二甲氧香酯對柑橘全爪螨的毒力測定及田間防效

郭富友 周紅 劉瑾林 馬曉峰 丁偉

關(guān)鍵詞二甲氧香酯;柑橘全爪螨;毒力;田間藥效

柑橘全爪螨Panonychus citri（McGregor）又稱柑橘紅蜘蛛，屬于蛛形綱蜱螨目葉螨科，是一種全球性害螨，是為害柑橘的主要害蟲之一，具有很強的繁殖力和適應(yīng)性，主要為害柑橘嫩葉。柑橘全爪螨主要集中在葉背刺吸汁液，造成葉片失綠，嚴(yán)重時可導(dǎo)致整株葉片發(fā)白，影響光合作用，甚至脫落，造成嚴(yán)重減產(chǎn)。目前化學(xué)防治是控制柑橘全爪螨的主要手段，然而由于農(nóng)藥的濫用，柑橘全爪螨已對多種化學(xué)殺螨劑產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗性。因此，迫切需要尋找靶標(biāo)新穎能有效控制害螨并對環(huán)境友好的綠色殺螨劑。

植物源殺螨活性物質(zhì)因具有低毒、選擇性高、環(huán)境相容性好、不易產(chǎn)生抗性等優(yōu)點，近年來成為研究的熱點。二甲氧香酯俗稱濱蒿內(nèi)酯（scoparone），化學(xué)名稱為6，7-二甲氧基香豆素，是一種香豆素類化合物，在植物界中含量豐富，具有止咳平喘、降血壓等藥理活性以及除草、抑菌等農(nóng)用生物活性。此外，章冰川等研究發(fā)現(xiàn)來源于茵陳蒿中的天然活性化合物二甲氧香酯具有良好的殺螨活性。但關(guān)于二甲氧香酯的作用機理尚不明確，滕贊等研究發(fā)現(xiàn)二甲氧香酯能影響豚鼠氣道平滑肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子（ASMCs[Ca2+]）水平。地膚Kochiascoparia和河朔蕘花Wikstroemia chained-aphne中植物源有效殺螨成分可能會破壞山楂葉螨細(xì)胞內(nèi)鈣離子平衡。這些研究表明影響細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平可能是天然活性物質(zhì)的作用機制之一。這也和本實驗室前期研究結(jié)果相一致（成果待發(fā)表）。

由此，本實驗室以二甲氧香酯為原藥研制出了5%二甲氧香酯EC制劑（專利申請?zhí)?01910058633.0），本試驗通過室內(nèi)毒力測定，明確了二甲氧香酯對柑橘全爪螨的毒力，然后進一步開展田間藥效試驗，評估了該藥劑對柑橘全爪螨的田間防效，并明確了其田間推薦使用劑量，為其產(chǎn)品登記及推廣應(yīng)用提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1供試螨類

柑橘全爪螨，采自重慶市北碚區(qū)歇馬鎮(zhèn)馮家槽柑橘園區(qū)，然后置于洗凈晾干的新鮮柑橘葉片上，恒溫培養(yǎng)箱（26±1）℃、RH：60%～80%、L//D=14h//10h飼養(yǎng)一代。

1.2供試藥劑

室內(nèi)毒力測定：98%二甲氧香酯原藥，南京源植生物科技有限公司;對照藥劑98%螺螨酯原藥，陜西美邦農(nóng)藥有限公司提供。

田間藥效試驗：5%二甲氧香酯乳油（EC），西南大學(xué)天然產(chǎn)物農(nóng)藥研究室提供;240g/L螺螨酯懸浮劑（SC），拜耳作物科學(xué)有限公司。

1.3試驗方法

1.3.1毒力測定

采用玻片浸漬法。分別稱取適量供試化合物，用少量丙酮溶解，再用含0.1%吐溫-80的水溶液稀釋配制成有效成分含量（下同）為2mg/mL的母液，體積不少于燒杯的1/3。在預(yù)試驗的基礎(chǔ)上，選用相對死亡率介于20%～80%的5～7個濃度進行毒力測定，以0.1%的吐溫-80水溶液為空白對照，每處理3個重復(fù)。選擇發(fā)育一致的柑橘全爪螨雌成螨作為受測對象，在顯微鏡下將螨均勻粘在貼有雙面膠的載玻片兩側(cè)，背部朝上，螨足可自由活動，每張玻片粘30頭，于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)飼養(yǎng)4 h后用雙目解剖鏡檢查，剔除不合格個體，并補至30頭。然后，將粘有螨的玻片在供試藥液中浸漬5s后取出，迅速吸去螨體周圍多余藥液，恒溫培養(yǎng)箱放置48h后檢查結(jié)果。用0號毛筆輕觸螨體，以其螯肢不動者為死亡。采用SAS9.4數(shù)據(jù)處理軟件求出毒力回歸方程、LC50及其95%置信區(qū)間。

1.3.2田間藥效試驗

1.3.2.1試驗地點及試驗設(shè)計

試驗地設(shè)在重慶市北碚區(qū)歇馬鎮(zhèn)馮家槽柑橘園區(qū)，該地土壤為沙壤土，排灌能力良好。土壤有機質(zhì)含量為1.4%，pH為6.9。生長過程中保證除處理因素外其他栽培條件一致。試驗設(shè)置6個處理，分別為5%二甲氧香酯EC 62.5、83.3、125 mg/kg，240g/L螺螨酯SC60mg/kg，以清水為對照。每處理有柑橘樹2株，設(shè)3次重復(fù)，共計18個小區(qū)。

1.3.2.2施藥及調(diào)查方法

按照田間藥效試驗方法于2019年4月23日上午進行田間試驗，當(dāng)柑橘全爪螨幼螨、若螨剛開始活動，平均每片葉片有2頭以上活螨時施藥，采用工農(nóng)-16型噴霧器將藥液均勻噴灑柑橘葉片正反面，噴液量750 L/hm2，以藥液不滴為準(zhǔn)，整個試驗過程只施藥一次。每小區(qū)在樹的東、西、南、北、中5個方位標(biāo)記嫩梢，手持放大鏡共調(diào)查25片葉片上的活動螨數(shù)量。施藥前調(diào)查蟲口基數(shù)，施藥后1、3、7、15 d各調(diào)查1次，分別計算各處理區(qū)防治效果。采用以下公式計算防效。

然后將數(shù)據(jù)先進行平方根的反正弦轉(zhuǎn)換，再利用軟件SPSS19.0對轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行方差分析，以Duncan氏新復(fù)極差法（DMRT）檢驗各處理防效問的差異顯著水平，最后將各反正弦平均數(shù)反轉(zhuǎn)換為百分?jǐn)?shù)作為防治效果。

2結(jié)果與分析

2.1室內(nèi)毒力測定

各處理對柑橘全爪螨雌成螨的室內(nèi)毒力測定結(jié)果見表1。所有處理均對柑橘全爪螨具有很好的觸殺活性。二甲氧香酯原藥及制劑48h的毒力分別為174mg/L和114mg/L，是98%螺螨酯原藥毒力（281mg/L）的1.61倍和2.46倍。

2.2田間藥效試驗結(jié)果

大田試驗數(shù)據(jù)結(jié)果（表2）顯示，5%二甲氧香酯EC具有非常好的殺螨效果。施藥后1d，其62.5、83.3、125、250mg/kg處理的相對防效分別為27.3%、32.1%、43.4%、48.3%，其中125、250mg/kg處理的防效顯著高于對照藥劑240g/L螺螨酯SC60mg/kg處理（32.0%），其250mg/kg處理下相對防效僅有48.3%，表明其速效性較差。施藥后3d，62.5、83.3、125、250mg/kg處理的相對防效分別為50.0%、55.1%、68.0%、72.3%，其中125、250mg/kg處理的相對防效顯著高于對照藥劑（61.5%）。隨著時間的延長，施藥后7d，5%二甲氧香酯EC的相對防效上升明顯，各處理區(qū)的防效達(dá)到71.1%～89.2%，其中83.3～250mg/kg處理的相對防效顯著優(yōu)于對照藥劑。施藥后14d，5%二甲氧香酯EC各處理區(qū)的防效達(dá)到79.0%～94.0%，表明其持效期較長。其中125mg/kg處理的相對防效與對照藥劑防效相當(dāng)，而250mg/kg處理的相對防效顯著優(yōu)于對照藥劑（91.4%）。

綜上，5%二甲氧香酯EC可有效防治柑橘全爪螨，持效期較長但速效性較差，其中125～250mg/kg濃度處理下對柑橘全爪螨防治作用表現(xiàn)較優(yōu)。

2.3對柑橘的安全性

藥后1～15d目測觀察5%二甲氧香酯EC對柑橘葉片和幼果的影響。各處理區(qū)供試柑橘植株、葉片、果實和花均無藥害癥狀產(chǎn)生?？梢娫诒驹囼炋幚頋舛确秶鷥?nèi)，5%二甲氧香酯EC對柑橘安全，對其生長發(fā)育無不良影響。

3討論

農(nóng)藥是防治農(nóng)作物病蟲草鼠害的重要手段。但由于農(nóng)藥的長期不合理使用，許多害蟲（螨）對某些藥劑的單一制劑已產(chǎn)生不同程度的抗性。Hu等2006年-2009年持續(xù)監(jiān)測了中國南方4個省份的6個柑橘全爪螨高發(fā)地區(qū)的柑橘全爪螨種群對螺螨酯的抗性發(fā)展速度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其對螺螨酯的抗性在3年時間里最高提高了127倍。石緒根等綜述了3種害螨對螺螨酯的抗藥性研究進展，也闡述了近年來螺螨酯的不合理使用導(dǎo)致柑橘全爪螨的抗性問題。二甲氧香酯是新近發(fā)現(xiàn)的具有殺螨活性的天然活性物質(zhì)，可以從多種植物中提取，在醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用較多，但在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域報道甚少。蘇柳等的研究表明，植物性殺蟲（螨）劑往往不是簡單地通過某種方式或某種機理產(chǎn)生作用，而是通過多種作用方式和機理來達(dá)到控制蟲（螨）害目的。植物源殺蟲（螨）劑的這種特性不僅增強其作用效果，并且使害蟲（螨）較難產(chǎn)生抗性。而且植物源農(nóng)藥一般具有環(huán)境相容性好、無公害等特征。因而，將二甲氧香酯應(yīng)用于果樹害螨防治無疑會助力綠色果樹的生產(chǎn)。

本研究通過室內(nèi)毒力測定和田問藥效驗證，表明5%二甲氧香酯EC不僅對柑橘全爪螨表現(xiàn)較好控制效果，持效期長，而且對作物生長安全，值得在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中推廣應(yīng)用。建議在害螨發(fā)生早期或種群密度較低時使用，推薦使用濃度為125～250mg/kg，對葉片正、反面進行均勻噴霧處理。