龍九味之五味子研究進(jìn)展

武天元，張樹(shù)明

(1黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院·黑龍江 哈爾濱 150024；2黑龍江省中醫(yī)藥科學(xué)院·黑龍江 哈爾濱 150036)

五味子始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，現(xiàn)己正式列入了中國(guó)、日本、韓國(guó)、俄羅斯、美國(guó)、歐洲等世界藥典。具有收斂固澀、益氣生津、補(bǔ)腎寧心的功效，為臨床常用中藥，市場(chǎng)需求量較大。根據(jù)五味子產(chǎn)地分布，黑龍江省為主產(chǎn)區(qū)，且藥材質(zhì)量較優(yōu)，被國(guó)內(nèi)外中醫(yī)藥學(xué)者所追捧。同時(shí)黑龍江省為了打造中醫(yī)藥大省強(qiáng)省，將五味子列入重點(diǎn)發(fā)展的“龍九味”之一。為了更好的了解五味子近年研究，課題組以中國(guó)知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫(kù)為依托，以“五味子”為關(guān)鍵詞檢索了近十年五味子炮制相關(guān)研究，對(duì)其進(jìn)行分析后概述如下。

1 五味子炮制工藝研究

五味子在《神農(nóng)本草經(jīng)》中為上品，但該書(shū)中未記載炮制方法。在漢代《金匱玉函經(jīng)》中為最早出現(xiàn)其炮制“曰:‘碎’”，梁代《本草經(jīng)集注》中“曰:‘打破’”。而后五味子的多種炮制方法陸續(xù)出現(xiàn)，如炒法、焙法、燒法、炮法、烘法、蒸法、熬膏、制炭、蜜制、酒制、糯米炒、麩炒、鹽蒸、蜜酒合制等。“炒”法為孫思邈首次在《銀海精微》中提出?！懊壑啤睘椤独坠谥苏摗分凶钤缬涊d“凡用，以銅刀劈作兩片，用蜜浸蒸……”。醋五味子出現(xiàn)在《全國(guó)中藥炮制規(guī)范》，該法為近代炮制方法的發(fā)展，在古代文獻(xiàn)中未見(jiàn)記載。對(duì)不同炮制品由于各地用藥習(xí)慣不同而存在區(qū)域使用差異，常用的有醋五味子、五味子、酒五味子、蜜五味子、炒五味子，但2020版《中華人民共和國(guó)藥典》僅有醋五味子為五味子飲片[1]。

近十年對(duì)五味子的炮制工藝主要集中在醋制和酒制工藝,僅一篇文章為五味子鹽炙工藝研究。其中醋制工藝包括醋蒸工藝及高壓醋蒸工藝研究：許世泉等[2]以五味子總木脂素、五味子醇甲及五味子乙素為指標(biāo)確定最佳高壓醋蒸工藝為加入30%醋，拌勻悶潤(rùn)3 h，蒸制1 h；高慧等[3]以6種木脂素類成分含量為指標(biāo)考察蒸制及烘制時(shí)間對(duì)醋五味子的影響確定最佳炮制工藝為加20%米醋悶潤(rùn)1.5 h,蒸制3 h,于50 ℃烘制1 h；劉炬灼等[4]以8種木脂素的含量及總和作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)正交試驗(yàn)和BBD-RSM優(yōu)化五味子的炮制工藝，確定醋蒸炮制工藝最佳條件為醋的用量30 g/100 g，悶潤(rùn)時(shí)間1 h，蒸制時(shí)間5 h。酒制工藝包括酒蒸工藝及高壓酒蒸工藝研究研究：劉炬灼等[4]采用正交試驗(yàn)和BBD-RSM優(yōu)化了酒蒸五味子炮制工藝，并以8種木脂素的含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定用酒量20 g/100 g、悶潤(rùn)2 h、蒸制3 h為最佳工藝。高壓酒蒸五味子工藝翟德銀等[5]研究認(rèn)為在輔料用量相同時(shí)，在壓力0.07 MPa、溫度100 ℃、時(shí)間60 min條件下的蒸制五味子五味子醇甲含量較高。

另外除醋制、酒制五味子的工藝研究外逄世峰等[6]以五味子醇甲和五味子醇乙含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)通過(guò)正交試驗(yàn)法確定五味子鹽炙最佳工藝為加鹽1%、悶潤(rùn)1 h、炒制80 s，該工藝穩(wěn)定可行,重現(xiàn)性好。

2 五味子炮制品的主要化學(xué)成分

五味子含有多種化學(xué)成分。其中木脂素類成分主要存在于種子中總含量為2%～8%，有150多種，以聯(lián)苯環(huán)辛二烯類為主要骨架，包含五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酚等。而有機(jī)酸類成分主要有酒石酸、蘋(píng)果酸、檸檬酸等，并且五味子中總氨基酸含量較高、種類較多有16種。所含多糖類成分以鼠李糖、木糖、葡萄糖為主，總多糖含量約為11.98%(也有報(bào)道約為6.57%)。揮發(fā)油類成分以倍半萜類為主，含有α-依蘭烯、γ-姜黃烯、β-雪松烯等。

對(duì)于五味子炮制品成分研究多與生品對(duì)照或各炮制品之間對(duì)照，所測(cè)成分也較為多種。周艷等[7]研究，與生品相比醋蒸法、酒蒸法、酒浸法、蜜炒法、蜜蒸法、清炒法、酒蜜蒸法、清蒸法的五味子中五味子醇甲、五味子甲素、戈米辛N、五味子乙素和五味子丙素的含量均有不同程度的提高，以酒浸法的炮制品中總木脂素含量最高。這與周進(jìn)東等[8]研究五味子經(jīng)醋制和酒制后與生品相比6種木脂素(五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素及五味子丙素)的含量均有所增加且酒制品中的含量高于或等于醋制品中的含量，與李海濤等[9]研究酒蒸和酒浸五味子中五味子醇甲、醇乙、甲素、乙素等木脂素類成分含量和溶出率均最高，與初洪波等[10]研究的醋制、酒蒸等不同手段均可明顯提高炮制品中五味子醇甲含量，與白晶等[11]研究得到的生品、醋制、酒制、蜜制五味子中酒五味子所含木脂素含量最高基本一致。除此之外逄世峰等[12]研究蜜炙和酒炙五味子的木脂素類成分含量和溶出率有不同程度的提高，醋五味子只有五味子乙素含量增加其余木脂素含量均減少。

在關(guān)注酒制五味子成分的同時(shí)學(xué)者對(duì)醋制五味子的成分同樣關(guān)注，學(xué)者研究表明五味子醋制后木脂素總含量(1.05%～1.36%)比炮制前的 (0.98%～1.29%)升高 ,但木脂素類成分的組成及含有量無(wú)明顯差異。[13]黑龍江產(chǎn)地的6種木脂素成分總量最高，同時(shí)發(fā)現(xiàn)醋五味子木脂素成分中五味子醇甲含量最高，但其他成分也不低。[14]遼寧產(chǎn)的五味子藥材中木脂素類物質(zhì)含量最高，黑龍江產(chǎn)的含量較低。這可能與地域氣候、采收時(shí)節(jié)有關(guān)； 醋五味子中五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素的含量較生品均有減少，其中以五味子醇乙的含量減少最顯著(減少約1/3)[15]。

在對(duì)五味子不同炮制品木脂素成分測(cè)定的同時(shí)，有學(xué)者也對(duì)其他成分進(jìn)行了測(cè)定。有機(jī)酸測(cè)定：與生五味子比較醋五味子、酒五味子中原兒茶酸和檸檬酸含量均降低[16]；五味子清蒸、醋蒸和蜜蒸與生品比較檸檬酸的含量均明顯減少、L-蘋(píng)果酸的含量變化不大、5-羥甲基糠醛從無(wú)到有，其中蜜蒸五味子的含量增加最明顯[17]；陳昌利等[18]研究發(fā)現(xiàn)蜜蒸五味子的總有機(jī)酸含量為9.27%比生五味子總有機(jī)酸含量13.76%有所下降，因此該作者認(rèn)為有機(jī)酸類作為五味子飲片的主要成分之一，應(yīng)納入其飲片的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)。5-HMF測(cè)定：醋五味子、酒五味子和蜜炒五味子隨炮制時(shí)間的延長(zhǎng)及炮制溫度的升高五味子中5-HMF含量明顯增加，并且5-HMF含量隨蜜用量增加逐漸升高、隨酒和醋用量的增加而逐漸降低[19]。揮發(fā)油測(cè)定：韓紅祥等[20]利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)得五味子生品、醋五味子、酒五味子和蜜炒五味子的揮發(fā)油得率分別是1.66%、1.50%、1.40%和 1.34%；從各揮發(fā)油中分別檢出 46種、49 種、48 種和50種。重金屬測(cè)定：在五味子及醋制、酒制、蜜制、蒸制品中中鉛含量均降低、汞含量均升高、鎘含量?jī)H在酒制品中升高、砷僅在酒制品中被檢測(cè)到、銅含量無(wú)明顯變化未超出標(biāo)準(zhǔn)限度[21]。黃酮類測(cè)定：炮制對(duì)五味子中總黃酮、總?cè)?、水溶性總蛋白含量均有影響，總黃酮、水溶性總蛋白含量為五味子>酒五味子>醋五味子，總?cè)坪繛榇孜逦蹲?五味子>酒五味子。[22]多糖測(cè)定：醋五味子總多糖較生五味子含量下降了9.46%[23]。

學(xué)者除對(duì)五味子炮制品成分含量變化研究外，還進(jìn)行了炮制后可能出現(xiàn)的新成分及復(fù)方中用不同炮制品對(duì)其成分的影響也進(jìn)行了研究。李林福等[24]從五味子酒制品中分離并鑒定了2,3-二氫-3,5-二羥基-6-甲基-4氫-吡喃-4-酮、3,5-二羥基-2-甲基-4氫-吡喃-4-酮、5-羥甲基糠醛、五味子甲素、β-谷甾醇，schisdilactoneH、丁二酸、麥芽酚等8個(gè)化合物。陳佩東等[25]應(yīng)用柱色譜法分離、核磁共振等波譜鑒定化學(xué)結(jié)構(gòu)，從醋蒸五味子中得到除五味子醇甲外的南五味子乙素、β-谷甾醇、狼毒甲素、(NH) 2-羥基喹啉-4-羥酸(Ⅴ) 4個(gè)化合物。蘇聯(lián)麟等[26]采用UPLC-Q/TOF-MS解析生、醋五味子飲片中主要的木脂素類成分，五味子醋制前后其化學(xué)成分發(fā)生了一系列復(fù)雜的變化，經(jīng)研究分析確定五味子乙素和5-羥甲基糠醛可作為五味子醋制前后代表性的潛在質(zhì)量標(biāo)志物。高慧等[27]以五味子醇甲、芍藥苷的含量為指標(biāo)，比較生五味子、酒五味子對(duì)小青龍湯復(fù)方化學(xué)成分的影響，用酒五味子比用生五味子的小青龍湯中五味子醇甲、芍藥苷的含量略有降低，分別為0.0502%、0.0146%。

3 五味子炮制品藥理作用

五味子及其炮制品具有多種藥理活性，以往保肝作用研究較多，但近年來(lái)其藥理作用研究有所延伸，其中包括降糖作用：五味子及其炮制品對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用隨著提取溶劑極性的增大而增強(qiáng)，并且醋制的正丁醇和水提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性要明顯強(qiáng)于蒸制提取物[28]。五味子醋制后降低糖化血紅蛋白含量?jī)?yōu)于生五味子，但對(duì)血清胰島素未見(jiàn)顯著抑制作用[29]。雖然生五味子、醋五味子均表現(xiàn)出明顯的降血糖作用，但作用趨勢(shì)存在顯著差異[30]。 醋蒸、酒蒸、蜜炙及生藥北五味子乙醇提取物均可降低糖尿病大鼠血糖、血脂水平，有明顯抗氧化應(yīng)激作用，而醋蒸炮制下北五味子乙醇提取物作用更好[31]。調(diào)節(jié)免疫作用：五味子均能不同程度促進(jìn)未活化脾淋巴細(xì)胞及Con A和LPS誘導(dǎo)的T,B淋巴細(xì)胞的增殖，同等劑量下酒五味子增殖效果最佳，優(yōu)于生五味子、醋五味子[32]。五味子不同炮制品可改善腎陰虛、腎陽(yáng)虛小鼠激素水平，增加臟器指數(shù)，其中酒制品作用最好[33-34]。含酒五味子的五子衍宗丸、六味丸對(duì)腎陽(yáng)虛、腎陰虛小鼠的激素水平、臟器指數(shù)改善作用優(yōu)于含生五味子的復(fù)方[35]。

4 結(jié)語(yǔ)

五味子從古至今應(yīng)用具有上千年的歷史，充分證明了其臨床療效的優(yōu)越性和研究開(kāi)發(fā)的價(jià)值重要性。五味子含有上百種化學(xué)成分、眾多活性成分，使其具有保肝、降糖、抑菌、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、抑制過(guò)敏性哮喘、抑制胃腸推進(jìn)等多種藥理作用，并且多種不同的炮制方法又使多種成分及藥理作用發(fā)生變化。今后，在以往研究基礎(chǔ)之上，隨著先進(jìn)的研究方法及儀器設(shè)備不斷出現(xiàn)，對(duì)五味子的藥理作用及活性成分將越來(lái)越多的被發(fā)現(xiàn)，在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下五味子的臨床應(yīng)用越來(lái)越廣泛，療效逐步提升，同時(shí)以五味子為原料開(kāi)發(fā)的新產(chǎn)品將逐漸增多。