基于Keap1-Nrf2-A RE信號(hào)通路對(duì)多發(fā)性硬化癥治療的研究及展望

劉國(guó)棟，莊春林，余建強(qiáng)，石 英

（1.寧夏醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，銀川 750004；2.第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院，上海 200433）

多發(fā)性硬化癥（multiple sclerosis，MS）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system，CNS）退行性疾病，會(huì)導(dǎo)致大腦和脊髓白質(zhì)中的局灶性炎癥性脫髓鞘，從而產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)和認(rèn)知功能障礙[1-2]。有證據(jù)表明MS的炎性反應(yīng)與氧化應(yīng)激密切相關(guān)，氧化應(yīng)激反應(yīng)通過(guò)氧化脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和DNA等直接促進(jìn)脫髓鞘，也間接地通過(guò)誘導(dǎo)免疫失調(diào)和炎性反應(yīng)而導(dǎo)致脫髓鞘[3-4]。Keap1-Nrf2-抗氧化反應(yīng)元件（antioxidant response element，ARE）信號(hào)通路是一個(gè)綜合的氧化還原反應(yīng)體系，激活該途徑對(duì)于維持細(xì)胞的氧化平衡至關(guān)重要。該通路在炎性反應(yīng)中也起著關(guān)鍵作用，因此，清晰認(rèn)識(shí)Keap1-Nrf2-ARE信號(hào)通路各部結(jié)構(gòu)和功能及整體作用機(jī)制在MS研究過(guò)程中有著重要意義。

1 Keap1-Nrf2-ARE信號(hào)通路的結(jié)構(gòu)

1.1 Nrf2

Nrf2是具有高度保守性的堿性亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子（圖1）。人類的Nrf2由605個(gè)氨基酸組成，含有7個(gè)結(jié)構(gòu)功能域，分別被命名為Neh1～Neh7，每個(gè)結(jié)構(gòu)域?qū)rf2的功能起著不同的作用[5]。Neh1是一個(gè)包含堿性亮氨酸拉鏈基序，可與細(xì)胞核內(nèi)DNA、小肌腱膜纖維肉瘤蛋白（Maf）或其他轉(zhuǎn)錄因子形成異二聚體，從而再與ARE結(jié)合，啟動(dòng)目標(biāo)基因的轉(zhuǎn)錄。Neh2位于Nrf2的N端，含有多個(gè)可被泛素化修飾的賴氨酸殘基和兩個(gè)Keap1的結(jié)合位點(diǎn)（ETGE和DLG），這兩個(gè)基序?qū)τ贙eap1和Nrf2之間調(diào)節(jié)Nrf2泛素化和穩(wěn)定性的相互作用至關(guān)重要[6]。Neh3位于C末端，通過(guò)與Nrf2轉(zhuǎn)錄輔助激活子染色質(zhì)解螺旋酶DNA結(jié)合蛋白6結(jié)合活化轉(zhuǎn)錄。Neh4和Neh5是兩個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)錄結(jié)構(gòu)域，當(dāng)Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核并以Nrf2-Maf二聚形式與ARE結(jié)合后，并不能立即啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，還需要cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白與Neh4、Neh5兩個(gè)結(jié)構(gòu)域結(jié)合，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程。Neh6是一個(gè)富含絲氨酸殘基的結(jié)構(gòu)域，對(duì)于Nrf2有獨(dú)立于Keap1的負(fù)性調(diào)控作用[7]。Wang等[8]在研究視黃醇受體α（RXRα）與Nrf2相互作用的時(shí)候發(fā)現(xiàn)Nrf2中未定義的氨基酸209-316區(qū)域，將其命名為Neh7結(jié)構(gòu)域。

1.2 Keap1

Keap1是由624個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)，負(fù)調(diào)控Nrf2的活性。人類的Keap1蛋白序列包含5個(gè)結(jié)構(gòu)域，分別為N端區(qū)域（N-terminal region，NTR）、BTB區(qū)域（broad complex，tramtrack，and Bric-aBrac，BTB）、中間連接區(qū)域（linker intervening region，IVR）、DGR區(qū)域（double glycine repeat，DGR）及C端區(qū)域（C-terminal region，CTR），見(jiàn)圖1[9]。人類Keap1蛋白共包含27個(gè)半胱氨酸殘基（Cys），其中7個(gè)Cys（Cys151、Cys257、Cys273、Cys288、Cys297、Cys434和Cys613）對(duì)活性氧和親電試劑具有較高的活性，參與氧化還原信號(hào)傳導(dǎo)[6，10]。BTB結(jié)構(gòu)域的主要功能是促進(jìn)Keap1與Nrf2的二聚和Keap1與Cul3的相互作用。IVR結(jié)構(gòu)域具有對(duì)氧化物或親電試劑高度敏感性的半胱氨酸殘基，可作為氧化應(yīng)激的傳感器。DGR結(jié)構(gòu)域包含6個(gè)雙甘氨酸重復(fù)序列，是Keap1與Nrf2的Neh2區(qū)連接的蛋白接觸位點(diǎn)。DGR和CTR域也被稱為DC結(jié)構(gòu)域，它們與Nrf2的Neh2結(jié)合，介導(dǎo)Keap1和Nrf2之間的相互作用[6-7]。

1.3 ARE

ARE也被稱為親電效應(yīng)元件，位于許多細(xì)胞保護(hù)基因啟動(dòng)子的上游，調(diào)節(jié)具有細(xì)胞保護(hù)作用蛋白和Ⅱ相代謝酶基因的表達(dá)。在氧化應(yīng)激的條件下，游離的Nrf2轉(zhuǎn)位進(jìn)入細(xì)胞核，與小肌腱膜纖維肉瘤蛋白結(jié)合形成異二聚體，激活依賴ARE目的基因的表達(dá)，發(fā)揮抗氧化作用。研究表明，Nrf2與Bach1均可以與ARE結(jié)合，啟動(dòng)Ⅱ相代謝酶和抗氧化基因的表達(dá)，從而保護(hù)機(jī)體組織細(xì)胞的正常功能[11-12]。

1.4 Keap1-Nrf2-ARE信號(hào)通路的活化

在正常的生理狀態(tài)下，Keap1通過(guò)其BTB結(jié)構(gòu)域形成一個(gè)同二聚體，然后與細(xì)胞質(zhì)中Nrf2的DC結(jié)構(gòu)域結(jié)合，通過(guò)泛素化-蛋白酶體途徑使Nrf2降解。而當(dāng)機(jī)體受到親電試劑刺激或處于氧化應(yīng)激狀態(tài)時(shí)，Keap1的半胱氨酸殘基被共價(jià)修飾，導(dǎo)致其構(gòu)象發(fā)生改變，與Nrf2解離，從而避免了Nrf2被泛素化和降解。累積的Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核與ARE結(jié)合，從而啟動(dòng)下游一系列保護(hù)基因的表達(dá)，如NADPH醌氧化還原酶-1（NADPH：quinone oxidoreductase-1，NQO-1）、血紅素加氧酶-1（Heme oxygenase-1，HO-1）、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶（glutathione-S-transferase，GST）等，見(jiàn)圖2。研究顯示，Nrf2信號(hào)通路調(diào)控600多個(gè)基因，其中200多個(gè)編碼與炎癥、神經(jīng)退行性疾病和其他慢性疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)[13]。

2 Nrf2激活劑

激活Nrf2的方式主要有共價(jià)和非共價(jià)修飾兩類。共價(jià)修飾是通過(guò)配體親電性基團(tuán)與Keap1中的硫醇等隨機(jī)反應(yīng)結(jié)合，其反應(yīng)性比較難控制，與目標(biāo)靶點(diǎn)的結(jié)合缺乏特異性，從而降低其調(diào)控作用，最終導(dǎo)致一些不必要的脫靶毒性效應(yīng)。非共價(jià)修飾是通過(guò)直接阻斷Keap1與Nrf2之間的相互作用，進(jìn)而使Nrf2從復(fù)合物中解離，發(fā)揮激活Nrf2的作用。非共價(jià)修飾克服了共價(jià)Nrf2激活劑的脫靶問(wèn)題，避免了不確定的毒副作用[10，14]。兩者作用機(jī)制見(jiàn)圖3。

圖1 Keap1和Nrf2結(jié)構(gòu)區(qū)域

2.1 Nrf2親電激活劑

由圖4可見(jiàn)，富馬酸二甲酯（Dimethyl Fumarate，DMF）為化合物1，是一個(gè)成功的Nrf2激活劑，已被FDA批準(zhǔn)用于治療復(fù)發(fā)型多發(fā)性硬化癥[14]。藥代動(dòng)力學(xué)研究表明，DMF是一種在體內(nèi)迅速轉(zhuǎn)化為富馬酸單乙酯的前藥，與Keap1的Cys151殘基共價(jià)反應(yīng)，導(dǎo)致Nrf2介導(dǎo)的腦神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞基因反式激活。然而DMF的臨床應(yīng)用會(huì)產(chǎn)生一些不良反應(yīng)，如輕度至中度腹痛、腹瀉、惡心和嚴(yán)重白細(xì)胞減少等癥狀[15]。巴多索?。˙arduxolone，CDDO）是另一個(gè)Nrf2親電激活劑，它與Keap1的Cys151殘基發(fā)生共價(jià)可逆反應(yīng)。但CDDO甲基化修飾的產(chǎn)物——甲基巴多索?。˙arduxolone methyl，CDDO-Me）為化合物2，因增加了糖尿病患者心力衰竭的風(fēng)險(xiǎn)，未能通過(guò)腎臟治療的Ⅲ期臨床試驗(yàn)[16]。CDDO-Me目前正在肺動(dòng)脈高壓疾病的臨床試驗(yàn)中進(jìn)行研究[15]。蘿卜硫素為化合物3，是西蘭花芽中提取的異硫氰酸酯化合物，在一些臨床研究中也得到了評(píng)價(jià)[14，17]。

圖2 Keap1-Nrf2-ARE信號(hào)通路活化機(jī)制

圖3 不同Nrf2激活劑的作用機(jī)制

圖4 Nrf2親電激活劑

圖5 四氫異喹啉類結(jié)構(gòu)優(yōu)化

2.2 Nrf2非共價(jià)激活劑

在已開(kāi)發(fā)非共價(jià)激活劑的設(shè)計(jì)和優(yōu)化過(guò)程中運(yùn)用了一些經(jīng)典的藥物化學(xué)策略，如基于結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計(jì)和優(yōu)化策略、基于生物電子等排原理、基于片段的藥物設(shè)計(jì)策略和基于骨架躍遷的藥物優(yōu)化策略等，從而使目標(biāo)化合物靶點(diǎn)親和力和蛋白-蛋白相互作用抑制活性普遍得到提升，同時(shí)使理化性質(zhì)更有助于化合物成藥。同時(shí)，進(jìn)一步通過(guò)有效地激活Nrf2對(duì)于MS的研究具有廣闊的應(yīng)用前景，加快了MS治療藥物的研發(fā)進(jìn)程。

2.2.1 基于結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計(jì)和優(yōu)化策略 Hu等[18]首次報(bào)道了1，2，3，4-四氫異喹啉類的小分子Keap1-Nrf2抑制劑（圖5）。圖5中化合物4通過(guò)高通量篩選得到，通過(guò)熒光偏振（fluorescence polarization，F(xiàn)P）測(cè)定法測(cè)定其對(duì)Keap1-Kelch結(jié)構(gòu)域與Nrf2衍生肽之間相互作用的抑制活性（IC50=2.3μM）。通過(guò)表面等離子體共振（Surface plasmon resonance，SPR）測(cè)得其對(duì)靶點(diǎn)的親和力值Kd=1.0μM。然后在化合物4的基礎(chǔ)上，利用生物電子等排體原理將羧酸用四氮唑取代，得到化合物5，其對(duì)Keap1-Nrf2抑制活性降低了約3倍（IC50=7.4μM）；然而當(dāng)去除鄰苯二甲酰亞胺的羰基得到化合物6，其對(duì)Keap1-Nrf2抑制活性提高約2倍（IC50=1.1μM）；在5位引入甲基得到化合物7，其對(duì)蛋白相互作用抑制活性進(jìn)一步提升（IC50=750 nM）[19]。

2.2.2 基于生物電子等排的優(yōu)化策略 Marcotte等[20]通過(guò)篩選267551個(gè)化合物得到以1，4二氨基萘為母核的Keap1-Nrf2抑制劑化合物8，其對(duì)蛋白相互作用的抑制活性為IC50=1.46μM；Jiang等[21]在化合物8的基礎(chǔ)上進(jìn)行了進(jìn)一步結(jié)構(gòu)優(yōu)化，在化合物8的磺酰胺基的氮上引入亞甲基羧酸得到化合物9?；衔?是更有效的Keap1-Nrf2抑制劑，相對(duì)于化合物8抑制活性提高了約200倍以上（IC50=28.6 nM），并且靶點(diǎn)親和力也大大提高（Kd=3.59 nM）；為了改善化合物9的類藥性，利用對(duì)乙酰氨基取代對(duì)甲氧基得到化合物10，其對(duì)蛋白相互作用的抑制活性進(jìn)一步提升（IC50=14.4 nM）[22]；Lu等[23]利用生物電子等排原理將羧酸用四氮唑取代，得到化合物11，使其在保持原抑制活性的基礎(chǔ)上透膜性大大提升（Pe=42.266±4.476），見(jiàn)圖6。

2.2.3 基于片段的藥物設(shè)計(jì)策略 2016年，Astex制藥公司和葛蘭素史克制藥公司通過(guò)基于片段的藥物設(shè)計(jì)方法報(bào)道了一種新型苯丙酸類Keap1-Nrf2抑制劑[24]。通過(guò)利用X射線晶體衍射篩選出大約330個(gè)片段，鑒定出分別與關(guān)鍵氨基酸殘基Arg483、Tyr525和Ser602相互作用的A、B、C片段，盡管片段A對(duì)蛋白相互作用抑制活性＞1 mM，但仍被確定為細(xì)化的“錨片段”。在片段生長(zhǎng)過(guò)程中，苯丙三唑部分直接連接到片段A的芐位，從而得到了化合物12（IC50=61μM）（圖7）。在化合物12氯苯的3位引入烷基苯磺酰胺，由于苯磺酰胺可以與Tyr334通過(guò)π-π堆積相互作用，進(jìn)而使活性進(jìn)一步提升，得到化合物13（IC50=0.27μM），見(jiàn)圖7。最后，為了使目標(biāo)分子能夠以穩(wěn)定構(gòu)象與靶點(diǎn)結(jié)合，通過(guò)苯磺酰胺的環(huán)化反應(yīng)，形成了一個(gè)融合的7元雜環(huán)，得到活性進(jìn)一步提升的化合物14（圖7）[6，16]。研究表明，化合物14可以激活慢性阻塞性肺?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）患者支氣管上皮細(xì)胞中的Nrf2通路，從而誘導(dǎo)靶基因表達(dá)，提高抗氧化活性，減輕炎性反應(yīng)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，化合物14可以激活COPD大鼠模型中的Nrf2，使得肺組織中炎癥程度降低[24]。

2.2.4 基于骨架躍遷的結(jié)構(gòu)優(yōu)化策略 由圖8可見(jiàn)，化合物15為已報(bào)道的非共價(jià)Keap1-Nrf2抑制劑，其蛋白相互作用抑制活性為0.11μM（圖8）。但是萘環(huán)1、4位上兩個(gè)氮原子會(huì)引起代謝穩(wěn)定性問(wèn)題[25]。Abed等基于骨架躍遷策略將化合物15的萘環(huán)減化為一個(gè)苯環(huán)，得到1，2-二取代二甲苯類似物16[26]，其代謝穩(wěn)定性雖然增加，但抑制活性降低。通過(guò)在化合物16羧酸α碳上引入甲基，得到了抑制活性提高約15倍的手性化合物17（IC50=0.15μM）。同樣化合物19也是基于骨架躍遷策略減化化合物18中一個(gè)苯環(huán)得到的4-苯基-1，2，4三唑母核Keap1-Nrf2抑制劑，化合物19的硝基通過(guò)與關(guān)鍵氨基酸殘基Arg483相互作用，有效激活Nrf2-ARE通路，同時(shí)其對(duì)靶點(diǎn)親和力也進(jìn)一步提升（Kd=16.5μM）[16]。

圖6 1，4-二氨基萘類結(jié)構(gòu)優(yōu)化

3 MS治療藥物現(xiàn)狀

MS的藥物治療始于20世紀(jì)90年代，干擾素β和醋酸格拉替雷是1993年批準(zhǔn)的第一批治療MS注射制劑，兩者主要用于治療復(fù)發(fā)緩解型多發(fā)性硬化癥。10年后，第一種單克隆抗體那他珠單抗獲得批準(zhǔn)，它是一種人源化的單克隆抗體，可防止淋巴細(xì)胞穿過(guò)血腦屏障[27]。芬戈莫德，特立氟胺和富馬酸二甲酯是在2010至2020年上市的三個(gè)口服藥物，其中芬戈莫德于2018年5月被FDA批準(zhǔn)用于治療10~25歲的青少年患者[28-30]。研究表明，自20世紀(jì)90年代以來(lái)，全球MS患病率急劇上升。目前，全球有250多萬(wàn)的MS患者，其中80%被確診為復(fù)發(fā)緩解型，這相比于1990年患病率增加了10.4%[2，31]。國(guó)內(nèi)外首推的MS黃金治療方法是疾病修飾治療（disease-modifying treatments，DMT）。同時(shí)根據(jù)中國(guó)《多發(fā)性硬化患者生存報(bào)告（2019）》可知，國(guó)內(nèi)多發(fā)性硬化癥患者3萬(wàn)～5萬(wàn)人，83%為復(fù)發(fā)緩解型，臨床上接受DMT治療的僅有10%，仍有90%的患者因?yàn)楦弊饔煤烷g斷性用藥導(dǎo)致復(fù)發(fā)等各種原因而處于無(wú)藥可用的狀態(tài)，因此，急需一種新的治療手段和策略。

圖7 苯丙酸類的藥物設(shè)計(jì)

圖8 1，2-二取代二甲苯類似物結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)

4 激活Nrf2能夠有效緩解MS

目前，MS仍不能被徹底治愈，急需尋找和開(kāi)發(fā)新的治療途徑。相關(guān)研究表明，激活Nrf2能夠調(diào)控免疫炎性反應(yīng)、鐵代謝、線粒體功能、自噬等方面，進(jìn)而緩解MS患者和動(dòng)物模型的臨床癥狀。

4.1 CNS的炎癥調(diào)節(jié)

在經(jīng)典MS模型——實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎（experimentally induced autoimmune encephalomyelitis，EAE）模型中研究發(fā)現(xiàn)，DMF作為Nrf2激活劑，可顯著緩解脫髓鞘和認(rèn)知功能障礙等臨床癥狀[32-33]。在MS的病理過(guò)程研究中發(fā)現(xiàn)，高促炎性自身反應(yīng)T細(xì)胞入侵到中樞神經(jīng)系統(tǒng)，產(chǎn)生干擾素γ和白細(xì)胞介素17A導(dǎo)致炎性反應(yīng)[4]。同時(shí)，增加了血腦屏障的通透性，并促使其他免疫細(xì)胞進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)[4，34]。該過(guò)程伴隨著巨噬細(xì)胞/小膠質(zhì)細(xì)胞的持續(xù)激活，并釋放促炎細(xì)胞因子和趨化因子，使炎性反應(yīng)加劇[35-36]。研究發(fā)現(xiàn)，在MS患者和EAE動(dòng)物模型中，Nrf2低表達(dá)且HO-1缺乏時(shí)，導(dǎo)致EAE小鼠模型脫髓鞘加劇和患者病情惡化[37-38]。而當(dāng)激活Nrf2時(shí)，下游白細(xì)胞介素17以及炎癥因子Th1和Th17的產(chǎn)生受到抑制，同時(shí)使下游HO-1高表達(dá)，從而抑制促炎細(xì)胞因子和趨化因子的過(guò)度分泌，最終緩解炎性反應(yīng)[39-40]。

4.2 鐵代謝

腦內(nèi)鐵代謝失調(diào)是MS疾病過(guò)程中導(dǎo)致氧化應(yīng)激的重要因素之一[41-42]。在健康的成人腦中，鐵主要儲(chǔ)存在少突膠質(zhì)細(xì)胞中。而在MS患者腦中的巨噬細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞鐵含量也是增加的，這些過(guò)量的鐵在髓鞘降解和清除的過(guò)程中會(huì)被釋放到細(xì)胞外，隨后轉(zhuǎn)化為二價(jià)亞鐵形式，通過(guò)Fenton反應(yīng)生成活性氧進(jìn)一步對(duì)機(jī)體造成損傷[43]。另外，巨噬細(xì)胞中鐵的含量過(guò)高也會(huì)促使炎癥的發(fā)生[44]。在EAE模型中，腦中鐵過(guò)量會(huì)導(dǎo)致參與磷脂和髓鞘代謝的幾個(gè)相關(guān)蛋白表達(dá)降低，可能會(huì)影響髓鞘的合成和恢復(fù)[45]。激活Nrf2可以調(diào)節(jié)鐵代謝中的鐵蛋白及相關(guān)酶來(lái)維持體內(nèi)鐵平衡，降低脫髓鞘程度，進(jìn)而緩解MS的臨床癥狀和疾病復(fù)發(fā)[46]。

4.3 線粒體功能

越來(lái)越多的證據(jù)表明，線粒體功能障礙也是MS發(fā)病和復(fù)發(fā)的重要因素之一[47-48]。通過(guò)對(duì)MS患者大腦軸突研究發(fā)現(xiàn)，線粒體功能障礙和ATP缺乏，會(huì)導(dǎo)致動(dòng)作電位在傳導(dǎo)過(guò)程中無(wú)法將Na+從軸漿轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外[49-50]，這會(huì)導(dǎo)致反向Na+-Ca2+交換體的激活，造成軸漿內(nèi)Ca2+濃度升高，最終引起Ca2+介導(dǎo)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥，并伴隨能量失衡和脫髓鞘[51-52]。通過(guò)對(duì)分離線粒體和培養(yǎng)細(xì)胞的研究表明，Nrf2缺乏可導(dǎo)致線粒體脂肪酸氧化、呼吸和ATP生成等過(guò)程受阻[53-54]。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)MS患者中過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ-輔助活化因子-1α（peroxisome proliferatoractivated receptor gamma coactivator 1 alpha，PGC-1α）的表達(dá)降低會(huì)導(dǎo)致線粒體功能障礙，從而促進(jìn)復(fù)發(fā)，加快病情進(jìn)展[55-56]。Nrf2也被報(bào)道通過(guò)激活PGC-1α和核呼吸因子1來(lái)維持線粒體正常的能量代謝功能[57]。因此，通過(guò)激活Nrf2來(lái)維持MS患者體內(nèi)線粒體功能穩(wěn)態(tài)，對(duì)于緩解MS相關(guān)臨床癥狀具有十分重要的意義。

4.4 自噬

研究顯示，自噬降解途徑受阻會(huì)導(dǎo)致MS細(xì)胞外纖維連接蛋白的聚集，進(jìn)而影響再髓鞘化過(guò)程[58]。MS患者由于自噬水平的降低，在大腦和腦脊液中均檢測(cè)到可溶性低聚物以及在EAE模型中也檢測(cè)到氧化蛋白聚集體增加，進(jìn)而加劇炎性反應(yīng)[59-61]。研究表明，在EAE模型中，Nrf2缺乏導(dǎo)致自噬降解途徑降低，而通過(guò)激活Nrf2可誘導(dǎo)自噬相關(guān)基因的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)自噬，緩解脫髓鞘和炎性反應(yīng)[62]。

非共價(jià)小分子Keap1-Nrf2抑制劑由于分子量較大，且含有大極性親水性基團(tuán)難以透過(guò)血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)。為了克服這種局限性，可以通過(guò)生物電子等排等結(jié)構(gòu)優(yōu)化策略，使目標(biāo)分子保持原活性的基礎(chǔ)上具有更強(qiáng)的血腦屏障透過(guò)能力。此外，在既患有癌癥又患有MS的患者治療過(guò)程中，Nrf2激活劑會(huì)增加腫瘤轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)，這也取決于疾病的背景和階段[63，64]。因此，在使用Nrf2激活劑藥物治療該類患者時(shí)，要評(píng)估此類藥物的風(fēng)險(xiǎn)。

5 總結(jié)和展望

MS是一種發(fā)病機(jī)制復(fù)雜的多因素疾病，目前研究的藥物雖尚不能徹底治愈，但通過(guò)調(diào)控Keap1-Nrf2-ARE信號(hào)通路，能夠有效緩解MS的復(fù)發(fā)和臨床癥狀。其中激活Nrf2能夠使MS患者及動(dòng)物模型中的免疫炎性反應(yīng)、鐵代謝、自噬等生理過(guò)程介導(dǎo)的臨床癥狀得到改善。大多數(shù)Nrf2親電激活劑由于反應(yīng)性比較難控制，與目標(biāo)靶點(diǎn)的結(jié)合缺乏特異性，最終導(dǎo)致一些不必要的脫靶毒性效應(yīng)。而非共價(jià)小分子Nrf2激活劑通過(guò)阻斷Keap1和Nrf2之間的相互作用克服了親電性Nrf2激活劑的缺點(diǎn)，非共價(jià)Nrf2激活劑在MS的研究中具有良好的應(yīng)用前景，未來(lái)很有可能會(huì)用于MS的臨床治療。同時(shí)，結(jié)合國(guó)內(nèi)的MS治療情況，增加對(duì)Keap1-Nrf2-ARE信號(hào)通路在MS過(guò)程中所起作用的認(rèn)識(shí)，有助于新型MS治療藥物的研發(fā)。