羅漢果開(kāi)發(fā)研究進(jìn)展

蔣彩云，李 苗，馮鑫葦

(江蘇經(jīng)貿(mào)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 a.健康學(xué)院；b.江蘇省食品安全工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心，江蘇 南京 211168)

羅漢果，屬于葫蘆科，是能夠多年生長(zhǎng)的藤類(lèi)植物，又被叫作拉汗果、金不換、假苦瓜、光果木鱉等，素有“神仙果”之稱(chēng)。羅漢果的形狀有些像雞蛋、有些像球，在生長(zhǎng)的時(shí)候，顏色是綠色的，摘下曬干后呈褐色。羅漢果一般生長(zhǎng)在涼爽、潮濕、多風(fēng)的山區(qū)[1]，廣西壯族自治區(qū)桂林市是其主要產(chǎn)地。羅漢果是我國(guó)首批公布的藥食兩用材料之一，具有極高的藥用價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。

羅漢果有潤(rùn)肺止咳、美容養(yǎng)顏、健胃養(yǎng)生、潤(rùn)腸通便等功效，常被人們用來(lái)泡茶飲用，尤其適合健身、肥胖人群?，F(xiàn)在市面上有很多羅漢果飲品，如:茶源銀杏果茶，其成分除了水以外，就是白果、羅漢果及綠茶；即溶茶，由羅漢果粉、綠茶粉、杭菊粉組成固體粉末，使用時(shí)用熱水沖泡即可；羅漢果蜜，其主要成分是羅漢果提取物。在生活中，羅漢果還經(jīng)常被用來(lái)煲湯、燉肉。羅漢果不僅可以食用，還可以藥用，如復(fù)方羅漢果清肺顆粒、羅漢果定喘片、羅漢果止咳膠囊、復(fù)方羅漢果含片等。

1 化學(xué)成分

1.1 三萜皂苷類(lèi)

羅漢果中主要的活性物質(zhì)是三萜皂苷類(lèi)化合物，其中大部分可溶于水。將羅漢果放在水中搖一搖，會(huì)出現(xiàn)泡沫，和肥皂在水里的現(xiàn)象是一樣的。目前，在羅漢果中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了12種皂苷，其中羅漢果甜苷V是主要組成成分[2]。羅漢果甜苷V幾乎沒(méi)有熱量，甜度是蔗糖的300倍左右。它的熱穩(wěn)定性很好，并且天然無(wú)公害，因此常被人們用作甜味劑。

1.2 黃酮類(lèi)

黃酮類(lèi)化合物是一類(lèi)生物活性溫和且多樣的植物色素。繞榮等[3]利用分光光度法比較了羅漢果果實(shí)中的黃酮量和莖葉中的黃酮量，得出果實(shí)中的黃酮總含量為13.87 mg/g，莖葉中的黃酮總含量為345.11 mg/g。張妮等[4]采用溶劑提取、柱層析色譜分離法從羅漢果葉中提取了阿魏酸、4′-甲氧基二氫槲皮素、大黃素、蘆薈大黃素?？梢?jiàn)，羅漢果中含有豐富的黃酮類(lèi)物質(zhì)。

1.3 多糖類(lèi)

多糖通常是由10個(gè)以上單糖分子組成的，常見(jiàn)的有淀粉、纖維素等。陳全斌等[5]使用溶劑提取的方法從羅漢果中分離出兩個(gè)多糖組分，用高效液相色譜法測(cè)得它們的相對(duì)分子質(zhì)量分別為430 000、650 000。李俊等[6]對(duì)這兩個(gè)多糖組分進(jìn)行研究分析，采用層析技術(shù)測(cè)得兩組具體含有的單糖成分，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，鼠李糖和葡萄糖酸醛是其共同含有的成分。

1.4 油脂類(lèi)

羅漢果中含有豐富的油脂類(lèi)化合物。根據(jù)研究，羅漢果中不飽和脂肪的含量比游離脂肪酸的含量高很多，其中角鯊烯的含量最高，為種子油含量的51.52%[7]。周欣欣[8]使用水煮法提取羅漢果果實(shí)中的揮發(fā)油，其含量為0.2%～0.3%。經(jīng)鑒定，揮發(fā)油的組成成分有很多，其中，n-十六烷酸的含量最高。

1.5 氨基酸和蛋白質(zhì)

蛋白質(zhì)是生命的基礎(chǔ)。羅漢果中蛋白質(zhì)的含量約為10%。此外，羅漢果中還含有許多人體必需的氨基酸[9]，其中，谷氨酸的含量最高。

1.6 無(wú)機(jī)鹽類(lèi)

無(wú)機(jī)鹽是植物生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)成分。羅漢果中含有鐵、錳、硒、鎂、碘、錫等26種無(wú)機(jī)元素。孟夏林等[10]使用原子吸收分光光度計(jì)和等離子光度計(jì)，測(cè)得羅漢果中含有豐富的人體必需的微量元素，其中硒含量很高，是糧食中硒含量的3倍左右。

1.7 其他成分

除了上述內(nèi)容，豐富的維生素C、維生素E以及D-甘露醇等都是羅漢果所含有的活性成分。徐位坤等[11]采用紅外光譜、薄層層析等方法，從羅漢果中分離提取出了D-甘露醇，其顏色呈白色，味道比蔗糖甜一些。

2 藥理作用

2.1 止咳祛痰、潤(rùn)腸通便

中醫(yī)學(xué)很早就使用羅漢果作為止咳祛痰、潤(rùn)腸通便的藥物。王勤等[12]采用對(duì)照的方法給小鼠和大鼠做實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)羅漢果水提取物可以使小鼠氣管的酚紅排出量和大鼠氣管排出痰量都有所增加，小鼠的咳嗽次數(shù)明顯下降，說(shuō)明羅漢果對(duì)咳嗽有抑制作用。另外發(fā)現(xiàn)正常和便秘小鼠的排便量增加，且糞便含水量增加。陳瑤等[13]建立小鼠便秘模型，使用墨汁灌腸，結(jié)果顯示，羅漢果甜苷可以減少便秘小鼠第一次排便的時(shí)間，且糞便量增加，這說(shuō)明羅漢果具有潤(rùn)腸通便的作用。

2.2 活血化瘀

陳全斌等[14]采用靜脈注射的方法來(lái)觀察小鼠的腦血栓、凝血時(shí)間以及血小板等方面是否受羅漢果黃酮的影響。研究發(fā)現(xiàn)，羅漢果黃酮對(duì)小鼠腦血栓有40%的恢復(fù)率，對(duì)大鼠血小板聚集有22%左右的抑制率，并且能夠延長(zhǎng)小鼠的血凝固時(shí)間，這說(shuō)明羅漢果黃酮具有良好的活血化瘀作用。

2.3 抗氧化損傷

長(zhǎng)時(shí)間的疲勞鍛煉會(huì)導(dǎo)致身體的抗氧化能力下降。姚績(jī)偉等[15]采用對(duì)照法得出,灌服羅漢果提取液的小鼠游泳力氣用盡的時(shí)間和對(duì)照組小鼠相比，會(huì)有所延遲。研究發(fā)現(xiàn)，羅漢果提取物可以讓血紅蛋白在運(yùn)動(dòng)時(shí)減緩下降，并且在運(yùn)動(dòng)后，能夠促進(jìn)血紅蛋白的合成。同時(shí)，能使血乳酸降低或消失，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，從而有效控制機(jī)體脂質(zhì)的過(guò)氧化。張俐勤等[16]證實(shí)了羅漢果提取物MGC、MGI、MGII可以有效清除自由基，清除率分別達(dá)51.05%、48.14%、43.62%，并且可以減少紅細(xì)胞溶血現(xiàn)象。

2.4 保護(hù)肝臟

肝臟是人體的重要器官。肖剛等[17]建造肝損傷模型，研究羅漢果甜苷對(duì)由四氯化碳引發(fā)的小鼠急性肝損傷的作用，結(jié)果顯示，羅漢果甜苷組比模型組的小鼠肝損傷要輕很多，而且甜苷的含量越高，效果越明顯，表明羅漢果甜苷對(duì)減輕肝組織病理變化有很好的效果。同時(shí)，他們還對(duì)由四氯化碳所致大鼠慢性肝損傷做了研究，結(jié)果表明，羅漢果甜苷可以顯著減輕肝損傷，有效緩解肝纖維化。

2.5 抗衰老

衰老是所有生命體必然經(jīng)歷的一個(gè)過(guò)程，機(jī)體的衰老程度可以通過(guò)丙二醛的含量來(lái)反映，提高體內(nèi)的超氧化物歧化酶(SOD)水平對(duì)延緩衰老、延年益壽具有重要意義。肖剛等[18]采用D-半乳糖衰老模型證實(shí)了羅漢果甜苷使得小鼠腦組織和血清中SOD的含量明顯增加，且丙二醛含量有所下降。果蠅的壽命實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，羅漢果甜苷可以推遲大多數(shù)果蠅的死亡時(shí)間，并且延長(zhǎng)它們的壽命。這些都顯示了羅漢果對(duì)衰老有一定的抑制作用。

2.6 抗糖尿病

糖尿病是一種常見(jiàn)疾病，并且越來(lái)越年輕化，但目前沒(méi)有根治的辦法，只能抑制。羅漢果中的三萜皂苷類(lèi)化合物具有降糖作用，它可以通過(guò)四種途徑[19]進(jìn)行調(diào)解： 第一種是對(duì)胰腺β細(xì)胞進(jìn)行損傷修復(fù)；第二種是使胰島素分泌量增多；第三種是激活腺苷酸活化蛋白激酶抑制糖異生途徑，達(dá)到控制血糖的目的；第四種是對(duì)體內(nèi)糖苷酶活性進(jìn)行抑制。徐慶等[20]給志愿者服用羅漢果甜苷，研究其對(duì)血糖正常的人是否有影響，結(jié)果表明無(wú)影響。

2.7 調(diào)節(jié)血脂紊亂

血脂紊亂是誘發(fā)心血管疾病的危害因素之一。血脂紊亂有一個(gè)重要特征就是高密度脂蛋白降低。調(diào)脂治療是預(yù)防和治療心血管疾病的重要方法，通過(guò)調(diào)節(jié)血脂紊亂可以抑制動(dòng)脈粥樣硬化。張建義等[21]通過(guò)建立動(dòng)物模型研究羅漢果對(duì)大鼠膽固醇、脂蛋白等的影響，結(jié)果顯示，羅漢果可以使高密度脂蛋白升高，具有調(diào)節(jié)血脂紊亂的作用。

此外，羅漢果還有很多其他的藥理作用，如抗癌、抗炎、增強(qiáng)免疫等。

3 有效成分的提取技術(shù)

傳統(tǒng)的羅漢果有效成分提取方法一般是煮沸或者乙醇浸泡，但是這些方法在操作過(guò)程中容易導(dǎo)致有效成分損失，提取效果并不好。近年來(lái)，隨著科技的進(jìn)步，新的提取技術(shù)不斷涌現(xiàn)，對(duì)于保留羅漢果的有效成分提供了很大幫助。

3.1 三萜皂苷類(lèi)

3.1.1 煎煮法

煎煮法是歷史悠久的傳統(tǒng)方法，將該方法和膜分離技術(shù)一起使用，能夠達(dá)到很好的提取效果。近幾年，膜分離技術(shù)廣泛應(yīng)用于很多領(lǐng)域，如食品藥品、環(huán)境保護(hù)、生物、冶金、化工等。該方法主要是通過(guò)半透膜實(shí)現(xiàn)分離，不需要添加化學(xué)試劑，并且不需要改變溫度，在常溫下就可以進(jìn)行，適用性非常好，操作比較簡(jiǎn)單，耗費(fèi)能量少，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

范耀榮[22]使用煎煮法和膜分離技術(shù)相結(jié)合的方法提取羅漢果甜苷，提取率達(dá)86%，其成品符合企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。該方法的分離提取濃縮可以直接完成，操作簡(jiǎn)便，污染少且效率高，但膜使用時(shí)間長(zhǎng),易損壞。蔣明廉[23]采用水提法，用超濾膜進(jìn)行分離，結(jié)果表明，羅漢果甜苷的提取量達(dá)到了國(guó)際要求，且含量穩(wěn)定，顏色均勻。

3.1.2 溶劑提取

溶劑提取是一種傳統(tǒng)方法，比較經(jīng)濟(jì)、安全。陳敏等[24]對(duì)此方法提取羅漢果甜苷進(jìn)行了優(yōu)化，得出在料液比1∶15、浸泡30 min、全程共提取3次、每次60 min的條件下，羅漢果甜苷的提取效果最佳，提取率達(dá)5.57%。

溶劑提取法的效果比較穩(wěn)定，但耗時(shí)較長(zhǎng)，提取步驟較復(fù)雜，容易受到各種條件的制約。

3.1.3 微波提取技術(shù)

微波技術(shù)可以對(duì)物質(zhì)的不同成分有選擇地進(jìn)行加熱，使想要的成分直接分離出來(lái)，熱損失很少，能量利用率高，操作簡(jiǎn)便，且在生產(chǎn)過(guò)程中不會(huì)有噪音。因此，很多領(lǐng)域都采用微波技術(shù)，尤其是天然藥物的提取。

朱曉韻等[25]對(duì)影響羅漢果甜苷提取效果的因素進(jìn)行了分析，得出微波技術(shù)提取羅漢果甜苷的最佳方法：放入八倍的水，在微波輸出功率為750 W、提取時(shí)間為15 min的條件下進(jìn)行提取，最終得到7.3 mg/g的甜苷。微波技術(shù)的提取效率高于傳統(tǒng)水煮法，但由于設(shè)備原因，不適合大規(guī)模生產(chǎn)，目前只能應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。

3.1.4 超聲波提取技術(shù)

超聲波技術(shù)廣泛應(yīng)用于很多領(lǐng)域，在醫(yī)藥領(lǐng)域也有很多的應(yīng)用，尤其是物質(zhì)的分離提取方面。超聲波技術(shù)提取時(shí)間較短，不需要很高的溫度，適用于提取不耐熱的中草藥成分，有著很好的應(yīng)用前景。

李軍生等[26]用超聲波技術(shù)提取羅漢果甜苷，并與浸提法進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，超聲波技術(shù)提取效果良好，甜苷提取率比浸提法要高很多，并且高頻率超聲波作用效果要好于低頻率超聲波。實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，羅漢果粉末的粗細(xì)程度也影響著羅漢果甜苷的提取率，粉末越細(xì)，提取率就會(huì)越高。但超聲波提取技術(shù)和微波提取技術(shù)存在一樣的問(wèn)題，即不適合大規(guī)模生產(chǎn)。

3.1.5 閃式提取法

閃提法是一種新型提取方法，它可以在常溫下快速使植物的各個(gè)部分破碎，并讓活性成分在組織內(nèi)外平衡，然后過(guò)濾提取。這種方法可以很好地保留物質(zhì)中的有效成分，提取時(shí)間在30 s左右，非?？焖伲业镀湍?、不易破損，適用范圍非常廣泛。

劉兆等[27]采用閃提技術(shù)提取羅漢果甜苷，提取率達(dá)10.057%。與微波和超聲波技術(shù)相比較，閃提技術(shù)具有效率高、能耗少、速度快及操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，適合大規(guī)模生產(chǎn)。楊曄等[28]采用閃式提取法提取羅漢果甜苷，提取率為8.77%，純度達(dá)92%以上，效率非常高。閃提技術(shù)在天然物質(zhì)的開(kāi)發(fā)方面具有很好的應(yīng)用前景。

3.2 黃酮類(lèi)

3.2.1 酶解法

酶解法是提取中藥成分的一種有效方法，它的反應(yīng)條件十分溫和，活性成分不容易改變，有著很高的提取效率，并且不易污染，有利于環(huán)境保護(hù)。王邕等[29]采用酶解法和溶劑提取相結(jié)合的方法提取羅漢果中的黃酮，提取率達(dá)6.921%，并且該方法污染少。

3.2.2 溶劑提取

黃酮類(lèi)物質(zhì)的提取同樣可以使用溶劑提取法，而且可以和微波、超聲波等技術(shù)結(jié)合起來(lái)使用，效果也非常好。秦滿發(fā)等[30]以水-乙醇為提取溶劑，輔以微波技術(shù)，得到羅漢果黃酮的量為1.72%。容元平等[31]使用溶劑提取羅漢果中的總黃酮，輔以超聲波技術(shù)，使得提取率有了很大的提升，且二次逆流提取率比一次提取率高。楊洋等[32]采用乙醇提取羅漢果黃酮，輔以薄層層析法提純，加入15倍的乙醇，在溫度70 ℃條件下提取2 h，得到0.583%的黃酮。

3.3 多糖類(lèi)

3.3.1 超聲波提取技術(shù)

超聲波技術(shù)在多糖的提取上得到了很好的應(yīng)用。李俊等[33]以超聲波技術(shù)提取羅漢果多糖，提取效果很好，提取條件：羅漢果與水為1∶30，溫度為50 ℃，進(jìn)行3次提取。該方法與傳統(tǒng)的熱水法相比，大大縮短了時(shí)間，多糖含量高10.6%，并且在提取過(guò)程中不需要很高的溫度，多糖結(jié)構(gòu)不會(huì)因高溫而水解，從而保證了多糖的質(zhì)量。

3.3.2 酶解法

多糖類(lèi)物質(zhì)的提取同樣可以采用酶解法。李洪燕等[34]在酶解溫度50 ℃、酶活性500 U/g、pH 6.0、酶解時(shí)間55 min的條件下提取羅漢果多糖，提取率達(dá)6.82%，比傳統(tǒng)熱水法的提取率增加了10%～22%。

3.4 其他類(lèi)

蘇小建等[35]采用超濾膜提取羅漢果蛋白酶，結(jié)果表明，其酶活與蛋白質(zhì)主要分布在相對(duì)分子量為10萬(wàn)以上和1萬(wàn)～5萬(wàn),分別占各自總量的59.2%和65.55%，具有很好的利用價(jià)值。劉燦等[36]使用閃提技術(shù)提取羅漢果多酚，使用響應(yīng)面分析法確定提取條件，多酚提取率為2.73%。

4 結(jié)論與展望

本文介紹了羅漢果的化學(xué)成分、藥理作用及其有效成分的提取分離技術(shù)。目前，對(duì)羅漢果的開(kāi)發(fā)研究存在以下問(wèn)題：一是對(duì)藥理作用研究較多，對(duì)臨床應(yīng)用研究較少；二是對(duì)果實(shí)的研究很多，對(duì)莖、葉、根等部分的研究較少；三是對(duì)羅漢果甜苷、黃酮、多糖等成分的研究較多，對(duì)其他活性物質(zhì)的研究較少；四是對(duì)羅漢果甜苷、黃酮、多糖的提取研究較多，對(duì)其他成分的提取研究較少，并且很多技術(shù)只是在實(shí)驗(yàn)室中使用，不適合大規(guī)模應(yīng)用。上述問(wèn)題都是未來(lái)的研究方向。