閻峻 趙磊 南開大學(xué)附屬醫(yī)院(天津市第四醫(yī)院) (天津 300222)
內(nèi)容提要: 尿液分析為目前臨床應(yīng)用范圍最大的實驗室檢查項目之一,在科學(xué)技術(shù)不斷改革的背景之下,尿液檢測手段持續(xù)創(chuàng)新,尿液全自動分析儀得以大量應(yīng)用于臨床實驗室中。利用尿液分析儀進(jìn)行尿液常規(guī)檢驗為一種通過科學(xué)手段對患者尿液里的各種生化指標(biāo)和有形成分進(jìn)行檢查的方法,其具有便捷、快速以及高靈敏的特點。在使用尿液分析儀進(jìn)行檢測時,應(yīng)該按照操作步驟嚴(yán)格規(guī)范操作流程,同時,對尿液分析儀的保養(yǎng)也不能忽視,只有這樣才能保證尿液分析儀的正常運行,檢測結(jié)果準(zhǔn)確。文章基于尿液分析儀的組成結(jié)構(gòu),工作原理,對其應(yīng)用于臨床檢測的過程和指標(biāo)分析及尿液分析儀繼續(xù)應(yīng)用于醫(yī)學(xué)的前景和問題進(jìn)行剖析,分析本院尿液分析儀的使用情況,并以此探究其進(jìn)展。
尿液分析儀是測定尿液中某些化學(xué)成分的自動化儀器,也是臨床醫(yī)學(xué)實驗室自動化檢測的重要工具。經(jīng)典的干化學(xué)條帶尿分析儀是通過電腦程序設(shè)定來收集并分析試帶上試劑塊的顏色信息,通過一系列信號轉(zhuǎn)化最后讀取并輸出測定的尿液中化學(xué)成分含量[1]。但對于尿液中有形成分的識別、計數(shù)仍需依靠顯微鏡檢查,程序復(fù)雜、結(jié)果重復(fù)性差,對于檢驗人員素質(zhì)要求較高,其使用和操作流程也需要遵守嚴(yán)謹(jǐn)和嚴(yán)密的原則,才能使尿液檢測結(jié)果更準(zhǔn)確。
本院儀器采用優(yōu)利特,型號:US-1680,干化學(xué)和流式細(xì)胞計數(shù)一體機(jī)和合格試紙嚴(yán)格按照步驟說明操作,每天利用質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控,能隨時同患者樣本檢查。收集患者樣本10mL新鮮尿液。檢驗步驟:將樣本吸取于專用試管內(nèi),放置在儀器試管架上,置于進(jìn)樣艙內(nèi),設(shè)置標(biāo)本號,儀器自動分析。
從結(jié)果中不難看出,對于尿液分析方法所涉及的蛋白質(zhì)、紅細(xì)胞、亞硝酸鹽和白細(xì)胞均為陰性的樣本,不需要顯微鏡檢查(尿液分析方法和人工方法的結(jié)果大致一致)。但尿液、紅細(xì)胞、白細(xì)胞和蛋白質(zhì)中的糖分都低于90%,這表明存在多種干擾成分。
試紙條需要根據(jù)操作規(guī)則然后按照要求把握浸泡的時限,然后再進(jìn)行分析,樣本維持新鮮。夏季收到標(biāo)本之后需0.5h進(jìn)行測定。
在尿液當(dāng)中發(fā)現(xiàn)噴射物時,尿液分析儀不太會檢測到假陰性,尿蛋白的定性檢測在醋酸加熱法以及硫酸法里都呈陽性。試驗條帶法下的球蛋白靈敏度僅有1/5~1/100,這同時是假陰性的因素。高劑量青霉素的注射更會顯示出假陰性。結(jié)果呈現(xiàn)出,大多數(shù)患者都注射了高劑量青霉素。當(dāng)患者尿液pH>8容易出現(xiàn)假陽性[2]。
在這個實驗中,有2例患者在診所中維生素C使用量為高劑量,而在停止用藥之后實施了葡萄糖陰性測試,結(jié)果重新檢查顯示陽性。在諸多患者中,尿液中包含有一定量的過氧化氫,這個過氧化氫會使測試帶變色,也是判定假陽性的重要依據(jù)。
通常情況下,異常的尿液顏色如黃疸,可測尿比重偏低。尿液本身的pH對尿比重影響較大,在其pH<5時結(jié)果偏高,pH>8時結(jié)果偏低[3]。
通常情況,發(fā)生尿路感染會使大量細(xì)菌產(chǎn)生過氧化氫酶,其產(chǎn)生會造成假陽性相對較高。利福平藥物能夠降低紅細(xì)胞的反應(yīng)性,可使檢測結(jié)果更低。
某些神經(jīng)藥物比如鹽酸帕羅西丁(興奮劑、神經(jīng)劑)會導(dǎo)致假陽性。
當(dāng)尿液中的甲醛或亞硝酸鹽防腐劑超過0.05g/L時,就會出現(xiàn)假陰性,當(dāng)存在內(nèi)源性干擾物質(zhì)如卟啉時,就會出現(xiàn)假陽性。在這個實驗中,2例血尿患者的尿膽素原呈假陽性,離心后呈陰性。顯微鏡下測定尿膽紅素和尿膽紅素原陽性的200例尿樣,加入100g/L氧化鋇溶液,離心沉淀除去膽紅素,收集上清液作尿液檢查。初檢陰性4例[4]。
尿樣本務(wù)必為新鮮的,否則會出現(xiàn)假陰性。
放置期間過長以及尿污染會造成假陽性。
通常情況試驗條帶有局限性,只能測量中性粒細(xì)胞中的酯酶,對淋巴細(xì)胞基本不反應(yīng)。當(dāng)患者的尿液里以淋巴細(xì)胞為主導(dǎo)時,對淋巴細(xì)胞沒有反應(yīng)。在患者尿液中以淋巴細(xì)胞為主導(dǎo)時,很容易產(chǎn)生假陽性??梢宰⒁獾剑瑸榱双@得準(zhǔn)確的結(jié)果,尿液分析儀的條件是:儀器平穩(wěn)度高,測試卡質(zhì)量過硬,使用一次性尿液杯,尿液必須保持新鮮。測試帶的盒子必須用不潮濕的材料遮蓋和保存。另外,藥物對測試結(jié)果的影響不容忽視,需認(rèn)真觀察尿液的顏色,并與患者服用藥物對結(jié)果可能產(chǎn)生的影響結(jié)合,如有必要,應(yīng)在停藥后再進(jìn)行一次檢查,以驗證陰性結(jié)果[5]。
近年來隨著科技進(jìn)步,尿液全自動分析儀開始在臨床實驗室大量普及,其基本結(jié)構(gòu)為試帶、機(jī)械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)、高清視頻采集系統(tǒng)、輸入和輸出系統(tǒng)等,其在自動完成進(jìn)樣及干化學(xué)條帶自動識別分析的基礎(chǔ)上,還具有流式細(xì)胞計數(shù)功能和通過軟件進(jìn)行圖像識別的有形成分識別功能,大大提高了尿常規(guī)檢查的臨床參考價值,可節(jié)省大量人工操作,減少檢驗時間,提高準(zhǔn)確性和重復(fù)性,體外診斷設(shè)備發(fā)展迅速,不同領(lǐng)域的新技術(shù)不斷出現(xiàn),新產(chǎn)品每天都在變化。臨床決策的調(diào)查顯示,臨床決策70%取決于測試的測試儀器,尿液常規(guī)是三大常規(guī)檢驗之一,對于臨床診斷、療效和預(yù)后的評估,觀察各種泌尿系統(tǒng)疾病、消化系統(tǒng)、心血管和內(nèi)分泌系統(tǒng)和人口健康篩查有重要價值。由于樣本易得、保留簡單、實際測試以及結(jié)果客觀,不論醫(yī)院大小都可以用尿液分析儀進(jìn)行尿液測試。檢測主要包括干尿的成分,如紅細(xì)胞和白細(xì)胞、模具、晶體、真菌孢子等。臨床以及科學(xué)研究人員十分看重尿液分析儀的性能參數(shù),如準(zhǔn)確性、檢測速度與預(yù)防交叉感染。雖然有許多尿分析儀制造商和品牌,但它們在測試速度和準(zhǔn)確性方面有自己的特點,一般分為半自動尿分析儀和自動尿分析儀。但基于干化學(xué)條帶法的檢驗只是基礎(chǔ),尿有形成分分析是其重要的補(bǔ)充和完善,作為顯微鏡檢查的替代和發(fā)展,具有流式細(xì)胞計數(shù)、高清視頻采集以及自動圖像識別的全自動尿儀是未來的重要發(fā)展方向。
現(xiàn)代社會光學(xué)、電子和計算機(jī)技術(shù)的不斷發(fā)展,諸多新技術(shù)正在逐步廣泛地應(yīng)用于尿液分析儀,參與分析各項的技術(shù)指標(biāo)也在隨之改進(jìn)。因此,增加證據(jù)的種類成為尿液分析的重中之重,為了提高檢測的準(zhǔn)確性,不斷地引進(jìn)先進(jìn)技術(shù),除了現(xiàn)階段比較常見到的CCD和CIS技術(shù)外,還有許多儀器使用多波長測量技術(shù)(通常是3~6種波長),為每個檢測元件設(shè)置檢測光波長可以提高檢測特異性。一些分析儀正在逐步完善臨床診斷和治療所需的尿液證據(jù)。例如,拜耳公司在檢測微白蛋白的成分將其分成高濃度白蛋白以及低濃度白蛋白,用于進(jìn)行早期糖尿病與腎病的篩查。監(jiān)測西門Clinitek現(xiàn)狀尿液分析儀能夠采用CCD技術(shù)檢測熒光信號,同時還可以做出快速免疫測定項目,如StripA(鏈球菌組)、H.幽門螺桿菌(幽門螺桿菌)、單聲道(Monam)、Chlamydia(Chlamydia)等。使用皮帶運輸機(jī)制讓攜帶自動組裝和職能的樣品抽樣,抽樣、清潔、飲食的條帶的測試樣本,收集的廢液體和很大改進(jìn)了尿液分析儀的測試速度[6]?;ヂ?lián)網(wǎng)信息技術(shù)的應(yīng)用將使尿分析器的自動化和質(zhì)量控制水平更高,這會相對的保證檢測結(jié)果的精確性,然后滿足臨床檢測技術(shù)識別的目的。尿分析儀為一種半定量檢測工具,其具備定量檢測以及定性評估,因此監(jiān)測其質(zhì)量是十分重要的。家庭醫(yī)院的規(guī)模以及資金水平差別較大。有許多類型的尿液分析儀,產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊,對尿液檢測結(jié)果產(chǎn)生了負(fù)面影響。近些年,尿液分析儀在使用過程中的缺陷也不斷暴露在廣大的技術(shù)人員面前,在市場觀察員對尿干化學(xué)分析儀器的質(zhì)量控制的前提下,一些小型醫(yī)院使用的尿液分析儀的方法得以改進(jìn),如尿液檢測中最先進(jìn)的儀器也配備了液體的質(zhì)量控制測試。儀器和控制標(biāo)準(zhǔn)的敏感性的不同,生產(chǎn)商的不同,使結(jié)果尿液分析醫(yī)院之間不能相互認(rèn)可,患者必須接受轉(zhuǎn)院的新測試時,會導(dǎo)致新的醫(yī)療費用和資源的浪費。因此,進(jìn)一步加強(qiáng)尿檢的質(zhì)量控制是一個緊迫的問題。
尿液分析儀是一種精密電子光學(xué)儀器,使用時要細(xì)心維護(hù),不能長時間陽光照射,不能在溫度和濕度過大環(huán)境中使用。操作要按照步驟進(jìn)行,維護(hù)儀器正常程序。每天用完要進(jìn)行灰塵擦拭,清水沖洗。按照儀器說明書每周或者每月定期保養(yǎng)。
①保持儀器永久清潔,才能確保儀器正常良好運行。②確保用沒有污染的取樣杯。③確保用新鮮的混勻尿液,樣本取完后不要超2h。④不同類型和廠家的尿液分析儀要使用不同的尿試帶,在試帶從冷藏溫度變常溫室溫時,切勿打開裝有試劑帶的瓶口,每次取完應(yīng)立即蓋上瓶蓋,防止試劑與空氣接觸久了變質(zhì)。⑤試劑帶入尿樣時間為2s,試劑帶多出的尿液標(biāo)本用吸紙吸走,保證所有試劑塊和空白塊都浸入尿液中。⑥尿液分析儀使用的最適合溫度為20~26°C。尿液樣本和試帶也最后維持這個溫度。
綜上所述,常規(guī)尿檢是目前最常用的臨床檢查方法。它是身體健康的客觀反映指標(biāo)。對泌尿系統(tǒng)以及糖尿病等疾病的臨床篩查具備十分重要的價值,也能夠為理解病理過程提供重要和可靠的線索。目前,主要醫(yī)院通常使用全自動尿液分析儀,而不是傳統(tǒng)的手工檢測方法。全自動尿液分析儀可以同時檢測多個元素。它的優(yōu)點是快速、簡單、敏感等。對于大型醫(yī)院來說,這是一項艱巨的工作。尿液檢測提供了一種快速、方便的檢測方法,但是可以從測試結(jié)果中看到,儀器測試還沒有達(dá)到完全精確的水平[6-8]。尿檢結(jié)果受到很多因素的影響,尿液樣本也容易受到各種復(fù)雜因素的影響。這些影響的總結(jié)如下:尿蛋白對尿樣本pH的影響敏感,導(dǎo)致假陽性或假陰性。因此,應(yīng)注意尿液樣本的pH。當(dāng)尿液中含有大量白細(xì)胞時,它也會導(dǎo)致尿蛋白的假陽性。對神秘血液的檢測表明,尿液分析儀比人工方法更敏感。原因是在RBC被破壞后,尿液中的Hb仍然可以在尿樣中檢測到,而在顯微鏡下很難看到紅細(xì)胞。綜上所述,可知尿液分析儀法對于測定的結(jié)果有利有弊,尿蛋白和隱血在尿液分析儀中的陽性率高于手工顯微鏡法。主要原因是手工顯微鏡法只能以完整的紅細(xì)胞為標(biāo)準(zhǔn),而尿液分析儀法則避免了這一點。在應(yīng)用過程中,要求每位操作人員對自動化儀表的工作原理、操作注意事項、相關(guān)影響因素等方面有全面、充分的了解,確保自動化儀表的正確運行。該分析儀在尿常規(guī)檢測的實際應(yīng)用中不能達(dá)到100%的檢出率。在現(xiàn)階段,完全取代顯微鏡的手工方法是不夠的[9,10]。全自動分析儀在尿常規(guī)檢驗的實際應(yīng)用中還存在一定的缺陷,在臨床檢驗的實際應(yīng)用中,應(yīng)將其與手工法結(jié)合進(jìn)行檢測,以保障實驗的準(zhǔn)確性。