促腎上腺皮質(zhì)激素對嬰兒痙攣癥患兒淋巴細(xì)胞亞群和免疫球蛋白的影響

蔡文仙 孫廣斐 鄭欽亮 李秋波

濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院兒科 272000

嬰兒痙攣癥是年齡依賴性癲癇性腦病，可能與圍生期腦損傷、先天性腦發(fā)育異常、基因改變［1-2］及遺傳代謝?。?］有關(guān)。其發(fā)病機制至今尚未完全闡明，目前國內(nèi)外學(xué)者已對其發(fā)病機制進(jìn)行了大量假說［4-5］，沒有一種假說能完全解釋嬰兒痙攣癥的發(fā)病過程。隨著免疫學(xué)研究的深入，發(fā)現(xiàn)免疫調(diào)節(jié)失衡可能參與了嬰兒痙攣癥的發(fā)病過程［6-7］。本研究觀察嬰兒痙攣癥患兒淋巴細(xì)胞亞群和免疫球蛋白的特點，以及促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）治療前后的變化，探討免疫機制在嬰兒痙攣癥發(fā)病中的作用及ACTH 對免疫功能的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014 年10 月至2019 年10 月于本院住院治療的40 例嬰兒痙攣癥患兒為病例組，臨床特點符合嬰兒痙攣癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)［8］?；純簾o心肝腎功能不全，近期無感染病史、無結(jié)締組織病及免疫缺陷病史，均未予抗癲癇藥物治療。選取同期兒科門診健康體檢兒童40 例為正常對照組，均無神經(jīng)系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)疾病史。父母均知情同意，并經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核。病例組男26 例，女14 例；年齡范圍為4～15 個月，年齡（7.58±2.08）個月；對照組男23 例，女17 例；年齡范圍為6～14 個月，年齡（8.04±2.57）個月，病例組與對照組的性別構(gòu)成比（χ2=0.47，P＞0.05）、年齡（t=0.88，P＞0.05）比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 方法

1.2.1 給藥方法 所有患兒入院后均給予ACTH治療（25 IU，上海第一生化藥業(yè)有限公司），每日25 IU，加入100 ml 5%葡萄糖溶液中泵入6～8 h，連用2周，若治療有效，則維持此劑量；若治療無效，則ACTH 增加至40 IU/d，繼續(xù)用2 周，總療程為4 周；之后口服潑尼松2 mg/（kg·d），逐漸減停，潑尼松總療程為3個月。

1.2.2 標(biāo)本收集 嬰兒痙攣癥患兒予ACTH 治療前及治療4 周后分別采血，健康對照組兒童抽血1 次即可，所用采血均于上午8：00進(jìn)行，抽外周靜脈血5 ml，經(jīng)乙二胺四乙酸抗凝后，3 000 r/min離心10 min，保存于-20℃待測。

1.3 血清免疫指標(biāo)水平測定 CD3+T淋巴細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T 淋巴細(xì)胞、CD19+B 淋巴細(xì)胞、CD20+B 淋巴細(xì)胞和CD4+/CD8+值的測定使用EpicsXL-MCL 流式細(xì)胞儀（美國Backman Coulter 公司生產(chǎn)）檢測。采用ADVIA2400生化分析儀（德國西門子公司）檢測血清免疫球蛋白IgA、IgM、IgG水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSSl7.0 進(jìn)行統(tǒng)計分析，兩組兒童的年齡、CD3+T 淋巴細(xì)胞、CD4+T 淋巴細(xì)胞、CD8+T 淋巴細(xì)胞、CD19+B 淋巴細(xì)胞、CD20+B 淋巴細(xì)胞和CD4+/CD8+值符合正態(tài)分布以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，病例組治療前后采用配對樣本t檢驗，病例組與對照組的比較采用獨立樣本t檢驗，性別構(gòu)成比采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ACTH 治療前兩組嬰幼兒血清免疫指標(biāo)水平比較 嬰兒痙攣癥患兒治療前CD8+T淋巴細(xì)胞水平較對照組明顯降低（P＜0.01），CD4+/CD8+值較對照組增高（P＜0.05）；嬰兒痙攣癥患兒治療前CD3+T 淋巴細(xì)胞水平、CD4+T 淋巴細(xì)胞水平、CD19+B 淋巴細(xì)胞水平及CD20+B 淋巴細(xì)胞水平與正常對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）；嬰兒痙攣癥患兒治療前免疫球蛋白水平與對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），具體見表1。

2.2 ACTH 治療前后嬰兒痙攣癥患兒血清免疫指標(biāo)比較 嬰兒痙攣癥患兒治療后CD8+T淋巴細(xì)胞水平較對治療前升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；CD4+T 淋巴細(xì)胞水平較治療前降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；CD4+/CD8+值較治療前降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；嬰兒痙攣癥患兒治療前后CD3+T淋巴細(xì)胞水平、CD19+B淋巴細(xì)胞水平及CD20+B 淋巴細(xì)胞水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），嬰兒痙攣癥患兒治療前后免疫球蛋白水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），詳見表2。

表1 ACTH治療前兩組嬰幼兒血清免疫指標(biāo)水平比較（）

表1 ACTH治療前兩組嬰幼兒血清免疫指標(biāo)水平比較（）

表2 病例組患兒ACTH治療前后血清免疫指標(biāo)水平比較（,n=40）

表2 病例組患兒ACTH治療前后血清免疫指標(biāo)水平比較（,n=40）

2.3 ACTH 治療嬰兒痙攣癥患兒的臨床療效 40例嬰兒痙攣癥患兒經(jīng)ACTH 治療后26 例患兒痙攣發(fā)作完全停止，12 例患兒治療后發(fā)作次數(shù)減少，2 例患兒發(fā)作無減少。期間6 例患兒出現(xiàn)上呼吸道感染，所有患兒均未出現(xiàn)低鉀血癥、高血壓及腹瀉等癥狀。24 例患兒清醒期和睡眠期高度失律均完全消失，其中16 例患兒可見局灶性放電。12 例患兒睡眠期仍可見高度失律圖形，但清醒期無高度失律圖形。4例患兒醒睡各期均可見高度失律圖形。

3 討論

嬰兒痙攣癥是一種難治性癲癇綜合征，常伴有精神運動發(fā)育停滯或倒退［9-10］。發(fā)病年齡高峰期為4～6 個月，男性多見［11］。

嬰兒痙攣癥發(fā)病機制尚不完全清楚，免疫因素可能參與其發(fā)病。嬰兒痙攣癥細(xì)胞因子研究結(jié)果存在不確定性，陳輝等［12］研究發(fā)現(xiàn)嬰兒痙攣癥患兒潑尼松治療前血清IL-2R、IL-8、TNF-α 水平高于健康對照組兒童。而Haginoya 等［13］測定了嬰兒痙攣癥患兒腦脊液中IL-1α、IL-6 及TNF-α 含量，與正常對照組兒童比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。Shiihara等［6］測定了嬰兒痙攣癥患兒淋巴細(xì)胞亞群及血清細(xì)胞因子的含量，嬰兒痙攣癥患兒ACTH 治療前CD3+CD25+淋巴細(xì)胞，CD19+淋巴細(xì)胞，及CD19+CD95+淋巴細(xì)胞含量與正常對照組兒童比較，明顯下降；而血清白細(xì)胞介素（IL）-1受體拮抗劑與正常對照組兒童比較，顯著升高；癥狀性嬰兒痙攣癥患兒與隱源性嬰兒痙攣癥患兒相比差異不明顯，提示嬰兒痙攣癥患兒存在免疫功能紊亂。CD3+T淋巴細(xì)胞是所有T 細(xì)胞表面的共同標(biāo)志，反映機體細(xì)胞免疫的功能狀態(tài)。生理狀態(tài)下，CD4+/CD8+值動態(tài)平衡。體液免疫是B 淋巴細(xì)胞受到抗原刺激后，產(chǎn)生與相應(yīng)抗原結(jié)合的抗體，引發(fā)特異性免疫。B 淋巴細(xì)胞可以分泌調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子，CD19+及CD20+為B 淋巴細(xì)胞表面抗原，在B 淋巴細(xì)胞的增殖分化中起重要作用。

本研究通過對淋巴細(xì)胞亞群及免疫球蛋白的檢測來反映機體的體液免疫及細(xì)胞免疫狀態(tài)。結(jié)果顯示，嬰兒痙攣癥患兒治療前CD8+T 淋巴細(xì)胞水平較對照組降低，CD4+/CD8+值較對照組增高。與正常對照組比較，嬰兒痙攣癥患兒治療前免疫球蛋白水平與對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，提示嬰兒痙攣癥患兒存在T淋巴細(xì)胞的過度活化。

免疫治療對于嬰兒痙攣癥患兒有良好的效果，陳輝等［12］研究發(fā)現(xiàn)嬰兒痙攣癥患兒潑尼松治療后血清IL-2R、IL-8、TNF-α水平，以及CD4+比例、CD4+/CD8+比值均較治療前明顯下降，CD8+比例較治療前升高。促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（CRH）廣泛存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)，有促驚厥的作用。嬰兒痙攣癥患兒腦內(nèi)CRH 濃度增高，ACTH 可能通過抑制CRH 的分泌，起到抗驚厥的作用［14-15］。本研究顯示40 例嬰兒痙攣癥患兒經(jīng)ACTH 治療后，26 例患兒痙攣發(fā)作完全停止，24例患兒清醒期和睡眠期高度失律均完全消失，ACTH對嬰兒痙攣癥患兒有良好的治療效果。

嬰兒痙攣癥患兒治療后CD8+T淋巴細(xì)胞水平較對治療前升高，CD4+T淋巴細(xì)胞水平及CD4+/CD8+值較治療前降低且差異有統(tǒng)計學(xué)意義。與Shiihara 等［6］研究一致，提示ACTH 可改善嬰兒痙攣癥患兒過度活化的T細(xì)胞免疫，從而控制嬰兒痙攣癥發(fā)作。治療前后免疫球蛋白水平無明顯改變，提示ACTH可對體液免疫無明顯影響。

ACTH 治療方案潛在的不良事件包括感染、高血壓、水電解質(zhì)紊亂、誘發(fā)眼部疾病、胃腸功能紊亂、過敏、肥胖及精神異常等［16］。本組6 例患兒出現(xiàn)院內(nèi)感染，增加了醫(yī)療費用，給患兒帶來了痛苦。ACTH 治療時間較長，應(yīng)加強消毒隔離，注意手衛(wèi)生，減少院內(nèi)感染。

綜上所述，嬰兒痙攣癥患兒存在T 淋巴細(xì)胞的過度活化。痙攣發(fā)作本身引起免疫功能紊亂，還是免疫功能紊亂引起痙攣發(fā)作，尚需進(jìn)一步研究。ACTH可抑制過度的免疫炎癥反應(yīng)，從而控制痙攣發(fā)作。免疫機制的進(jìn)一步研究，對于了解嬰兒痙攣癥的發(fā)病、改善其預(yù)后有重要的意義。

利益沖突：作者已申明文章無相關(guān)利益沖突。