卵量有極顯著差異(F=65.382,P<0.01),B卵條上的著卵量占總卵量的94.5%;A與C組合時(shí),成蟲偏好選擇A產(chǎn)卵條產(chǎn)卵,兩者產(chǎn)卵量有極顯著差異(F=142.065,P<0.01);在A與B組合時(shí),則出現(xiàn)A、B上卵量約各占一半,兩者問無顯著差異(F=0.152,P=0.7046)。
選擇試驗(yàn)結(jié)果再次證明,產(chǎn)卵條B的產(chǎn)卵效果顯著優(yōu)于卵條C。同時(shí)在制作方法上,產(chǎn)卵條B比產(chǎn)卵條A簡(jiǎn)單。因此,產(chǎn)卵條B是產(chǎn)卵效果最好而且制作最簡(jiǎn)單的一種產(chǎn)卵條。
2.3產(chǎn)卵條B在茶尺蠖和灰茶尺蠖大量飼養(yǎng)中的應(yīng)用
上述產(chǎn)卵試驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)于茶尺蠖,產(chǎn)卵條B的應(yīng)用效果顯著優(yōu)于產(chǎn)卵條c和D,是篩選出的比較理想的產(chǎn)卵條??紤]到灰茶尺蠖和茶尺蠖為近緣種,外部形態(tài)和生活習(xí)性都十分近似,因此,將產(chǎn)卵條B也應(yīng)用到灰茶尺蠖的飼養(yǎng)中。抽樣調(diào)查結(jié)果顯示,茶尺蠖每張卵條的著卵量在112~389粒之問,平均為195.9粒;灰茶尺蠖每張卵條的著卵量在119~396粒之間,平均為225.4粒。說明改進(jìn)篩選出的產(chǎn)卵條B可適用于這2種尺蠖。
3結(jié)論與討論
產(chǎn)卵條的制作對(duì)于昆蟲大量飼養(yǎng)意義重大。昆蟲人工飼養(yǎng)中常需根據(jù)昆蟲習(xí)性選擇利于產(chǎn)卵和卵孵化的基質(zhì),滿足實(shí)際飼養(yǎng)需要。本研究根據(jù)茶尺蠖喜產(chǎn)卵于縫隙的習(xí)性,用普通A4打印紙制作了具有2條縫隙的產(chǎn)卵條,其著卵量高,且制作方法簡(jiǎn)單、成本低,可方便取卵和卵的冷藏等操作,對(duì)茶尺蠖和灰茶尺蠖大量飼養(yǎng)和茶尺蠖核型多角體病毒繁殖十分有益。
根據(jù)昆蟲的產(chǎn)卵習(xí)性制作產(chǎn)卵條可以取得好的產(chǎn)卵效果,否則會(huì)出現(xiàn)不產(chǎn)卵或極少產(chǎn)卵的情況。對(duì)茶尺蠖產(chǎn)卵行為的研究表明,成蟲產(chǎn)卵時(shí)會(huì)伸長(zhǎng)產(chǎn)卵器,尋找裂縫,將卵產(chǎn)于裂縫中。所以產(chǎn)卵條的縫隙對(duì)其成蟲產(chǎn)卵十分重要。如果沒有裂縫雖偶也會(huì)產(chǎn)卵,但卵量極少。縫隙太大或者太小都不利于產(chǎn)卵。上述試驗(yàn)結(jié)果也證實(shí)了這點(diǎn)。成蟲產(chǎn)卵器長(zhǎng)3.4~4.7mm,具有伸縮性,直徑0.5~0.6mm;卵長(zhǎng)徑約0.71mm,短徑約0.47mm。本研究制作的產(chǎn)卵條(即產(chǎn)卵條B)縫隙大小為0.5~1mm,與產(chǎn)卵器直徑基本吻合,成為成蟲最適合的產(chǎn)卵場(chǎng)所,同時(shí)由于兩邊各有一個(gè)縫隙,提供了可選擇場(chǎng)所,因此產(chǎn)卵量高。而過去的方法制作的產(chǎn)卵條(即產(chǎn)卵條c)常常出現(xiàn)縫隙過大(大于2mm)或過?。▋蓪蛹埦o密貼合)的情況,不利于成蟲產(chǎn)卵,這可能就是導(dǎo)致該產(chǎn)卵條產(chǎn)卵效果時(shí)好時(shí)壞的主要原因。
本產(chǎn)卵條不但具有制作簡(jiǎn)單且著卵量高的優(yōu)點(diǎn),還使得檢查卵量和卵孵化率準(zhǔn)確易行。本研究制作的產(chǎn)卵條裂縫大小合適,成蟲所產(chǎn)卵塊較薄,通常為1~2層卵(圖3),這樣使得卵量的檢查變得容易,提高了產(chǎn)卵量和存活率計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。而產(chǎn)在縫隙大的卵條(產(chǎn)卵條c)或養(yǎng)蟲瓶?jī)?nèi)的卵塊則是多層卵疊在一起(圖4),必須要用毛筆刷下或撥下卵粒才能進(jìn)行觀察,刷卵必會(huì)對(duì)卵粒有損傷,由撥、刷卵造成的死亡率至少為10%,影響試驗(yàn)的準(zhǔn)確性,誤差大。