血清TGF-β1、IL-8水平與哮喘患者健脾補(bǔ)肺方聯(lián)合多索茶堿治療效果的關(guān)系

石閣

（河南省直第三人民醫(yī)院急重癥醫(yī)學(xué)科，河南 鄭州 450000）

中西醫(yī)結(jié)合治療哮喘是目前常用治療方法，其中健脾補(bǔ)肺方可健脾補(bǔ)氣、清熱宣肺，多索茶堿可調(diào)節(jié)免疫，改善呼吸道平滑肌松弛度，利于減輕氣道高反應(yīng)，改善哮喘患者肺功能[1-2]。但由于哮喘難以根治，部分患者因病情反復(fù)發(fā)作易加重氣道損傷，增加氣道重塑風(fēng)險(xiǎn)，一定程度上影響治療效果，不利于患者預(yù)后。因此，全面探索可影響哮喘治療效果的指標(biāo)對改善患者預(yù)后有重要意義。轉(zhuǎn)化生長因子（Transforming growth factor，TGF）-β1是一種免疫調(diào)節(jié)和促纖維化因子，參與組織纖維化和氣道結(jié)構(gòu)改變，在氣道重塑進(jìn)展有起到一定作用[3]。有研究顯示，炎癥細(xì)胞浸潤可加重呼吸道上皮黏膜損傷，進(jìn)而誘發(fā)哮喘癥狀發(fā)作，并推動哮喘病情進(jìn)展[4]。白細(xì)胞介素（Interleukin，IL）-8是趨化性細(xì)胞因子C-X-C亞家族成員，相關(guān)研究指出，IL-8可通過趨化多種細(xì)胞因子參與氣道炎癥反應(yīng)，加重呼吸道疾病病情[5]。由此推測，血清TGF-β1、IL-8可通過加重哮喘患者病情，影響其治療效果。鑒于此，本研究觀察血清TGF-β1、IL-8在哮喘患者中的表達(dá)，并分析二者與其治療效果的關(guān)系。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取醫(yī)院2019年2月至2021年2月的接收的98例哮喘患者作為研究對象，其中男60例，女38例；年齡22～45歲，平均年齡（33.62±2.16）歲；病程2～10年，平均病程（6.06±0.24）年；疾病類型：過敏性72例、藥物型26例；吸煙史：有吸煙史42例、無吸煙史56例。本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者及家屬簽署知情同意書。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) ⑴納入標(biāo)準(zhǔn)：西醫(yī)：哮喘符合《支氣管哮喘基層診療指南》[6]中診斷標(biāo)準(zhǔn)，均為過敏性哮喘；中醫(yī)符合《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[7]中冷哮診斷標(biāo)準(zhǔn)：喉中哮鳴有聲、胸膈滿悶、咳痰稀白、面色晦滯，或有惡寒、發(fā)熱等，舌質(zhì)淡、苔白滑，脈浮緊；癥狀均為慢性持續(xù)期；痰培養(yǎng)嗜酸性粒細(xì)胞（Eosinophile granulocyte，Eos）為陽性；癥狀持續(xù)時(shí)間＞1周。⑵排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他呼吸系統(tǒng)疾病，如慢阻肺、肺炎等；合并呼吸衰竭；合并肺部惡性腫瘤；長期服用糖皮質(zhì)激素；先天性哮喘。

1.3 方法

1.3.1 治療方法 患者入院當(dāng)天，先給予抗感染、糖皮質(zhì)激素治療，癥狀嚴(yán)重患者行吸氧治療，在此基礎(chǔ)上，服用多索茶堿（福安藥業(yè)集團(tuán)寧波天衡制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20000076，規(guī)格：0.2 g）0.2～0.4 g/次，2次/d；服用健脾補(bǔ)肺湯，藥方成分：薏苡仁15 g，黨參12 g，玉竹、淮山、蓮子肉、北沙參各10 g，陳皮6 g，水煎諸藥，取汁400 ml服用，2次/d，早晚分服，共治療3個月。

1.3.2 療效評估方法[6]治療3個月時(shí)，評估患者哮喘控制情況：良好控制：患者日間癥狀消失，無需使用緩解性藥物，無活動受限；部分控制：患者日間癥狀發(fā)作＞2次/周，仍需使用緩解性藥物，偶見哮喘造成夜醒，輕微活動受限；未控制：患者日間癥狀未消失，且1周內(nèi)出現(xiàn)癥狀＞3項(xiàng)，常因哮喘造成夜醒和活動受限。將良好控制、部分控制患者納入治療有效組，將未控制患者納入治療無效組。

1.3.3 主要實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測方法 治療前，采集患者空腹外周靜脈血4 ml，以4000 r/min速率離心5 min取血清（離心半徑為10 cm，離心機(jī)購自濟(jì)南來寶醫(yī)療器械有限公司，型號：TDL-4），采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清TGF-β1、IL-8水平，試劑盒購自上海晶抗生物工程有限公司；治療前，取患者痰液標(biāo)本放置于指定容器內(nèi)，常溫下以3000 r/min速率離心10 min取上清液（離心半徑為10 cm），完成后置于-70℃冷藏柜，沉渣即刻涂片，染色后在高倍鏡下計(jì)數(shù)EOS百分比。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，采用Shapiro-Wilk正態(tài)分布檢驗(yàn)計(jì)量資料的正態(tài)性情況；符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用“±s”表示，兩組間比較以獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用%和n表示，采用χ2檢驗(yàn)；等級資料采用秩和檢驗(yàn)；各指標(biāo)與哮喘患者健脾補(bǔ)肺方聯(lián)合多索茶堿治療效果的關(guān)系，采用Logistics回歸分析檢驗(yàn)；繪制受試者工作特征曲線圖（ROC），并計(jì)算曲線下面積（AUC），檢驗(yàn)血清TGF-β1、IL-8水平對哮喘患者治療無效的預(yù)測價(jià)值（AUC值＞0.9表示預(yù)測性能較高，0.71～0.90表示有一定預(yù)測性能，0.50～0.70表示預(yù)測性能較差）；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；采用graphpad prism 8軟件繪制各指標(biāo)與哮喘患者健脾補(bǔ)肺方聯(lián)合多索茶堿治療效果關(guān)系的森林圖。

2 結(jié)果

2.1 健脾補(bǔ)肺方聯(lián)合多索茶堿治療哮喘患者臨床效果 納入的98例哮喘患者，經(jīng)治療后癥狀良好控制38例、部分控制32例、未控制28例；治療有效占71.43%（70/98），治療無效占28.57%（28/98）。

2.2 治療無效組與治療有效組一般資料比較 兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 治療無效組與治療有效組一般資料比較

2.3 治療無效組與治療有效組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較治療無效組血清TGF-β1、IL-8水平、痰液EOS水平均高于治療有效組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 治療無效組與治療有效組實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較

2.4 各指標(biāo)與哮喘患者治療效果關(guān)系的Logistics回歸分析 將哮喘患者治療效果作為因變量（1=治療無效，0=治療有效），將血清TGF-β1、IL-8、痰液EOS作為自變量，經(jīng)Logistics回歸分析顯示，血清TGF-β1、IL-8過表達(dá)與哮喘患者健脾補(bǔ)肺方聯(lián)合多索茶堿治療無效有關(guān)（OR＞1，P＜0.05）。見表3、圖1。

表3 各指標(biāo)與哮喘患者治療效果關(guān)系的Logistics回歸分析

圖1 各指標(biāo)與哮喘患者治療效果關(guān)系的森林圖

2.5 血清TGF-β1、IL-8水平對哮喘患者治療無效的預(yù)測價(jià)值 將哮喘患者治療效果作為狀態(tài)變量（1=治療無效，0=治療有效），將血清TGF-β1、IL-8水平作為檢驗(yàn)變量，繪制ROC曲線圖顯示，血清TGF-β1、IL-8單獨(dú)及聯(lián)合預(yù)測哮喘患者治療無效的AUC分別為0.810、0.826、0.889，均有一定預(yù)測價(jià)值。見表4、圖2。

表4 血清TGF-β1、IL-8水平對哮喘患者治療無效的預(yù)測價(jià)值

圖2 血清TGF-β1、IL-8預(yù)測哮喘患者治療無效的ROC曲線圖

3 討論

健脾補(bǔ)肺方聯(lián)合多索茶堿治療哮喘可調(diào)節(jié)免疫功能，進(jìn)一步改善肺功能，利于減少癥狀發(fā)作頻率，但部分患者因病程久、病情重，氣道結(jié)構(gòu)已出現(xiàn)明顯改變，一定程度上增加治療難度，影響病情轉(zhuǎn)歸[8-9]。張燦花[10]等通過觀察哮喘患者治療預(yù)后發(fā)現(xiàn)，92例哮喘患者預(yù)后不良（復(fù)發(fā)）占30.43%。本研究中，納入的98例哮喘患者，治療無效率占28.57%，進(jìn)一步說明哮喘患者治療效果仍有待提升，探索與其療效有關(guān)的指標(biāo)可能利于改善患者治療預(yù)后。

EOS參與氣道炎癥反應(yīng)的重要指標(biāo)，相關(guān)研究指出，EOS是反映哮喘患者糖皮質(zhì)激素治療反應(yīng)性的敏感指標(biāo)[11]。但本研究中，EOS水平變化與健脾補(bǔ)肺方聯(lián)合多索茶堿治療無明顯關(guān)聯(lián)，可能與治療藥物不同有關(guān)，具體原因仍需進(jìn)一步研究。TGF-β1可通過促進(jìn)細(xì)胞生長、分化等機(jī)制，改變氣道結(jié)構(gòu),促進(jìn)氣道重塑[12]；IL-8可通過激活EOS、中性粒細(xì)胞等誘發(fā)氣道炎癥反應(yīng)，損傷氣道上皮黏膜[13]。結(jié)合TGF-β1、IL-8與哮喘發(fā)病機(jī)制推測，二者可能通過加重哮喘病情，影響其治療效果。本研究結(jié)果顯示，治療無效組血清TGF-β1、IL-8水平高于治療有效組，初步說明血清TGF-β1、IL-8水平與哮喘治療效果有關(guān)。

為證實(shí)上述推測，本研究經(jīng)Logistics回歸分析顯示，血清TGF-β1、IL-8過表達(dá)與哮喘患者健脾補(bǔ)肺方聯(lián)合多索茶堿治療無效有關(guān)。分析原因在于：TGF-β1可誘導(dǎo)纖維細(xì)胞分化為肌成纖維細(xì)胞,若TGF-β1水平持續(xù)升高可導(dǎo)致氣道纖維化,進(jìn)而造成氣道重塑，導(dǎo)致氣道不可逆損傷，最終加重哮喘病情，影響治療效果[14]。研究顯示，TGF-β1過表達(dá)可促進(jìn)上皮細(xì)胞凋亡，加速氣道重塑進(jìn)展，其水平與哮喘病情呈正相關(guān)[15]。另有研究指出，TGF-β1過表達(dá)可抑制巨噬細(xì)胞、輔助性T細(xì)胞等免疫細(xì)胞生長，導(dǎo)致免疫功能下降，一定程度上加重哮喘病情，增加治療難度[16]?？梢?，血清TGF-β1過表達(dá)與哮喘患者治療無效有關(guān)。IL-8可介導(dǎo)中性粒細(xì)胞參與呼吸道疾病，IL-8過表達(dá)可激活中性粒細(xì)胞并增加細(xì)胞黏附性，使其黏附與氣道上皮黏膜，使其脫顆粒并釋放組胺，啟動炎癥級聯(lián)反應(yīng)，加重氣道黏膜損傷，進(jìn)而加重哮喘病情進(jìn)展[17]。楊萬勇[18]等研究顯示，IL-8過表達(dá)可促進(jìn)EOS、中性粒細(xì)胞等遷移至炎癥部位，協(xié)同參與哮喘病情進(jìn)展。由此可見，血清IL-8過表達(dá)可通過加重氣道炎癥反應(yīng)，加重哮喘病情，增加治療無效風(fēng)險(xiǎn)。

本研究最后通過繪制ROC曲線圖驗(yàn)證上述研究結(jié)果，結(jié)果顯示，血清TGF-β1、IL-8單獨(dú)及聯(lián)合預(yù)測哮喘患者治療無效風(fēng)險(xiǎn)均有一定價(jià)值，且當(dāng)二者cut-off值分別取694.470（ng/L）、16.720（ng/ml）時(shí)，可獲取最佳預(yù)測價(jià)值。對此建議，針對哮喘患者可于治療期間定期檢測血清TGF-β1、IL-8水平，或可將TGF-β1、IL-8作為治療靶點(diǎn)之一，以延緩氣道重塑、減輕氣道炎癥反應(yīng)，進(jìn)而改善哮喘病情，降低治療無效風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，血清TGF-β1、IL-8過表達(dá)與哮喘患者健脾補(bǔ)肺方聯(lián)合多索茶堿治療無效有關(guān)，檢測二者水平對預(yù)測哮喘治療無效風(fēng)險(xiǎn)有一定價(jià)值，臨床可將血清TGF-β1、IL-8作為治療靶點(diǎn)之一，以延緩氣道重塑、減輕氣道炎癥反應(yīng)，改善治療效果。