4- 氨基安替比林光度法測定揮發(fā)酚的精密度偏性試驗分析

熱汗古麗·依米提

（哈密水文勘測局，新疆 哈密 839000）

1 引言

長時期飲用被酚類污染的水，可引起貧血、出疹、頭昏、瘙癢以及各種神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀。當酚類在水中的含量等于（0.1 mg/L～0.2 mg/L）濃度時，生長在此的魚類肉質(zhì)就會有異味，當濃度高于5 mg/L 時就會導致魚類中毒死亡。當農(nóng)田灌溉用水中酚類的濃度比較高時，農(nóng)作物就會減產(chǎn)或者枯死。當水中含有微量酚類時，通常會在加氯消毒過程中產(chǎn)生氯酚臭［1-3]。本文通過精密度偏性分析實驗，保證實驗室測定揮分酚數(shù)據(jù)的準確性和精密度。

2 實驗部分

2.1 實驗室基本設(shè)施情況

為保證檢測工作正常進行，使實驗室環(huán)境對檢測結(jié)果影響始終處于最小程度，確保檢測結(jié)果的有效性和準確性。選擇在試驗中心進行實驗。實驗室建筑總面積560 m2，分三層，一、二層為實驗室占總面積的60%，一樓有氣相色譜、原子熒光、原子吸收等設(shè)備實驗室，三間實驗室配備有專用的排氣設(shè)施。二樓為毒物分析室、微生物實驗室（無菌室）、天平室、儀器室，常規(guī)分析室和毒物分析室分開。一般實驗室內(nèi)溫度在15℃～35℃，相對濕度在40%以下，精密儀器室安裝有空調(diào)，控制室內(nèi)溫濕度。壓力容器單獨存放，有效安全隔離。藥品庫房內(nèi)所存固、液體試劑根據(jù)其不同性質(zhì)分區(qū)存放，庫房內(nèi)設(shè)有防火、防盜、防爆等設(shè)施。每間實驗室具有足夠照明，通風性好，有良好的安全設(shè)施，具備消防安全設(shè)施。實驗室內(nèi)清潔、整齊、明亮、安靜。三層為辦公室和會議室。

2.2 測定方法

實驗采用4- 氨基安替比林分光光度法測定（GB 7493-87），用蒸餾法將化合物中的酚類蒸餾出，使固定劑和干擾物質(zhì)分離。蒸餾出的餾出液體積必須等于試樣體積，當蒸餾出的酚類化合物在pH10.0±0.2 介質(zhì)中，并且有鐵氰化鉀情況下，同4- 氨基安替比林發(fā)生化學反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料，再用氯仿萃取后，在460 nm 波長下測定其吸光度值。

2.3 實驗儀器

儀器設(shè)備選用723C 可見分光光度計，20 m 比色皿4 個，250 mL 分液漏斗24 個，2 mL 單標線移液管3 個，10 mL 單標線移液管1 個。

2.4 實驗試劑

氯化銨，氫氧化，4- 氨基安替比，鐵氰化鉀，氯仿（分析純），實驗用水為新制備的蒸餾水或去離子水。

3 實驗內(nèi)容

3.1 溶液、試劑的配制

（1）氫氧化鈉溶液：稱取氫氧化鈉10 g溶于水，稀釋至100 mL。

（2）4- 氨基安替比林溶液配制：稱取2g 4- 氨基安替比林溶于適當水中，溶解后慢慢轉(zhuǎn)移到100 mL 容量瓶中，然后用無酚水稀釋至標線。

（3）緩沖溶液的配制：稱取20 g 氯化銨溶于100 mL 氨水中。

（4）鐵氰化鉀溶液配制：稱取8 g 的鐵氰化鉀溶于少量水中，溶解后慢慢轉(zhuǎn)移入100 mL容量瓶中，用無酚水稀釋至標線。

3.2 測定樣品的配制

（1）酚貯備液的配制（500 mg/L）

實驗室購買的揮發(fā)酚標液，濃度為500 mg/L。

（2）酚中間液的配制（10.00 mg/L）

準確吸取10.00 ml 酚貯備液（500 mg/L），用水稀釋至500 mL 容量瓶中。

（3）酚標準使用液的配制（1 mg/L）（1.00 mg/L）

準確吸取10.00 ml 酚中間液（10.00 mg/L），用水稀釋至100 mL 容量瓶中。

（4）0.9C 測試液的配制（C 為標準曲線的上限0.2 mg/L）

準確吸取1.8 mL 酚中間液（10.00 mg/L），用水稀釋至100 mL 容量瓶中。

（5）0.1C 測試液的配制（0.02 mg/L）

準確吸取20 mL 酚中間標準使用液（10.00 mg/L），用水稀釋至1000 mL 容量瓶中。

（6）天然水樣

天然水樣一般情況下不含有酚，作為本次實驗的測試樣品就不適合了，所以向天然水樣中加入一定的酚使用液作為本次實驗的測試樣品。

（7）天然水樣+標樣

在天然水樣品中加入一定量的酚標準使用液，使?jié)舛葹樘烊凰畼悠窛舛鹊?.5～2 倍。

4 分析測試過程

4.1 標準曲線的繪制

（1）7 個分液漏斗中，分別加入100 mL水，依次加入0.00 mL、0.50 mL、1.00 mL、3.00 mL、5.00 mL、7.00 mL 和10.00 mL 酚標準使用液，再分別加水至200 mL。

（2）分別加2.0 mL 緩沖溶液混勻，此時溶液的pH 值為10.0±0.2，加1.5 mL 4- 氨基安替比林溶液并且混勻，然后再加入1.5 mL 鐵氰化鉀溶液并且充分混勻。

（3）在分液漏斗中準確加入10.0 mL 氯仿，密塞，劇烈搖動2 min，倒置放氣，靜置分層。用小塊濾紙或者脫脂棉擦干分液漏斗頸管內(nèi)壁中的小水珠，然后在頸管內(nèi)壁中塞入濾紙或者脫脂棉，使氯仿層通過濾紙或脫脂棉，去掉濾出的前數(shù)滴萃取液體后，將剩下氯仿溶液直接放入比色皿（20 mm）中進行比色。

4.2 樣品的測定與分析

用空白樣、0.1 C 濃度標樣、0.9 C 濃度標樣、天然水樣、水樣+標樣、統(tǒng)一標樣，同標準曲線測試步驟相同，每天測試一批次，每批次兩個平行樣，連續(xù)測定6 個批次。質(zhì)控樣每天測定一次，每次做兩個平行雙樣，連續(xù)測定10 d。

5 實驗的結(jié)果與分析

5.1 批內(nèi)、批間變異分析

根據(jù)實驗數(shù)據(jù)計算F值，若F＜F0.05，代表變異“不顯著”；F＞F0.01，代表變異“顯著”，環(huán)境、條件等可能干擾實驗結(jié)果；F0.05＜F＜F0.01，代表變異顯著性證據(jù)不足，需要查找原因進行分析。若MS批間＜MS批內(nèi)，則。若F＜F0.05，說明批內(nèi)、批間變異不顯著，可將批間變異視為零，將批內(nèi)變異作總變異的估計值；若F＞F0.05，則必須對其進行糾正。

表1 精密度偏性檢驗表

根據(jù)表1 精密度偏性檢驗表內(nèi)容可以看出，實驗數(shù)據(jù)通過批內(nèi)變異（a）和批內(nèi)變異（b）計算得出的變異顯著性檢驗（F 檢驗）為無顯著性差異，即0.1C、0.9C、天然水樣、水樣加標、統(tǒng)一標樣均無顯著性差異，說明實驗結(jié)果沒有受到實驗外界條件的影響。

5.2 總標準差（St）檢驗

總標準差（St）小于被測濃度的5%可以接受；當5%濃度低于方法給定的檢測限時，即用檢測限作為衡量標準。此次實驗總標準差（St）都小于測得數(shù)據(jù)濃度的5%，總標準差檢驗結(jié)果全部為合格，說明測試人員對儀器的操作使用熟練，對儀器的日常維護保持良好。

5.3 準確度的分析

在測定樣品時，于同一樣品加入一定量的標準物質(zhì)進行測定，將測定結(jié)果扣除樣品的測定值，計算回收率。加標回收分析在一定程度上能反映測試結(jié)果的準確度。在測定樣品時，于同一樣品加入一定量的標準物質(zhì)進行測定，將測定結(jié)果扣除樣品的測定值，計算回收率。加標回收分析在一定程度上能反映測試結(jié)果的準確度。在實際應(yīng)用實應(yīng)注意加標物質(zhì)的形態(tài)，加標量和樣品基體等。每批相同基體類型的測試樣品應(yīng)該隨機抽取10%～20%的樣品進行加標回收分析。

本次試驗的平均回收率P＝99.8%，在合格范圍之內(nèi)，說明此次實驗的數(shù)據(jù)是準確可靠的。

5.4 質(zhì)控圖的合理性分析

本次實驗通過10 天對0.9C 進行的20 次測定數(shù)據(jù)，計算出控制樣的X 及S，繪制精密度控制圖?？v坐標為測定值，橫坐標為獲得數(shù)據(jù)的順序。將均值X 作成與橫坐標平行的中心線CL3S 為上、下控制限UCL 及LCL，±2S 為上、下警戒限UWL 及LWL。試樣分析時，每批帶入控制樣，測定數(shù)據(jù)在控制圖上打點，若點落在控制警戒限內(nèi)，則表示結(jié)果滿足要求；若點落在控制限外，表示結(jié)果不合格，查找原因并糾偏后再進行測定。若控制樣品的結(jié)果落在控制限和警戒限之間，表示實驗的精密度不理想，應(yīng)該引起重視。

圖1 為質(zhì)量控制圖，點數(shù)全都落入警告限以內(nèi)，75%以上落入輔助限以內(nèi)，分布合理，表示該次實驗數(shù)據(jù)處在受控狀態(tài)。

圖1 質(zhì)量控制

6 結(jié)論

精密度偏性試驗與評價，是對實驗室人員的技術(shù)水平和分析標準方法的適用性得出科學評價。通過4- 氨基安替比林光度法測定揮發(fā)酚的精密度偏性試驗可以看出：實驗室對揮發(fā)酚項目分析操作控制過程較好，實驗分析得到的各項數(shù)據(jù)指標均可以達到實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制要求，整個分析過程均在質(zhì)量控制狀態(tài)，分析人員的操作技能和方法、測試數(shù)據(jù)質(zhì)量是可靠的。