2018-2019年吉安市柯薩奇病毒A組6型和10型的病原學(xué)檢測和流行特征分析

孫愛猛，吳珺，羅青，羅蘊嬌，周信云，羅智娟

（1.吉安市疾病預(yù)防控制中心，江西 吉安 343000；2.吉州區(qū)疾病預(yù)防控制中心，江西 吉安 343000）

手 足 口 病 （hand,foot and mouth disease，HFMD）是一種全球性的兒童常見急性傳染病，可由多種腸道病毒引起，主要致病血清型包括柯薩奇病毒（Coxsackievirus，CV）A組4～7、9、10、16型和B組1～3、5型，?？刹《荆‥chovirus）的部分血清型和腸道病毒71型（Enterovirus 71，EV71）等，其中以CA16和EV71最為常見，重癥及死亡病例多由EV71所致。近年來，隨著EV71疫苗的普及，較多地區(qū)柯薩奇病毒A組6型（Coxsackievirus A6,CA6）和10型（Coxsackievirus A10,CA10）呈增多趨勢，部分地區(qū)CA6為主要病原體[1-3]。CA6、CA10主要侵害低齡兒童，以3歲以下為主，CA10引起重癥概率較大[4]。目前吉安市對于CA6、CA10的病原與流行病學(xué)研究還未開展，江西省的相關(guān)研究也未見報道,為此，本研究對2018-2019年吉安市EV陽性中非CA16和非EV71腸道病毒標(biāo)本做CA6、CA10核酸檢測并做流行病學(xué)分析，為今后吉安市、江西省制訂手足口預(yù)防和控制策略提供科學(xué)依據(jù)。現(xiàn)將吉安市2018-2019年CA6、CA10核酸檢測和流行病學(xué)情況，報告如下。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源 2018-2019年吉安市各縣（市、區(qū)）疾控中心手足口病病例標(biāo)本采集時填寫的標(biāo)本采集信息登記表。

1.2 標(biāo)本來源 根據(jù)《手足口病預(yù)防控制指南(2009版)》、《吉安市手足口病預(yù)防控制方案》等要求，全市每個縣（市、區(qū)）每月采集5例普通病例標(biāo)本（咽拭子、肛拭子或大便、皰疹液），所有重癥、死亡、聚集性病例（聚集性病例小于10份全部采集，大于10份采集10份）標(biāo)本送檢。

1.3 實驗室檢測 使用西安天隆提取儀(NP96S)提取核酸，使用ABI QS_Dx熒光定量PCR儀進(jìn)行實時熒光RT-PCR檢測；病毒核酸提取試劑盒為中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供；EV、CA16、EV71核酸檢測試劑盒為中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司提供；CA6、CA10核酸檢測試劑盒為上海之江生物科技股份有限公司提供。核酸提取、擴增檢測、反應(yīng)條件、結(jié)果判讀等均嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計分析 采用Excel數(shù)據(jù)庫和SPSS18.0進(jìn)行分析，用描述流行病學(xué)方法，分析CA6、CA10流行特征。

2 結(jié)果

2.1 核酸檢測結(jié)果 對2018-2019年全部EV陽性中的非CA16和非EV71腸道病毒的437份標(biāo)本做CA6、CA10病毒核酸檢測，其中檢出CA6型266份、CA10型23份、其他EV型148份，未檢測出混合型感染，陽性率分別為60.87%、5.26%、33.87%，CA6陽性數(shù)超過同時期CA16和EV71毒株數(shù)（256，15），CA6為優(yōu)勢毒株。兩年分別檢測10起和5起聚集性病例，其中2018年5起由CA16型引起，2起由CA6引起，1起由CA10引起；2019年1起由CA16引起，3起由CA6引起，1起由CA10引起。CA6型標(biāo)本檢測CT值在18～38之間，中位數(shù)為28；CA10型標(biāo)本檢測CT值在28～36之間，中位數(shù)為31。

2.2 時間分布 2018年-2019年EV陽性中的非CA16和非EV71腸道病毒標(biāo)本分別為219份和218份，兩年標(biāo)本數(shù)基本一致。2018年檢測標(biāo)本中CA6型陽性142份、CA10型陽性6份、其他EV型71份，陽性率分別為64.84%、2.74%、32.42%，2019年檢測標(biāo)本中CA6型陽性124份、CA10型陽性17份、其他未分型77份，陽性率分別為56.88%、7.80%、35.32%，，兩年CA6為絕對優(yōu)勢菌株。從月分布來看，兩年CA6、CA10發(fā)病高峰期集中在7～10月份，共檢測出CA6、CA10共226份（51.72%）.與同時期手足口病流行小高峰期基本一致（另文描述）。但兩年高峰期稍有差別，2018年主要集中在7～12月，而2019年主要集中在5～11月，見圖1。

圖1 2018-2019年吉安市手足口病監(jiān)測CA6和CA10型時間分布圖

2.3 地區(qū)分布 CA6型在全市13個縣（市、區(qū)）均有分布，CA10型分散分布在8個縣（區(qū)），兩年間縣區(qū)分布均有統(tǒng)計學(xué)差異，CA6型卡方檢測值為38.06，P<0.01;CA10型 卡 方 檢 測 值 為20.41，P<0.05。CA6、CA10總數(shù)前五位為峽江縣（42份，14.53%）、安?？h（37份，12.80%）、吉水縣（35份，12.11%）、吉安縣（32份，11.07%）和泰和縣（26份，9.00%）等，占總陽性數(shù)的59.52%。

2.4 性別、年齡分布2018-2019年檢測出的CA6、CA10病毒標(biāo)本中，男性195人（67.51%），女性94人（32.49%），男女比例2.07:1。從年齡分布來看，主要集中在3歲以下幼兒，其中1歲組最多，占陽性標(biāo)本數(shù)48.10%（139/289）；其次為2歲組，占陽性標(biāo)本數(shù)20.76%（60/289），這與吉安市手足口病病例年齡分布情況基本一致。

2.5 樣本類型 所有檢測標(biāo)本為糞便、肛拭子、皰疹液和咽拭子4種類型，以肛拭子（268份）和糞便（118份）為主，分別占樣本數(shù)的61.33%和27.00%；不同標(biāo)本類型檢出陽性率略有不同，皰疹液中檢出陽性率最高（25/25），為100.00%，其次為咽拭子，檢出陽性率為69.23%。

3 討論

我國自2008年將手足口病列為丙類傳染病以來，其發(fā)病率和死亡率一直居于丙類傳染病首位，給社會和家庭帶來了很大的經(jīng)濟負(fù)擔(dān)，同時也給我國公共衛(wèi)生工作帶來極大的挑戰(zhàn)[5]。吉安市自2008年開始檢測手足口病病毒以來，僅開展了CA16和EV71的分型檢測，而自2014年以來，非CA16和EV71腸道病毒已成為我市手足口病的主要病原體[6]。有文獻(xiàn)報道，近年來CA6和CA10在多個國家和地區(qū)引起手足口病暴發(fā)，并已逐漸取代CA16和EV71成為優(yōu)勢毒株[7-9]。因此，開展非CA16和EV71腸道病毒特別是CA6和CA10病毒分型檢測并對其進(jìn)行流行病學(xué)分析具有重要意義。

本研究顯示，近年來吉安市CA6型HFMD所占百分比逐年上升，已成為重要優(yōu)勢毒株，流行趨勢與我國、我省部分地區(qū)報導(dǎo)相似[7-10]；CA10型HFMD以散發(fā)為主，未出現(xiàn)明顯流行規(guī)律。CA6型和CA10型引起的HFMD聚集性疫情所占比例逐年上升，提示未來我們需防范因二者而引起的的爆發(fā)疫情，部分報道也有相關(guān)提示[11]。

吉安市CA6型和CA10型HFMD在5～11月均有較高發(fā)病率，以7～10月最高，流行呈單峰形式，與此間吉安市HFMD流行趨勢一致，與本地區(qū)2018年以前夏秋兩個流行高峰不同[6]，這可能與本地區(qū)引起HFMD的優(yōu)勢毒株改變有關(guān)，未來還需進(jìn)一步研究證實。CA6型和CA10型HFMD在全市13個縣（市、區(qū)）分布均有統(tǒng)計學(xué)差異，可能與各地防控、診斷水平有關(guān)[5]，提示需強化各縣（市、區(qū)）防控水平，加強相關(guān)從業(yè)人員培訓(xùn)工作。

在人群分布上，男童發(fā)病率明顯高于女童，原因可能與男童較女童更好動、戶外活動多、衛(wèi)生依從性差、接觸傳染源相對較多有關(guān)。發(fā)病主要集中在1歲組和2歲組，其原因可能為此階段兒童喜歡舔食物品，而母體攜帶抗體消失，自身免疫系統(tǒng)還未完善有關(guān)。

糞便、肛拭子、皰疹液和咽拭子4種類型標(biāo)本中，以皰疹液陽性檢出率最高，其次為咽拭子，提示樣本采集時優(yōu)先采集皰疹液或多種標(biāo)本類型混采，以提高檢測準(zhǔn)確率。

吉安市HFMD主要病原體已由主流的CA16型和EV71型逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)镃A6型，CA10也呈增加趨勢，雖然目前已有有效的EV71疫苗[12]，但各型別間的交叉保護作用甚微[13-14],因此，CA6、CA10疫苗的研制具有重大前景。同時，提示未來需長期開展手足口病病原體除常規(guī)型別外的其他腸道病毒（CA6、CA10、CA24等）的監(jiān)測工作，及時掌握手足口病病原體的變化趨勢，從而更好應(yīng)對當(dāng)?shù)厥肿憧诓〉牧餍小?/p>