新生兒遺傳代謝性疾病篩查中串聯(lián)質(zhì)譜儀的應(yīng)用探究

賈楠楠

（泰安市婦幼保健院，山東 泰安 271000）

隨著我國(guó)社會(huì)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，人們對(duì)健康問(wèn)題的重視程度也在不斷加深，同時(shí)科技水平的提升促進(jìn)了醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的蓬勃發(fā)展，所以如何將新生人口的素質(zhì)進(jìn)一步提升成為當(dāng)下預(yù)防醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的熱點(diǎn)所在。相關(guān)研究結(jié)果表明，新生兒遺傳代謝性疾病是導(dǎo)致身體素質(zhì)較差的主要因素，對(duì)其原因進(jìn)行分析，是因?yàn)檫z傳代謝性疾病會(huì)導(dǎo)致新生兒的激素水平與生化水平發(fā)生改變，所以需要對(duì)新生兒進(jìn)行相應(yīng)的篩查工作來(lái)明確診斷，從而盡早地給予針對(duì)性的治療措施，對(duì)新生兒的健康成長(zhǎng)有著重要的現(xiàn)實(shí)意義。本文的研究對(duì)象為常規(guī)篩查的新生兒，共200例，均為我院2020年1月～2021年1月期間進(jìn)行，以此來(lái)研究分析串聯(lián)質(zhì)譜儀的作用與效果，現(xiàn)報(bào)道結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 基礎(chǔ)資料

將我院接受常規(guī)篩查的200例新生兒作為研究對(duì)象，時(shí)間為2020年1月～2021年1月期間，男女比例為130:70，年齡為1.5～6個(gè)月，平均年齡為（3.2±0.57）個(gè)月，研究已經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)通過(guò)，并且新生兒家屬知曉此次研究并簽署同意書(shū)。研究新生兒均疑似遺傳代謝性疾病，包括抽搐、生長(zhǎng)遲緩、肝脾腫大、肌張力不足、智力發(fā)育不良、精神行為反常、反復(fù)性嘔吐、生化指標(biāo)異常等。

1.2 試劑與儀器

（1）試劑：肉堿（游離肉堿，乙酰肉堿、丙酰肉堿、丙二酰肉堿、丁酰肉堿、3-羥甲基丁酰肉堿、異戊酰肉堿、異戊烯肉堿、異戊二酰肉堿、3-羥基異戊酰肉堿、己酰肉堿、己二酰肉堿、辛酰肉堿、辛烯酰肉堿、葵酰肉堿、葵烯酰肉堿、葵二烯酰肉堿、十二碳酰肉堿、十二碳烯酰肉堿、十四碳酰肉堿、十四碳烯酰肉堿、十四碳二烯酰肉堿、3-羥基十四碳酰肉堿、十六碳酰肉堿、十六碳烯酰肉堿、3-羥基十六碳酰肉堿、3-羥基十六碳烯酰肉堿、十八碳酰肉堿、十八碳烯酰肉堿、十八碳二烯酰肉堿、3-羥基十八碳酰肉堿、3-羥基十八碳烯酰肉堿）、非衍生化多種氨基酸（丙氨酸、瓜氨酸、精氨酸、甘氨酸、亮氨酸/異亮氨酸、蛋氨酸、鳥(niǎo)氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、纈氨酸）、琥珀酰丙酮（琥珀酰丙酮）串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定試劑盒均為美國(guó)PerkinElmer公司生產(chǎn)，萃取質(zhì)控血片以及新生兒濾紙干血片后直接上機(jī)測(cè)定。

（2）儀器：質(zhì)譜儀、高效液相儀、自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)均由美國(guó)Waters公司提供。

1.3 實(shí)施方法

使用一次性采血針刺新生兒足跟進(jìn)行采集，深度不超過(guò)3mm，將采集后的血液滴在Scheicherand Schuell 903濾紙樣本卡，然后在陰涼處將樣本陰干。濾紙干血片中的?；鈮A、游離肉堿、氨基酸、琥珀酰丙酮萃取由25種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸、?；鈮A、琥珀酰丙酮內(nèi)標(biāo)的溶劑進(jìn)行，然后通過(guò)MS/MS系統(tǒng)展開(kāi)相關(guān)分析。被測(cè)物質(zhì)分子被質(zhì)譜電離成各種質(zhì)荷比（m/z）不同的帶電離子，根據(jù)m/z大小，將這些電粒子在時(shí)間或者空間上產(chǎn)生分離，最終形成質(zhì)譜圖譜。對(duì)每個(gè)分析物以及與之相對(duì)應(yīng)的同位素內(nèi)標(biāo)離子峰強(qiáng)度進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)已知的濃度內(nèi)標(biāo)便能夠?qū)⑺鶞y(cè)樣本的各分析物濃度進(jìn)行自動(dòng)計(jì)算。具體實(shí)驗(yàn)步驟如下：通過(guò)3.2mm直徑的打孔器在濾紙血片上取樣，并將其在96孔U型板中放置，同時(shí)，將100μL內(nèi)標(biāo)工作液在每個(gè)孔內(nèi)加入，利用黏性封膜將其封套密封后，放置恒溫震蕩孵育器中，將其震蕩5min，溫度為45℃，605～750r/min。孵育結(jié)束后，將育萃取液75μL轉(zhuǎn)移到V型底檢測(cè)板內(nèi)，使用鋁膜將其封蓋，然后上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。

2 結(jié)果

200例血液標(biāo)本中，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的有3例標(biāo)本，占比為1.5%，2例為甲基丙二酸尿癥，1例為異戊酸血癥。

3 討論

臨床上有很多遺傳代謝性疾病種類(lèi)，就目前而言，已知的遺傳代謝性疾病種類(lèi)就有1000多種，許多新生兒有著非特異性臨床表現(xiàn)，比如，嘔吐、抽搐、嗜睡、酸中毒、發(fā)育遲緩、肝脾腫大、精神行為反常、肌張力不足等。篩查遺傳代謝性疾病的方法有很多，在以往多采取Guthrie細(xì)菌抑制法、放射免疫分析法等，這些方法在臨床上能夠起到一定的應(yīng)用效果，但這些方法通常只能夠進(jìn)行一種疾病的篩查工作，隨著檢查項(xiàng)目的不斷增加，使得傳統(tǒng)的篩查方法工作量增加，從而會(huì)不斷提高篩查成本，并且工作效率較低，因此難以滿(mǎn)足大規(guī)模篩查遺傳代謝性疾病的需求。換而言之，傳統(tǒng)篩查技術(shù)所體現(xiàn)出的成本高、工作量大等問(wèn)題，已經(jīng)難以滿(mǎn)足人們的實(shí)際需求，因此，選擇新型有效的手段對(duì)遺傳代謝性疾病進(jìn)行篩查就顯得尤為重要。

有資料顯示，我國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院對(duì)串聯(lián)質(zhì)譜分析方法展開(kāi)了相關(guān)研究，其研究對(duì)象為172例新生兒，在分析新生兒血液樣本中所含有的?；鈮A譜與氨基酸譜相關(guān)濃度后，其結(jié)果顯示陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果為6.4%，11例新生兒被檢測(cè)出來(lái)，其中有機(jī)酸代謝類(lèi)疾病患兒6例，氨基酸代謝類(lèi)疾病3例，脂肪酸代謝類(lèi)疾病2例。同時(shí)，有相關(guān)研究表明，串聯(lián)質(zhì)譜所檢測(cè)的遺傳代謝性疾病可以達(dá)30多種，并且具有良好的檢測(cè)效果。串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)所使用的技術(shù)原理主要是檢測(cè)樣品物質(zhì)所具有的質(zhì)荷，從而定量分析以及定性分析樣品物質(zhì)，與傳統(tǒng)技術(shù)相比，串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)是能夠檢測(cè)血液樣本中的70多種氨基酸與酰基肉堿，因此，能夠快速診斷與篩查30多種脂肪酸、氨基酸、有機(jī)酸類(lèi)代謝性疾病。串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)在如今已經(jīng)得到了世界上多個(gè)國(guó)家的廣泛應(yīng)用，是能夠在早期發(fā)現(xiàn)遺傳代謝類(lèi)疾病，我國(guó)于2002年開(kāi)始使用該技術(shù)，對(duì)于新生兒遺傳代謝類(lèi)疾病的篩查與診斷有著顯著進(jìn)步與提高。串聯(lián)質(zhì)譜儀雖然有著許多優(yōu)勢(shì)，但依舊存在不足，因此，難以將傳統(tǒng)檢查方法完全取代，比如，質(zhì)譜儀有著昂貴的價(jià)格，維持和操作串聯(lián)質(zhì)譜儀的費(fèi)用相對(duì)較高等。臨床上對(duì)串聯(lián)質(zhì)譜儀的機(jī)理認(rèn)知在逐漸加深，同時(shí)，該技術(shù)的運(yùn)用也逐漸趨于成熟，我國(guó)相對(duì)經(jīng)濟(jì)較發(fā)達(dá)的地區(qū)也正在逐漸開(kāi)展串聯(lián)質(zhì)譜儀來(lái)篩查新生兒遺傳代謝性疾病，但要想構(gòu)建完善的串聯(lián)質(zhì)譜儀篩查規(guī)范以及相關(guān)檢測(cè)疾病的診治常規(guī)，就需要將二級(jí)檢測(cè)方案應(yīng)用其中，包括降低假陽(yáng)性、更多標(biāo)志物、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值篩查提升等，串聯(lián)質(zhì)譜儀的不斷穩(wěn)定與成熟是能夠提高診斷準(zhǔn)確率，進(jìn)而獲得更良好的社會(huì)效益。綜上所述，串聯(lián)質(zhì)譜儀的使用是能夠?qū)π律鷥哼z傳代謝性疾病起到良好的篩查作用，其應(yīng)用價(jià)值良好，能夠有效保障新生兒的健康發(fā)育。