一起羊梭菌病的診治

伏娟麗

寧夏中寧縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局動物疾病預(yù)防控制中心，寧夏中寧 755100

2021年5月18日，中寧縣動物疾病預(yù)防控制中心實驗室接診一起病死羔羊，樣品來源是由中寧縣徐套鄉(xiāng)土塘村一養(yǎng)羊農(nóng)戶送檢。

1 基本情況

養(yǎng)殖戶存欄羊68只，2021年4月中旬開始發(fā)病，病程1月余，零星死亡。死亡羔羊為1～2月齡，拉黑色稀便，藥物治療不能控制。由于病程較長陸續(xù)死亡，疾控中心派技術(shù)人員到現(xiàn)場調(diào)查。

2 流行病學(xué)調(diào)查

2.1 羊群的結(jié)構(gòu)；有繁殖母羊、育肥羊，小羔羊，混群飼養(yǎng)無隔離措施。

2.2 飼養(yǎng)管理：日常飼喂中粗飼料主要為玉米秸稈和干稻草，經(jīng)粉碎后放置于食槽中自由采食；精料主要為玉米和麩皮。成年羊每天每只0.25 kg，圈舍潮濕、不潔凈。

2.3 免疫情況：2021年2月12日肌肉注射O型口蹄疫疫苗1 mL/只、小反芻獸疫苗頸部皮下注射一頭份（一月齡以上的羊免疫、懷孕3個月以上的羊除外），免疫后羊群無異常表現(xiàn)。羊群一致沒有免疫羊四聯(lián)疫苗。

2.4 流行特點：發(fā)病一月余，已死亡13只，藥物治療可緩解癥狀，但死亡還零星發(fā)生。

3 臨床癥狀

病羊萎靡，精神不振，不愿采食，眼結(jié)膜潮紅，有的弓背，有的臥地不起，拉黑色稀便。發(fā)病急，死亡快，死亡為小羔羊，成年羊未見明顯發(fā)病癥狀。

4 病理變化

將死亡羔羊的腹部剖開，可以清晰地看到羊的肝臟變得腫大，呈現(xiàn)出暗紫色，出血點和出血斑在肝臟表面呈彌散狀，將其切開后可以看到肝組織變的腫脹；脾臟也變得腫大，顏色黑紫；肺臟表面可以清楚地看到淤血斑，水腫明顯，顏色是鮮紅色；心包積液、液體為黃色透明狀，真胃內(nèi)充滿乳凝塊、胃黏膜有出血斑。十二指腸腸道鼓氣明顯，剪開腸壁能觀察到出血癥狀，腸壁變薄，腸內(nèi)可以看到脫落的腸黏膜，還有膿性分泌物，呈黃綠色，質(zhì)地粘稠；切開空腸斷，能看到里面有大量的液體，粘稠，呈紅棕色；回腸有出血斑，結(jié)腸、直腸等都清晰地出現(xiàn)了大理石樣的變性?？傊?，死亡羔羊的實質(zhì)性器官均發(fā)生了明顯的出血特征。

5 診斷

5.1 實驗室診斷

血清血檢測：采集羊血10份，離心分離血清，做虎紅平板凝集試驗，布氏桿菌陰性10份；取10份血清分別做O型口蹄疫（診斷試劑為蘭州獸研所生產(chǎn)）、小反芻獸疫（診斷試劑為青島立見）免疫抗體測定，結(jié)果均為陽性，達(dá)到免疫抗體合格標(biāo)準(zhǔn)。

5.2 細(xì)菌檢測

5.2.1 組織觸片：取病死羊病灶明顯的臟器：肝、脾、腸系膜淋巴結(jié)組織，在生物安全柜中無菌操作下觸片，保持自然環(huán)境干燥，溫度為常溫，對組織進(jìn)行染色后將其放置在1 000倍顯微鏡下進(jìn)行觀察，可以發(fā)現(xiàn)藍(lán)紫色的小桿菌，其兩端很整齊，長度不同，即革蘭氏陽性菌。玻片在空氣中放置15 min左右，再在油鏡下觀察，菌體周圍有白色熒光。

5.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)：在無菌環(huán)境下對死亡羔羊的肝、脾、淋巴組織進(jìn)行營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)，然后進(jìn)行生化培養(yǎng)，保持環(huán)境溫度為37 ℃不變。24 h后，長出灰白色菌落。取單個的菌落劃線式接種于營養(yǎng)瓊脂、血液瓊脂培養(yǎng)基上，厭氧培養(yǎng)，在營養(yǎng)瓊脂同樣長出灰白色菌落、在血液瓊脂上有明顯的抑菌圈。分離培養(yǎng)觸片，經(jīng)革蘭氏染色后進(jìn)行顯微鏡鏡檢，視野下有兩端整齊、長短不一的藍(lán)紫色的小桿菌，即陽性菌。

5.2.3 糖發(fā)酵實驗：用接種棒取已培養(yǎng)的營養(yǎng)瓊脂的單個菌落少許，接種于葡萄糖高層瓊脂培養(yǎng)液管中，混勻后置37 ℃溫箱培養(yǎng)10～24 h后觀察結(jié)果。在含葡萄糖的高層瓊脂中培養(yǎng)產(chǎn)生大量氣體，并使瓊脂斷裂。能分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣。這一特點是產(chǎn)氣莢膜梭菌顯著特點之一“發(fā)酵糖的能力”。

5.2.4 診斷結(jié)果：該細(xì)菌為產(chǎn)氣莢膜梭菌。

6 治療效果

6.1 清理圈舍內(nèi)每天剩余的飼草料和剩余的飲用水，做無害化處理，每天清理圈舍的糞便，場地每天用0.3%的燒堿噴霧徹底消毒一次，堅持15 d左右。

6.2 將病羊和健康羊隔離，病羊口服復(fù)合維生素+溫立康雙黃連，生理鹽水稀釋鹽酸林可霉素10～20 mg/只、復(fù)方磺胺甲氧嘧啶鈉0.3 mL/只，羔羊分兩側(cè)頸部肌肉注射，每天1次，連用3 d。健康羊群用白頭翁散拌料（以上劑量均按說明），連用3 d。用藥后停藥4 d，全羊群用羊四聯(lián)疫苗（頸部肌肉注射）免疫一次，每只羊1.5頭份，免疫后再無死亡。

7 發(fā)病原因分析及預(yù)防措施

7.1 致死原因分析

此病是由魏氏梭菌-產(chǎn)氣莢膜桿菌引起的二類動物疫病，本菌在自然界分布很廣，常見于低洼潮濕（土壤、圈舍、塵埃）的環(huán)境中，不易被消除，飼養(yǎng)管理不當(dāng)、體質(zhì)弱的羊容易通過消化道感染梭菌病。

7.1.1 小羔羊體質(zhì)弱，免疫器官發(fā)育不完善，容易遭病原菌的侵襲，一旦感染，通過直接接觸、間接接觸而使羊群中的小羔羊發(fā)病。成年羊精神狀態(tài)良好，免疫疾病的抵抗力強，在飼養(yǎng)管理良好的條件下，對本病有一定的抵抗力，成年羊無死亡。

7.1.2 羊群沒有免疫羊四聯(lián)疫苗是誘發(fā)本病的直接原因：四聯(lián)疫苗頸部肌肉注射1頭份/只、免疫后4～7 d產(chǎn)生免疫力，免疫有效期12個月。繁殖母羊、種公羊一年免疫1次，母羊在配種前后免疫，對產(chǎn)下的小羔羊有免疫保護(hù)。實踐證明基礎(chǔ)免疫做好的繁殖母羊，生產(chǎn)的小羔羊很少發(fā)生此病。

7.2 合理分群、及時補飼，增強免疫力

小羔羊與成年羊混群飼喂，易遭踩踏、圈舍潮濕易感染病原菌，易誘發(fā)消化系統(tǒng)疾病。建議羔羊與成年羊分群，定時吃奶及早補飼，增強體質(zhì)提高免疫力，預(yù)防疾病的發(fā)生。

7.3 做好環(huán)境消毒工作

定期對圈舍及周圍環(huán)境用4% NaOH進(jìn)行徹底消毒。在疫病發(fā)生期間每天消毒一次，在羊群健康的條件下，每兩周消毒一次，很好的殺滅環(huán)境中的病原微生物，減少疫病感染的機(jī)會，保護(hù)羊群的健康。