膠乳免疫比濁法與酶聯(lián)免疫吸附法對類風濕關(guān)節(jié)炎患者血清抗CCP抗體檢測分析

亢沛沛

河南科技大學第一附屬醫(yī)院檢驗科，河南 洛陽 471000

類風濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）作為慢性系統(tǒng)性疾病之一，其主要是以侵蝕性關(guān)節(jié)炎為特征。該病在初期主要表現(xiàn)為腫脹、疼痛以及晨僵等，隨著病情的發(fā)展可導致患者的關(guān)節(jié)發(fā)生畸形，甚至喪失正常的功能［1-2］。故早期對RA的診斷對制定臨床治療方案以及改善患者預后具有重要意義。目前，針對RA的診斷主要以抗環(huán)瓜氨酸肽（anti-cyelic peptide antibody，CCP）抗體以及類風濕因子為主要診斷標準，但后者可在多種慢性傳染病以及自身免疫性統(tǒng)疾病中檢測出來，缺乏特異性［3-4］。因此，抗CCR抗體被廣泛應用于對RA的診斷中，但由于臨床對該指標的診斷方法繁多，且不同試劑盒對其檢測均呈現(xiàn)不同的靈敏度以及特異度。鑒于此，本研究將回顧性分析2017年1月—2019年1月河南科技大學第一附屬醫(yī)院收治的RA患者78例臨床資料，探討膠乳免疫比濁法與酶聯(lián)免疫吸附法對RA患者血清抗CCP抗體檢測結(jié)果，現(xiàn)總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2017年1月—2019年1月河南科技大學第一附屬醫(yī)院收治的RA患者78例臨床資料，將其納入RA組，另選擇同期在我院體檢的非類風濕關(guān)節(jié)炎患者72例納入非RA組。其中RA組男19例，女59例；年齡21～78歲，平均年齡（53.62±10.78）歲；病程1～5年，平均病程（2.46±1.31）年。非RA組男18例，女54例；年齡20～77歲，平均年齡（52.37±10.53）歲；病程1～5年，平均病程（2.35±1.41）年；疾病類型：痛風18例，骨關(guān)節(jié)炎21例，強直性脊柱炎18例，其他疾病15例。兩組基礎(chǔ)資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 入選標準

納入標準：（1）RA組所有患者均符合中華醫(yī)學會風濕病學分會發(fā)布的RA診斷標準［5］；（2）年齡均＞18歲；（3）臨床資料完整。排除標準：（1）心肝腎功能障礙者；（2）嚴重精神功能障礙者。

1.3 檢測方法

兩組患者均于檢查前抽取清晨空腹靜脈血3 m l，以3 000 r/min離心10 min，分離血清置于-20℃冰箱中保存待檢。

1.3.1 酶聯(lián)免疫吸附法：采用MR-96A酶標儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，粵械注準20192220393）檢測抗CCP抗體，其中試劑盒由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供。若抗CCP抗體濃度≥25 U/mL表示陽性，若抗CCP抗體濃度＜25則為陰性。

1.3.2 膠乳免疫比濁法：采用BS-200全自動生化分析儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司，粵械注準20192220492），試劑盒由武漢默沙克生物科技有限公司提供。若抗CCP抗體濃度＞5IU/mL則為陽性，若抗CCP抗體濃度≤5IU/m L則為陰性。所有操作均嚴格按照說明書執(zhí)行。

1.4 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 22.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)，以百分比表示計數(shù)資料，用χ2檢驗；計算酶聯(lián)免疫吸附法、膠乳免疫比濁法檢測抗CCP抗體效能，采用一致性Kappa檢驗，以K值評價各技術(shù)單獨及聯(lián)合診斷與金標準的一致性（K值≥0.74提示一致性好，K值范圍為0.4～＜0.74提示一致性一般，K值＜0.4提示一致性差），P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 酶聯(lián)免疫吸附法檢測抗CCP抗體結(jié)果

酶聯(lián)免疫吸附試驗法在檢測抗CCP抗體中經(jīng)一致性檢驗結(jié)果Kappa值為0.893，一致性較好，見表1。

表1 酶聯(lián)免疫吸附法檢測抗CCP抗體結(jié)果 例

2.2 膠乳免疫比濁法檢測抗CCP抗體結(jié)果

膠乳免疫比濁法在檢測抗CCP抗體中經(jīng)一致性檢驗結(jié)果Kappa值為0.849，一致性較好，見表2。

2.3 膠乳免疫比濁法與酶聯(lián)免疫吸附法的診斷效能

表2 膠乳免疫比濁法檢測抗CCP抗體結(jié)果 例

酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果的敏感度、特異度以及準確度分別為96.15%、93.06%、94.67%，略高于膠乳免疫比濁法，但差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 兩種方法的診斷效能對比

3 討論

RA作為自身免疫性疾病，其主要是以滑膜炎為基礎(chǔ)病理。目前，針對該病的診斷主要根據(jù)血清學檢測以及臨床癥狀表現(xiàn)判斷，但由于該病患者的早期無特異臨床癥狀而RF又無特異度，影響早期的診斷以及治療方案的制定［5］。

抗CCP抗體作為目前類風濕關(guān)節(jié)炎患者早期診斷的重要指標，其在疾病早期就可以出現(xiàn)檢測出陽性。此外，該抗體還能夠彌補RF在特異度不高方面的不足，且具有較高的靈敏度［6-7］。由于目前對抗CCP抗體檢測的方法繁多，且易受到檢測試劑的影響。酶聯(lián)免疫吸附法作為檢測該抗體的有效方法，具有高靈敏度、特異度以及結(jié)果準確等優(yōu)勢，但操作相對繁瑣且耗時相對較長，無法適用于連續(xù)快速檢測［8］。而膠乳免疫比濁法作為近年來較為新穎的全自動生化分析儀檢測方法，具有檢測時間短、速度快且靈敏度及特異度較高等優(yōu)勢，更適用于廣大基層醫(yī)院［9-10］。通過本研究結(jié)果顯示，酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果的敏感度、特異度以及準確度分別為96.15%、 93.06%、94.67%，略高于膠乳免疫比濁法的91.03%、88.89%、90.00%，但兩組對比無顯著差異。進一步通過一致性檢驗結(jié)果分析，酶聯(lián)免疫吸附法、膠乳免疫比濁法與金標準的Kappa值分別為0.893、0.849，提示了兩種抗CCP抗體檢測方法均具有較高的診斷效能以及一致性。這可能是由于目前臨床尚無規(guī)范參考試劑盒應用，每種試劑盒的檢測標準都因廠家而異。本研究因時間、物力、財力等諸多原因，納入的樣本數(shù)量較少，因此本次研究數(shù)據(jù)的可信度，還需在未來開展更多相關(guān)性研究加以證實。

綜上所述，膠乳免疫比濁法與酶聯(lián)免疫吸附法對類風濕關(guān)節(jié)炎患者血清抗CCP抗體檢測均具有較佳的一致性，酶聯(lián)免疫吸附法診斷效能略高，臨床可根據(jù)實際情況進行選擇。