洋金花種子化學(xué)成分的研究

劉 艷王思藝 姜海冰 佘 現(xiàn) 匡海學(xué) 楊炳友*

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱150040； 2.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥物研究所，北京100000； 3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱150040）

洋金花種子為茄科植物白花曼陀羅Datura metelL.的干燥種子，具有祛風(fēng)勝濕、定喘消腫的功效，用于治療喘咳、風(fēng)寒濕痹、驚癇等病癥。經(jīng)課題組前期研究以及整理文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)洋金花種子具有較好的抗炎、鎮(zhèn)痛、抑菌、降糖的作用［1?2］，但是其主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)尚未明確。因此為加大其生物資源利用度，明確其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)開展了對(duì)洋金花種子化學(xué)成分的系統(tǒng)性研究，從中分離并鑒定出17個(gè)化合物，其中化合物4、10、16為首次從曼陀羅屬植物中分離得到，化合物7為首次從該植物中分離得到。

1 材料

洋金花種子采收自海南省臨高縣，并經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥用植物教研室樊銳鋒教授鑒定為為茄科曼陀羅屬植物白曼陀羅Datura metelL.的種子。標(biāo)本（標(biāo)本號(hào)2016035）保存于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中藥化學(xué)實(shí)驗(yàn)室。

Bruker?600／400 超導(dǎo)核磁共振光譜儀（德國(guó)Bruker 公司）；2424?2998型分析HPLC、2695?2996型分析HPLC、Q?TOF（ESI）高分辨質(zhì)譜儀、SunFire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）分析型色譜柱（美國(guó)Waters 公司）；LC?20AR，RID?20型半制備高效液相色譜儀、Shimadzu Shim?pack GIST C18（20 mm×250 mm，5 μm）制備型色譜柱（日本島津公司）；柱色譜用硅膠（80～100、200～300 目，青島海洋化工廠）；柱色譜用ODS?A?HG（日本YMC 公司）；Sephadex LH?20（瑞典GE Healthcare公司）；F254薄層色譜硅膠板、薄層色譜反相板（Rp?18）（德國(guó)Merck 公司）。柱色譜用化學(xué)試劑（分析純，天津富宇精細(xì)化工有限公司）；甲醇（色譜純，德國(guó)Merck 公司）。

2 提取與分離

稱取洋金花種子30 kg，經(jīng)干燥粉碎后用95%乙醇熱回流提取3 次，每次2.5 h，減壓濃縮得提取浸膏1.38 kg。浸膏與水混懸均勻，依次用石油醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取。乙酸乙酯萃取物（100 g）與水飽和正丁醇萃取物（200 g）分別經(jīng)正相硅膠柱色譜，依次以二氯甲烷?甲醇（100∶0～0∶100）梯度洗脫，所得到的洗脫液反復(fù)經(jīng)過TLC分析鑒別后合并，各自得到乙酸乙酯組分6個(gè)（Fr.A～F）和水飽和正丁醇組分14個(gè)（Fr.1～14）。

乙酸乙酯組分Fr.C 經(jīng)多次正相柱層析CH2Cl2?CH3OH（100∶1～0∶1）梯度洗脫分離純化得化合物1（2.0 mg）；Fr.E 經(jīng)正相硅膠柱以CH2Cl2?CH3OH（50∶ 1～0∶ 1）以及反相ODS 柱 以CH3OH?H2O（1∶1～1∶0）洗脫得到組分Fr.E 1～E6，F(xiàn)r.E 4～E 6分別通過Sephadex LH?20 與制備型 HPLC 通 過 CH3OH?H2O 洗脫得化合物2（5.0 mg）、3（2.0 mg）、4（2.0 mg）。

水飽和正丁醇部分Fr.3 經(jīng)ODS 反相柱CH3OH?H2O（1∶9～1∶0）得到Fr.3.1～3.13，其中Fr.3～4 通過制備型HPLC 經(jīng)CH3OH?H2O 洗脫得化合物9（10.0 mg），F(xiàn)r.3.7 通過制備型HPLC經(jīng)CH3OH?H2O 洗脫得化合物15（3.3 mg）、16（5.5 mg）；Fr.5 經(jīng)反相 ODS 經(jīng) CH3OH?H2O（1∶9～1∶0）梯度洗脫得組分Fr.5.1～5.12，同時(shí)Fr.5.2 通過制備型HPLC 經(jīng)CH3OH?H2O 洗脫得化合物10（3.0 mg）、13（9.1 mg）；Fr.6 通過反相ODS 經(jīng)CH3OH?H2O（1∶9～1∶0）洗脫得組分Fr.6.1～6.10，其中Fr.6.8 通過制備型HPLC 經(jīng)CH3OH?H2O 洗脫得化合物11（5.5 mg）、14（3.2 mg）；Fr.8 經(jīng)Sephadex LH?20 凝膠柱純化得化合物5（2.9 mg）；Fr.12 通過ODS 反相柱色譜經(jīng)CH3OH?H2O（2∶8～1∶0）梯度洗脫得組分Fr.12.1～12.12，將Fr.12.2 通過制備型HPLC 經(jīng)CH3OH?H2O 洗脫得化合物6（6.5 mg）、7（14.6 mg）；組分Fr.12.9 通過制備HPLC 經(jīng)CH3OH?H2O洗脫得化合物17（4.6 mg）；Fr.13 通過ODS 柱與制備型HPLC 經(jīng)CH3OH?H2O 洗脫得化合物12（6.7 mg）；Fr.14 通過ODS 柱經(jīng)CH3OH?H2O（3∶7～1∶0）與制備型HPLC CH3OH?H2O 洗脫得化合物8（6.5 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末，分子式C24H29NO9，HR?ESI?MSm／z：476.184 2［M＋ H ］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7.12（1H，d，J＝1.8 Hz，H?2），6.72（1H，d，J＝8.5 Hz，H?5），7.07（1H，dd，J＝8.5，1.8 Hz，H?6），7.47（1H，d，J＝15.7 Hz，H?7），6.49（1H，d，J＝15.7 Hz，H?8），7.07（2H，d，J＝8.4 Hz，H?2′，6′），6.72（2H，d，J＝8.4 Hz，H?3′，5′），2.75（2H，t，J＝7.4 Hz，H?7′），3.45（2H，t，J＝7.4 Hz，H?8′），4.96（1H，d，J＝7.4 Hz，H?1″），3.18～3.43（4H，m，H?2″，3″，4″，5″），3.86（1H，dd，J＝11.9，5.8 Hz，H?6″a），3.67（1H，dd，J＝11.9，2.1 Hz，H?6″b），3.88（3H，s，3?OCH3）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：131.1（C?1），112.3（C?2），151.0（C?3），149.5（C?4），117.5（C?5），122.7（C?6），141.4（C?7），120.5（C?8），168.8（C?9），131.3（C?1′），130.8×2（C?2′，6′），116.3×2（C?3′，5′），157.0（C?4′），35.8（C?7′），42.6（C?8′），102.3（C?1″），74.8（C?2″），77.9（C?3″），71.3（C?4″），78.3（C?5″），62.5（C?6″），56.7（3?OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［3］基本一致，故鑒定為trans?feruloyl tyramine 4?O?β?D?glucopyranoside。

化合物2：白色粉末，分子式C36H34N2O7，HR?ESI?MSm／z：607.236 6［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7.11（1H，d，J＝1.1 Hz，H?2），6.74（1H，overlap，H?5），7.02（1H，d，J＝8.5 Hz，H?6），7.44（1H，d，J＝15.7 Hz，H?7），6.40（1H，d，J＝15.7 Hz，H?8），6.75（1H，overlap，H?2′），6.72（1H，overlap，H?5′），7.06（1H，d，J＝8.0 Hz，H?6′），2.76（2H，m，H?7′），3.45（2H，m，H?8′），3.89（3H，s，3?OCH3），3.82（3H，s，4′?OCH3），6.76（1H，overlap，H?1″），6.79（1H，overlap，H?2″），6.75（1H，overlap，H?3″），7.02（1H，d，J＝8.5 Hz，H?4″），2.75（2H，m，H?5″），3.54（1H，dd，J＝13.2，6.3 Hz，H?6″a），3.45（1H，dd，J＝13.2，6.8 Hz，H?6″b），7.06（1H，d，J＝8.0 Hz，H?9″），6.74（1H，overlap，H?10″），6.91（1H，d，J＝1.2 Hz，H?12″），5.89（1H，d，J＝8.2 Hz，H?13″），4.15（1H，d，J＝8.2 Hz，H?13a″）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：131.1（C?1），113.1（C?2），151.2（C?3），146.0（C?4），116.4（C?5），130.8（C?6），141.8（C?7），119.4（C?8），169.0（C?9），130.4（C?1′），116.3（C?2′），156.9（C?3′），149.3（C?4′），116.4（C?5′），130.8（C?6′），35.8（C?7′），42.2（C?8′），56.8（3?OCH3），56.4（4′?OCH3），116.3（C?1″），120.0（C?2″），118.1（C?3″），130.8（C?4″），35.3（C?5″），42.6（C?6″），172.9（C?8″），130.9（C?9″），116.3（C?10″），148.1（C?11″），110.5（C?12″），90.0（C?13″），129.4（C?1a″），130.9（C?4a″），120.0（C?8a″），132.6（C?12a″），58.7（C?13a″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］基本一致，故鑒定為chenoalbicin。

化合物3：白色粉末，分子式C9H11NO2，HR?ESI?MSm／z：166.078 9［M＋ H ］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7.28（1H，m，H?2），7.34（1H，m，H?3），7.34（1H，m，H?4），7.34（1H，m，H?5），7.28（1H，m，H?6），3.84（2H，m，H?2′），3.78（2H，t，J＝5.5 Hz，H?3′）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：137.2（C?1），130.1（C?2），129.3（C?3），129.0（C?4），129.3（C?5），130.1（C?6），173.0（C?1′），55.9（C?2′），64.4（C?3′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］基本一致，故鑒定為N?（2?hydroxyl）?benzamide。

化合物4：白色粉末，分子式C20H32O7，HR?ESI?MSm／z：385.214 8［M＋ H ］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：2.16（1H，brd，J＝17.0 Hz，H?2a），2.54（1H，brd，J＝17.0 Hz，H?2b），5.84（1H，brs，H?4），5.98（1H，brd，J＝15.0 Hz，H?7），5.73（1H，dd，J＝15.0，7.0 Hz，H?8），4.53（1H，m，H?9），1.31（3H，d，J＝8.4 Hz，H?10），1.02（3H，s，H?11），1.03（3H，s，H?12），1.91（3H，d，J＝1.2 Hz，H?13），4.85（1H，d，J＝7.5 Hz，H?1′），3.18～3.43（4H，m，H?2′，3′，4′，5′），3.63（1H，dd，J＝11.9，5.7 Hz，H?6′a），4.08（1H，dd，J＝11.9，2.5 Hz，H?6′b）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：42.5（C?1），50.7（C?2），201.3（C?3），127.2（C?4），167.3（C?5），80.0（C?6），131.6（C?7），135.3（C?8），77.3（C?9），21.2（C?10），23.5（C?11），24.7（C?12），19.6（C?13），102.7（C?1′），75.2（C?2′），78.1（C?3′），71.6（C?4′），78.0（C?5′），62.8（C?6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］基本一致，故鑒定為roseoside。

化合物5：淡黃色無定形粉末，分子式C51H82O22，HR?ESI?MSm／z：1 047.529 8［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：1.08（1H，m，H?1a），0.91（1H，m，H?1b），2.02（1H，m，H?2a），1.67（1H，m，H?2b），3.48（1H，m，H?3），2.45（1H，m，H?4a），2.30（1H，m，H?4b），5.37（1H，brs，H?6），1.04（1H，m，H?7a），1.49（1H，m，H?7b），1.56（1H，m，H?8），0.97（1H，m，H?9），1.04（2H，m，H?11），1.32（1H，m，H?12a），1.11（1H，m，H?12b），1.07（1H，m，H?14），1.98（1H，m，H?15a），1.42（1H，m，H?15b），4.41（1H，m，H?16），1.76（1H，overlap，H?17），0.81（3H，s，H?18），1.06（3H，s，H?19），1.92（1H，m，H?20），0.96（3H，d，J＝7.0 Hz，H?21），1.65（2H，m，H?23），1.65（2H，m，H?24），2.00（1H，m，H?25），3.65（1H，m，H?26a），3.45（1H，m，H?26b），3.22（1H，m，H?27a），3.90（1H，overlap，H?27b），4.55（1H，d，J＝7.5 Hz，H?1′），3.34～3.58（4H，m，H?2′，3′，4′，5′），3.82（1H，brd，J＝11.2 Hz，H?6′a），3.65（1H，dd，J＝11.2，3.1 Hz，H?6′b），5.24（1H，brs，H?1″），3.96（1H，brs，H?2″），3.67（1H，dd，J＝9.2，3.1 Hz，H?3″），3.45（1H，t，J＝9.2 Hz，H?4″），4.14（1H，q，J＝9.2 Hz，H?5″），1.27（3H，d，J＝6.2 Hz，H?6″），4.86（1H，overlap，H?1?），3.90（1H，brs，H?2?），3.69（1H，brd，J＝9.5 Hz，H?3?），3.42（1H，t，J＝9.5 Hz，H?4?），3.96（1H，overlap，H?5?），1.27（3H，d，J＝6.0 Hz，H?6?），4.50（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1″″），3.30～3.52（4H，m，H?2″″，3″″，4″″，5″″），3.23（1H，dd，J＝11.0，5.5 Hz，H?6″″ a），3.45（1H，m，H?6″″b）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：41.4（C?1），33.2（C?2），79.3（C?3），38.6（C?4），141.9（C?5），122.6（C?6），30.8（C?7），32.8（C?8），51.7（C?9），38.0（C?10），21.9（C?11），39.6（C?12），41.4（C?13），57.8（C?14），32.8（C?15），80.9（C?16），63.8（C?17），16.8（C?18），19.8（C?19），43.0（C?20），14.9（C?21），110.9（C?22），30.8（C?23），24.3（C?24），39.3（C?25），65.1（C?26），64.4（C?27），100.3（C?1′），78.2（C?2′），75.9（C?3′），82.3（C?4′），77.8（C?5′），62.5（C?6′），102.1（C?1″），72.3（C?2″），72.4（C?3″），74.0（C?4″），69.7（C?5″），17.9（C?6″），102.6（C?1?），72.4（C?2?），72.3（C?3?），74.0（C?4?），71.1（C?5?），17.9（C?6?），106.3（C?1″″），75.9（C?2″″），79.3（C?3″″），71.2（C?4″″），78.2（C?5″″），62.5（C?6″″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］基本一致，故鑒定為dioscorosides D。

化合物6：淡黃色無定形粉末，分子式C45H72O18，HR?ESI?MSm／z：901.475 7［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：1.88（1H，m，H?1a），1.08（1H，m，H?1b），1.90（1H，m，H?2a），1.60（1H，m，H?2b），3.59（1H，m，H?3），2.45（1H，m，H?4a），2.30（1H，m，H?4b），5.37（1H，brs，H?6），2.37（1H，overlap，H?7a），1.58（1H，overlap，H?7b），1.56（1H，m，H?8），0.97（1H，m，H?9），1.56（2H，m，H?11），1.76（1H，m，H?12a），1.23（1H，m，H?12b），1.15（1H，m，H?14），1.98（1H，m，H?15a），1.29（1H，m，H?15b），4.41（1H，m，H?16），1.76（1H，overlap，H?17），0.81（3H，s，H?18），1.04（3H，s，H?19），1.92（1H，m，H?20），0.95（3H，d，J＝7.0 Hz，H?21），1.73（1H，m，H?23a），1.58（1H，m，H?23b），1.71（1H，m，H?24a），1.62（1H，m，H?24b），1.47（1H，m，H?25），3.65（1H，overlap，H?26a），3.45（1H，overlap，H?26b），1.23（3H，d，J＝6.2 Hz，H?27），4.39（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1′），3.25～3.58（4H，m，H?2′，3′，4′，5′），3.82（1H，brd，J＝11.2 Hz，H?6′a），3.65（1H，dd，J＝11.2，3.1 Hz，H?6′b），5.22（1H，d，J＝1.2 Hz，H?1″），3.89（1H，dd，J＝3.3，1.2 Hz，H?2″），3.67（1H，dd，J＝9.2，3.3 Hz，H?3″），3.45（1H，t，J＝9.2 Hz，H?4″），4.13（1H，q，J＝9.2 Hz，H?5″），1.23（3H，d，J＝6.2 Hz，H?6″），4.51（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1?），3.27～3.42（4H，m，H?2?，3?，4?，5?），3.63（1H，dd，J＝11.9，6.0 Hz，H?6?a），3.86（1H，dd，J＝11.9，2.1 Hz，H?6?b）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：41.4（C?1），33.2（C?2），78.6（C?3），38.6（C?4），141.9（C?5），122.6（C?6），30.8（C?7），32.8（C?8），51.7（C?9），38.0（C?10），22.0（C?11），39.6（C?12），40.9（C?13），57.8（C?14），32.7（C?15），81.0（C?16），63.7（C?17），16.8（C?18），19.8（C?19），43.0（C?20），14.9（C?21），110.9（C?22），32.1（C?23），24.0（C?24），38.0（C?25），97.1（C?26），17.2（C?27），100.4（C?1′），77.9（C?2′），76.2（C?3′），82.3（C?4′），77.8（C?5′），62.5（C?6′），102.0（C?1″），72.2（C?2″），72.4（C?3″），73.9（C?4″），69.7（C?5″），17.9（C?6″），104.6（C?1?），75.1（C?2?），79.4（C?3?），71.4（C?4?），78.1（C?5?），61.9（C?6?）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］基本一致，故鑒定為（25R，26R）?3β? ｛β?D?glucopyranosyl?（1→4?［α?L?rhamnopyranosyl?（1→2）］?β?D?glucopyranosyloxy｝ spirost?5?en?27?ol。

化合物7：白色無定形粉末，分子式C45H72O16，HR?ESI?MSm／z：869.480 0［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：1.83（1H，m，H?1a），1.04（1H，m，H?1b），1.88（1H，m，H?2a），1.57（1H，m，H?2b），3.64（1H，m，H?3），2.46（1H，brd，J＝10.3 Hz，H?4a），2.27（1H，t，J＝10.3 Hz，H?4b），5.38（1H，brd，J＝4.8 Hz，H?6），2.02（1H，m，H?7a），1.58（1H，m，H?7b），1.68（1H，m，H?8），0.97（1H，m，H?9），1.56（2H，m，H?11），1.76（1H，m，H?12a），1.23（1H，m，H?12b），1.14（1H，m，H?14），2.02（1H，m，H?15a），1.30（1H，m，H?15b），4.40（1H，m，H?16），1.75（1H，m，H?17），0.87（3H，s，H?18），1.07（3H，s，H?19），1.92（1H，m，H?20），0.99（3H，d，J＝6.8 Hz，H?21），1.73（1H，m，H?23a），1.58（1H，m，H?23b），1.71（1H，m，H?24a），1.62（1H，m，H?24b），1.47（1H，m，H?25），5.10（2H，d，J＝9.6 Hz，H?26），0.80（3H，d，J＝6.4 Hz，H?27），4.51（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1′），3.25～3.58（4H，m，H?2′，3′，4′，5′），3.82（1H，brd，J＝11.2 Hz，H?6′a），3.65（1H，dd，J＝11.2，3.1 Hz，H?6′b），5.24（1H，brs，H?1″），3.90（1H，brs，H?2″），3.67（1H，dd，J＝9.2，3.1 Hz，H?3″），3.45（1H，t，J＝9.2 Hz，H?4″），4.14（1H，q，J＝9.2 Hz，H?5″），1.27（3H，d，J＝6.2 Hz，H?6″），4.86（1H，brs，H?1?），3.86（1H，brs，H?2?），3.66（1H，brd，J＝9.0 Hz，H?3?），3.42（1H，t，J＝9.0 Hz，H?4?），3.95（1H，overlap，H?5?），1.29（3H，d，J＝6.5 Hz，H?6?）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：38.5（C?1），30.7（C?2），79.2（C?3），39.4（C?4），142.0（C?5），122.6（C?6），33.1（C?7），32.7（C?8），51.6（C?9），38.0（C?10），21.9（C?11），40.9（C?12），41.3（C?13），57.8（C?14），32.6（C?15），82.4（C?16），63.4（C?17），16.7（C?18），19.8（C?19），42.8（C?20），14.8（C?21），114.3（C?22），31.8（C?23），29.5（C?24），35.5（C?25），78.5（C?26），17.2（C?27），100.5（C?1′），77.9（C?2′），76.2（C?3′），82.5（C?4′），77.8（C?5′），62.5（C?6′），102.1（C?1″），72.2（C?2″），72.4（C?3″），73.9（C?4″），69.8（C?5″），17.4（C?6″），102.9（C?1?），72.4（C?2?），72.1（C?3?），73.7（C?4?），70.6（C?5?），17.9（C?6?）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］基本一致，故鑒定為薯蕷皂苷。

化合物8：黃色無定形粉末，分子式C46H76O18，HR?ESI?MSm／z：917.503 2［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：1.88（1H，m，H?1a），1.08（1H，m，H?1b），1.90（1H，m，H?2a），1.60（1H，m，H?2b），3.59（1H，m，H?3），2.45（1H，m，H?4a），2.30（1H，m，H?4b），5.37（1H，br.s，H?6），2.37（1H，overlap，H?7a），1.58（1H，overlap，H?7b），1.56（1H，m，H?8），0.97（1H，m，H?9），1.56（2H，m，H?11），1.76（1H，m，H?12a），1.23（1H，m，H?12b），1.15（1H，m，H?14），1.98（1H，m，H?15a），1.29（1H，m，H?15b），4.41（1H，m，H?16），1.76（1H，overlap，H?17），0.81（3H，s，H?18），1.04（3H，s，H?19），2.18（1H，overlap，H?20），1.01（3H，d，J＝7.0 Hz，H?21），1.73（1H，m，H?23a），1.58（1H，m，H?23b），1.71（1H，m，H?24a），1.62（1H，m，H?24b），1.47（1H，m，H?25），3.65（1H，overlap，H?26a），3.45（1H，overlap，H?26b），0.95（3H，d，J＝6.2 Hz，H?27），3.14（3H，s，22?OCH3），4.39（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1′），3.25～3.58（4H，m，H?2′，3′，4′，5′），3.82（1H，brd，J＝11.2 Hz，H?6′a），3.65（1H，dd，J＝11.2，3.1 Hz，H?6′b），5.22（1H，d，J＝1.2 Hz，H?1″），3.89（1H，dd，J＝3.3，1.2 Hz，H?2″），3.67（1H，dd，J＝9.2，3.3 Hz，H?3″），3.45（1H，t，J＝9.2 Hz，H?4″），4.13（1H，q，J＝9.2 Hz，H?5″），1.23（3H，d，J＝6.2 Hz，H?6″），4.51（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1?），3.27～3.42（4H，m，H?2?，3?，4?，5?），3.63（1H，dd，J＝11.9，6.0 Hz，H?6?a），3.86（1H，dd，J＝11.9，2.1 Hz，H?6?b）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：41.4（C?1），33.2（C?2），78.6（C?3），38.6（C?4），141.9（C?5），122.6（C?6），30.8（C?7），32.8（C?8），51.7（C?9），38.0（C?10），22.0（C?11），39.6（C?12），40.9（C?13），57.8（C?14），32.7（C?15），81.0（C?16），63.7（C?17），16.8（C?18），19.8（C?19），43.0（C?20），14.9（C?21），110.9（C?22），32.1（C?23），24.0（C?24），38.0（C?25），97.1（C?26），17.2（C?27），47.8（22?OCH3），100.4（C?1′），77.9（C?2′），76.2（C?3′），82.3（C?4′），77.8（C?5′），62.5（C?6′），102.0（C?1″），72.2（C?2″），72.4（C?3″），73.9（C?4″），69.7（C?5″），17.9（C?6″），104.6（C?1?），75.1（C?2?），79.4（C?3?），71.4（C?4?），78.1（C?5?），61.9（C?6?）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］基本一致，故鑒定為methylprototribestin。

化合物9：淡黃色無定形粉末，分子式C51H84O22，HR?ESI?MSm／z：1 049.553 6［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：1.89（1H，m，H?1a），1.10（1H，m，H?1b），1.92（1H，m，H?2a），1.62（1H，m，H?2b），3.37（1H，m，H?3），2.48（1H，overlap，H?4a），2.31（1H，t，J＝10.3 Hz，H?4b），5.38（1H，d，J＝5.0 Hz，H?6），2.02（1H，m，H?7a），1.58（1H，m，H?7b），1.68（1H，m，H?8），0.97（1H，m，H?9），1.56（2H，m，H?11），1.76（1H，m，H?12a），1.23（1H，m，H?12b），1.14（1H，m，H?14），2.02（1H，m，H?15a），1.30（1H，m，H?15b），4.33（1H，m，H?16），1.75（1H，overlap，H?17），0.82（3H，s，H?18），1.04（3H，s，H?19），2.16（1H，m，H?20），0.95（3H，d，J＝6.8 Hz，H?21），1.73（1H，m，H?23a），1.58（1H，m，H?23b），1.71（1H，m，H?24a），1.62（1H，m，H?24b），1.47（1H，m，H?25），3.81（1H，dd，J＝9.6，7.7 Hz，H?26a），3.39（1H，overlap，H?26b），0.93（3H，d，J＝6.4 Hz，H?27），4.48（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1′），3.25～3.58（4H，m，H?2′，3′，4′，5′），3.82（1H，brd，J＝11.2 Hz，H?6′a），3.65（1H，dd，J＝11.2，3.1 Hz，H?6′b），5.19（1H，brs，H?1″），3.90（1H，brs，H?2″），3.67（1H，dd，J＝9.2，3.1 Hz，H?3″），3.45（1H，t，J＝9.2 Hz，H?4″），4.14（1H，overlap，H?5″），1.27（3H，d，J＝6.2 Hz，H?6″），4.82（1H，brs，H?1?），3.86（1H，brs，H?2?），3.66（1H，brd，J＝9.0 Hz，H?3?），3.42（1H，t，J＝9.0 Hz，H?4?），3.95（1H，overlap，H?5?），1.29（3H，d，J＝6.5 Hz，H?6?），4.22（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1″″），3.18～ 3.38（4H，m，H?2″″，3″″，4″″，5″″），3.63（1H，dd，J＝11.9，6.0 Hz，H?6″″a），3.86（1H，dd，J＝11.9，2.1 Hz，H?6″″b）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：38.6（C?1），30.8（C?2），79.3（C?3），39.6（C?4），141.9（C?5），122.6（C?6），32.8（C?7），32.8（C?8），51.8（C?9），38.1（C?10），22.0（C?11），40.9（C?12），41.8（C?13），57.8（C?14），33.2（C?15），82.5（C?16），65.0（C?17），16.8（C?18），19.8（C?19），41.2（C?20），16.1（C?21），114.0（C?22），36.9（C?23），29.0（C?24），35.0（C?25），76.0（C?26），17.3（C?27），100.3（C?1′），80.2（C?2′），76.6（C?3′），79.4（C?4′），78.1（C?5′），62.9（C?6′），102.3（C?1″），72.4（C?2″），72.2（C?3″），73.7（C?4″），69.7（C?5″），17.8（C?6″），103.0（C?1?），72.4（C?2?），72.2（C?3?），74.0（C?4?），70.7（C?5?），17.9（C?6?），104.6（C?1″″），75.2（C?2″″），78.2（C?3″″），71.8（C?4″″），77.8（C?5″″），62.0（C?6″″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］基本一致，故鑒定為3β，22α，26?trihydroxyfurost?5?ene?3?O?β?chacotrioside?26?O?β?D?glucopyranoside。

化合物10：淡黃色無定形粉末，分子式C28H29NO7，HR?ESI?MSm／z：492.202 2［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7.07（1H，d，J＝1.5 Hz，H?2），7.12（1H，s，H?6），7.46（1H，d，J＝15.7 Hz，H?7），6.42（1H，d，J＝15.7 Hz，H?8），6.93（1H，d，J＝2.0 Hz，H?2′），6.77（1H，d，J＝8.2 Hz，H?5′），6.81（1H，dd，J＝8.2，2.0 Hz，H?6′），5.55（1H，d，J＝6.4 Hz，H?7′），3.51（1H，dd，J＝8.0，6.7 Hz，H?8′），3.83（1H，d，J＝5.2 Hz，H?9′），7.04（2H，d，J＝8.4 Hz，H?2″，6″），6.71（2H，d，J＝8.5 Hz，H?3″，5″），2.75（2H，t，J＝7.4 Hz，H?7″），3.45（2H，t，J＝7.4 Hz，H?8″），3.81（3H，s，5?OCH3），3.89（3H，s，3′?OCH3）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：130.8（C?1），113.2（C?2），145.7（C?3），151.3（C?4），130.2（C?5），116.2（C?6），141.9（C?7），119.7（C?8），169.0（C?9），134.1（C?1′），110.5（C?2′），149.1（C?3′），147.7（C?4′），116.2（C?5′），118.5（C?6′），89.3（C?7′），54.8（C?8′），64.6（C?9′），131.2（C?1″），130.7×2（C?2″，6″），116.3×2（C?3″，5″），35.8（C?7″），42.5（C?8″），56.4（5?OCH3），56.7（3′?OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］基本一致，故鑒定為枸杞酰胺C。

化合物11：白色粉末，分子式C28H27NO7，HR?ESI?MSm／z：490.186 6［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7.00（2H，d，J＝8.4 Hz，H?2，6），6.74（2H，d，J＝8.4 Hz，H?3，5），2.75（1H，t，J＝7.6 Hz，H?7），3.46（1H，t，J＝7.6 Hz，H?8），7.35（1H，d，J＝1.2 Hz，H?2′），6.74（1H，d，J＝8.2 Hz，H?5′），6.93（1H，dd，J＝8.2，1.2 Hz，H?6′），6.62（1H，d，J＝12.6 Hz，H?7′），5.82（1H，d，J＝12.6 Hz，H?8′），7.12（1H，d，J＝1.4 Hz，H?2″），6.80（1H，d，J＝8.4 Hz，H?5″），7.03（1H，dd，J＝8.4，1.4 Hz，H?6″），7.44（1H，d，J＝15.8 Hz，H?7″），6.42（1H，d，J＝15.8 Hz，H?8″），3.82（3H，s，3′?OCH3），3.88（3H，s，3″?OCH3）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：131.2（C?1），130.7×2（C?2，6），116.2×2（C?3，5），156.9（C?4），35.6（C?7），42.4（C?8），128.5（C?1′），113.9（C?2′），149.3（C?3′），148.5（C?4′），116.4（C?5′），124.8（C?6′），138.4（C?7′），121.6（C?8′），170.3（C?9′），128.2（C?1″），111.6（C?2″），150.1（C?3″），149.3（C?4″），115.8（C?5″），123.7（C?6″），145.6（C?7″），117.7（C?8″），172.2（C?9″），56.4（3′?OCH3），56.4（3″?OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13 ］基本一致，故鑒定為hibiscuwanin B。

化合物12：白色無定形粉末，分子式C19H30O9，HR?ESI?MSm／z：403.196 8［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：1.33（1H，m，H?2a），1.92（1H，ddd，J＝1.9，3.9，12.3 Hz，H?2b），4.32（1H，m，H?3），1.37（1H，m，12.0 Hz，H?4a），2.48（1H，ddd，J＝2.0，3.9，13.4 Hz，H?4b），5.88（1H，s，H?7），2.19（3H，s，H?10），1.37（3H，s，H?11），1.15（3H，s，H?12），1.46（3H，s，H?13），4.52（1H，d，J＝7.7 Hz，H?1′），3.14～3.35（4H，m，H?2′，3′，4′，5′），3.61（1H，dd，J＝11.8，5.3 Hz，H?6′a），3.81（1H，dd，J＝11.8，2.1 Hz，H?6′b）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：37.2（C?1），50.0（C?2），63.9（C?3），48.3（C?4），78.8（C?5），141.7（C?6），101.6（C?7），213.1（C?8），200.9（C?9），26.8（C?10），30.3（C?11），32.6（C?12），26.8（C?13），98.8（C?1′），75.5（C?2′），78.7（C?3′），71.8（C?4′），77.9（C?5′），62.9（C?6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14］基本一致，故鑒定為lippianoside E。

化合物13：淡黃色無定形粉末，分子式C27H30O16，HR?ESI?MSm／z：611.161 2［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：6.19（1H，d，J＝1.7 Hz，H?6），6.39（1H，brs，H?8），8.05（1H，d，J＝8.8 Hz，H?2′），6.91（1H，d，J＝8.8 Hz，H?3′），6.89（1H，d，J＝8.8 Hz，H?5′），8.09（1H，d，J＝8.8 Hz，H?6′），5.44（1H，d，J＝7.5 Hz，H?1″），3.32～3.61（6H，m，H?2″，3″，4″，5″，6″），4.76（1H，d，J＝7.5 Hz，H?1?），3.51～3.88（6H，m，H?2?，3?，4?，5?，6?）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：158.6（C?2），134.9（C?3），179.7（C?4），163.2（C?5），99.9（C?6），165.9（C?7），94.7（C?8），158.9（C?9），105.8（C?10），122.8（C?1′），132.4×2（C?2′，6′），116.3×2（C?3′，5′），161.6（C?4′），101.0（C?1″），82.5（C?2″），77.9（C?3″），71.3（C?4″），78.2（C?5″），62.6（C?6″），104.7（C?1?），75.6（C?2?），77.9（C?3?），71.1（C?4?），78.3（C?5?），62.5（C?6?）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［15］基本一致，故鑒定為sophoraflavonoloside。

化合物14：淡黃色無定形粉末，分子式C18H26O11，HR?ESI?MSm／z：419.153 3［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7.07（2H，d，J＝8.5 Hz，H?2，6），6.70（2H，d，J＝8.5 Hz，H?3，5），2.82（1H，t，J＝7.4 Hz，H?7a），4.01（1H，m，H?7b），4.30（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1′），3.49～3.77（4H，m，H?2′，3′，4′，5′），3.72（2H，dd，J＝11.5，5.7 Hz，H?6′），4.28（1H，d，J＝7.8 Hz，H?1″），3.22（1H，dd，J＝9.0，7.8 Hz，H?2″），3.35（1H，t，J＝9.0 Hz，H?3″），3.35（1H，t，J＝9.0 Hz，H?4″），3.85（1H，dd，J＝12.6，3.0 Hz，H?5″）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：130.8（C?1），131.0×2（C?2，6），116.2×2（C?3，5），156.9（C?4），72.1（C?7），104.4（C?1′），75.0（C?2′），77.9（C?3′），71.6（C?4′），76.9（C?5′），69.5（C?6′），105.1（C?1″），72.4（C?2″），74.2（C?3″），69.5（C?4″），66.7（C?5″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［16］基本一致，故鑒定為4?hydroxybenzyl β?primeveroside。

化合物15：白色粉末，分子式C16H22O4，HR?ESI?MSm／z：279.159 6［M＋ H ］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：7.71（2H，dd，J＝5.8，3.3 Hz，H?2，5），7.60（2H，dd，J＝ 5.8，3.3 Hz，H?3，4），4.28（4H，t，J＝6.6 Hz，H?1′，1″），1.72（4H，m，H?2′，2″），1.44（4H，m，H?3′，3″），0.97（6H，t，J＝7.4 Hz，H?4′，4″）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：129.9（C?1），132.3×2（C?2，5），133.5×2（C?3，4），129.9（C?6），169.3×2（C?7，8），66.7×2（C?1′，1″），31.7 × 2（C?2′，2″），20.3 × 2（C?3′，3″），14.0×2（C?4′，4″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［17］基本一致，故鑒定為dibutyl phthalate。

化合物16：淡黃色無定形粉末，分子式C17H23NO3，HR?ESI?MSm／z：290.175 6［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：3.70（1H，m，H?1），1.71（2H，m，H?2），5.04（1H，t，J＝4.8 Hz，H?3），1.79（2H，m，H?4），3.08（1H，m，H?5），1.90（2H，m，H?6），2.31（2H，m，H?7），7.23～7.35（5H，m，H?2′，3′，4′，5′，6′），3.85（1H，m，H?7′），3.80（1H，m，H?9′a），3.80（1H，dd，J＝10.0，8.5 Hz，H?9′ b），2.72（3H，s，N?CH3）；13C? NMR（CD3OD，100 MHz）δ：63.7（C?1），35.7（C?2），65.9（C?3），35.7（C?4），63.7（C?5），24.7（C?6），30.7（C?7），137.2（C?1′），129.3×2（C?2′，6′），130.0×2（C?3′，5′），128.9（C?4′），55.9（C?7′），172.9（C?8′），64.5（C?9′），48.4（N?CH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［18］基本一致，故鑒定為莨菪堿。

化合物17：黃色無定形粉末，分子式C17H32O10，HR?ESI?MSm／z：397.207 4［M＋H］＋。1H?NMR（CD3OD，400 MHz）δ：4.21（1H，dd，J＝12.4，7.6 Hz，H?1a），4.37（1H，dd，J＝12.4，6.9 Hz，H?1b），1.60（2H，m，H?2），1.38（2H，m，H?3），1.38（2H，m，H?4），1.34（2H，m，H?5），0.90（3H，t，J＝7.2 Hz，H?6），4.36（1H，d，J＝8.2 Hz，H?1′），3.18～3.42（4H，m，H?2′，3′，4′，5′），3.73（1H，dd，J＝11.7，5.5 Hz，H?6′a），4.08（1H，dd，J＝11.7，2.0 Hz，H?6′b），4.30（1H，d，J＝6.9 Hz，H?1″），3.53～3.85（5H，m，H?2″，3″，4″，5″）；13C?NMR（CD3OD，100 MHz）δ：71.1（C?1），30.8（C?2），26.8（C?3），32.9（C?4），23.7（C?5），14.4（C?6），104.4（C?1′），75.1（C?2′），77.9（C?3′），71.7（C?4′），76.8（C?5′），69.5（C?6′），105.2（C?1″），72.4（C?2″），74.2（C?3″），69.5（C?4″），66.7（C?5″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［19］基本一致，故鑒定為creoside Ⅳ。

4 討論

本實(shí)驗(yàn)對(duì)洋金花種子進(jìn)行了較系統(tǒng)性的化學(xué)成分研究，分離鑒定出17個(gè)化合物。其中，化合物1～3、10～11屬于酰胺木脂素類，該類成分已報(bào)道存在明顯的抗氧化、抑制乙酰膽堿酯酶等生物活性［20］；萜類化合物4、12具有血管緊張素酶抑制、抗氧化等活性［21?14］；黃酮類化合物13具有抑制HL?60細(xì)胞生長(zhǎng)的作用［22］；此外，其余化合物均有一定程度的抗炎活性。以期該研究為洋金花種子資源的開發(fā)和利用提供參考，同時(shí)為其主要藥效活性的物質(zhì)基礎(chǔ)的深入研究提供數(shù)據(jù)支持。