豬瘟的主要致病機(jī)制以及臨床診斷要點(diǎn)

劉東堯

(西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

1 豬瘟病毒概述

豬瘟病毒(classical swine fever virus)屬于黃病毒科瘟病毒屬，是單股正鏈RNA病毒，具有囊膜，囊膜外具有纖突。病毒粒子呈球形，核衣殼是對(duì)稱的20面體。位于病毒核心的RNA總長(zhǎng)約為12.3 kB蛋白質(zhì)編碼區(qū)兩端由NTR相連接?；蚪M編碼13種蛋白質(zhì)。4個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白和9個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白。4個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白分別是核心蛋白(C)和包膜糖蛋白E1、E2和ERNS。9個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白分別是Npro、p7、NS2- 3、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B。這些非結(jié)構(gòu)蛋白在病毒復(fù)制增殖的過(guò)程中起到各種各樣的作用。CD 46是豬瘟病毒感染細(xì)胞的主要受體，在用細(xì)胞培養(yǎng)豬瘟病毒時(shí)，通常情況使用豬源原代或者傳代細(xì)胞來(lái)培養(yǎng)豬瘟病毒。豬瘟病毒由受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，并且開(kāi)始增殖。在體外條件下，用于培養(yǎng)豬瘟病毒的細(xì)胞不產(chǎn)生病變。宿主細(xì)胞膜表面的CD 46與硫酸乙酰肝素被認(rèn)為是介導(dǎo)病毒內(nèi)吞的受體，ERNS首先與細(xì)胞膜表面的糖胺聚糖相互作用并且在E2E1異二聚體的輔助下與CD 46相互作用，刺激細(xì)胞開(kāi)始內(nèi)吞帶囊膜的病毒顆粒。在細(xì)胞質(zhì)中病毒囊膜與內(nèi)體相融合之后，病毒粒子被釋放進(jìn)細(xì)胞質(zhì)中[1]。豬瘟病毒RNA在5′端NTR區(qū)有內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)，引導(dǎo)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體與此序列相互結(jié)合，開(kāi)始翻譯出一條長(zhǎng)肽鏈之后，通過(guò)病毒蛋白酶和細(xì)胞蛋白酶的作用首先將Npro剪切下來(lái)，接著細(xì)胞蛋白酶依次將C-protein、Erns、E1、E2、p7和NS2-3從初始的長(zhǎng)肽鏈中剪切下來(lái)。NS2-3經(jīng)過(guò)自身半胱氨酸蛋白酶的催化作用，變?yōu)镹S2和NS3。之前有學(xué)者認(rèn)為NS2-3不應(yīng)該被單獨(dú)稱為一種非結(jié)構(gòu)蛋白，應(yīng)被視為NS2，NS3非結(jié)構(gòu)蛋白前體，因?yàn)榘l(fā)揮真正功能的是NS2-3經(jīng)過(guò)自我催化生成的產(chǎn)物NS2和NS3。但最新的研究表明在NS4A的輔助下的NS2-3是豬瘟病毒形成具有感染性病毒粒子不可或缺的，而且NS2一旦從NS2-3切除之后不再對(duì)病毒的組裝起到任何幫助。病毒的結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白都翻譯完成后，并且完成翻譯修飾之后。依賴RNA的RNA聚合酶以豬瘟病毒的正鏈RNA為模板，合成負(fù)鏈RNA。再以此負(fù)鏈RNA為模板合成豬瘟病毒的正鏈RNA。正鏈RNA在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中被封裝在衣殼中，并在高爾基體中經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的成熟，最后通過(guò)胞吐作用分泌到細(xì)胞外。豬瘟病毒具有明顯的基因多樣性和地域分布特征。豬瘟病毒毒株可以被分為3個(gè)不同的基因型，每一種基因型又可以被細(xì)分為3～4種亞基因型。在2013湖南省報(bào)道了一列新的豬瘟毒株2.1c，此毒株與2.1a和2.1b的區(qū)別是在E2蛋白的777～779位點(diǎn)，發(fā)生了氨基酸的替換，由SPA→TPV。雖然豬瘟基因型數(shù)量多，而且作為RNA病毒本身就具有高變異性的特征。但豬瘟病毒只有1個(gè)血清型，高變異性并沒(méi)有影響到豬瘟疫苗的有效性。豬瘟病毒的分布具有很明顯地域特征，3型豬瘟病毒只有在亞洲被報(bào)道過(guò)，20世紀(jì)90年之后在歐洲分離到的豬瘟毒株只有2型，和90年代前在歐洲分離到的1型豬瘟病毒有著明顯的區(qū)別。在過(guò)去的幾十年中2型豬瘟是全球范圍內(nèi)流行最廣的毒株。從美洲分離到的毒株，只有1型豬瘟。從阿根廷、巴西、墨西哥分離到的是1.1型豬瘟病毒，在洪都拉斯和危地馬拉分離到的是1.3型豬瘟病毒，以及從古巴分離到的是1.4型豬瘟病毒。關(guān)于中東和非洲地區(qū)的豬瘟病毒分離鑒定的報(bào)道只有兩則，一則是2005年，南非報(bào)道了豬瘟的爆發(fā)，另一則是在2009年以色列報(bào)道的豬瘟的暴發(fā)，這2次疫情的爆發(fā)都是由2.1型毒株所引起的。在中國(guó)流行的豬瘟病毒毒種類相對(duì)較多，包括1.1、2.1、2.2和2.3型豬瘟[2]。

2 致病機(jī)制與病理變化

多數(shù)豬瘟病毒最先感染扁桃體，隨后經(jīng)淋巴循環(huán)傳播到周圍的淋巴組織。在淋巴組織中豬瘟病毒進(jìn)一步的復(fù)制增殖，入侵血液循環(huán)，在脾臟，骨髓，內(nèi)臟淋巴結(jié)等組織開(kāi)始定殖。豬瘟病毒對(duì)于樹突細(xì)胞，巨噬細(xì)胞具有很高的親和力，異常激活的巨噬細(xì)胞分泌各種誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡的細(xì)胞因子，這種誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡的影響甚至超過(guò)了由病毒本身增殖而導(dǎo)致的細(xì)胞病變。扁桃體上皮發(fā)生壞死和潰爛，扁桃體周圍的淋巴結(jié)尤其是下頜淋巴結(jié)出血、腫大、壞死。脾的邊緣有鋸齒狀的梗死灶。腸系膜淋巴結(jié)和盲腸扁桃體也會(huì)出現(xiàn)類似的病理變化。小腸和大腸產(chǎn)生纖維性滲出物，黏膜及黏膜下層壞死，表現(xiàn)出特殊的紐扣狀潰瘍。特別是在急性病例中豬體內(nèi)的淋巴細(xì)胞和血液中的粒細(xì)胞迅速減少，產(chǎn)生強(qiáng)烈的免疫抑制作用。除此之外，在病初病豬內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)各種促炎癥因子，促凝血因子產(chǎn)生強(qiáng)烈的應(yīng)答。凝血系統(tǒng)被激活，產(chǎn)生彌散性血管內(nèi)凝血。隨著凝血系統(tǒng)失代償和內(nèi)皮細(xì)胞中Cx43表達(dá)量被病毒粒子激活的MAPK下調(diào)，細(xì)胞間的縫隙鏈接被抑制，從而導(dǎo)致血管通透性的改變。引起豬的全身性出血灶。

3 豬瘟的臨床表現(xiàn)與分類

豬瘟根據(jù)感染后病程的長(zhǎng)短，可以分為急性型，亞急性型，慢性型和持續(xù)感染型。在實(shí)驗(yàn)條件按下，豬瘟的潛伏期在4～7 d。豬瘟的進(jìn)程不僅受到豬的品種、年齡、性別和自身抵抗力的強(qiáng)弱還受到病毒的毒力和數(shù)量的影響。

3.1 急性型與亞急性型

中等毒力的豬瘟病毒感染仔豬往往會(huì)呈現(xiàn)急性型的臨床表現(xiàn)，由豬瘟強(qiáng)毒引起的典型豬瘟現(xiàn)已不常見(jiàn)(如用于測(cè)試豬瘟疫苗保護(hù)力的“Margarita” 與“Koslov”毒株)。仔豬在感染豬瘟病毒的前2周是處于潛伏期與前驅(qū)期這2個(gè)階段。感染豬瘟的仔豬會(huì)逐漸表現(xiàn)出一般的臨床癥狀，如體溫升高、精神沉郁、食欲不振、結(jié)膜炎等。在感染2～4周時(shí)，仔豬進(jìn)入感染的明顯期，這時(shí)體溫升高至41℃以上，嗜睡扎堆。血液中白細(xì)胞迅速減少，甚至低于3 000 mL。同時(shí)仔豬會(huì)出現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀，共濟(jì)失調(diào)，麻痹或者抽搐。在肢體末梢如耳朵、四肢內(nèi)側(cè)和腹部皮膚會(huì)出現(xiàn)小米粒的紫色出血點(diǎn)或者形成稍大的暗紅色出血斑。教科書上把急性病例的臨床表現(xiàn)稱之為豬瘟的典型臨床癥狀。死亡通常出現(xiàn)在2～4周之后。死亡率可達(dá)100%。豬瘟病毒對(duì)于免疫系統(tǒng)有特殊的噬性，并且具有典型的免疫抑制特性。繼發(fā)于豬瘟的肺部感染很可能會(huì)掩蓋豬瘟的臨床癥狀，而導(dǎo)致誤診。如同樣具有嚴(yán)重神經(jīng)癥狀的豬繁殖與呼吸綜合征(PRRSV)和豬圓環(huán)病毒病(PCVAD)。亞急性病例的又稱溫和型豬瘟，由中低毒力的豬瘟毒株引起，大多數(shù)成年豬可以耐過(guò)，死亡的多為仔豬。豬瘟的典型癥狀有所表現(xiàn)但是程度較輕，在明顯期會(huì)出現(xiàn)輕微的神經(jīng)癥狀，皮膚表面有出血點(diǎn)，但有正常的食欲，體溫緩慢升高，在40℃～41℃也有少數(shù)抵抗力較強(qiáng)的豬只表現(xiàn)出腹瀉或者結(jié)膜炎等癥狀，皮膚不會(huì)出現(xiàn)出血點(diǎn)。

3.2 慢性型與持續(xù)感染型

慢性型豬瘟通常是由于弱毒株感染引起的，弱毒株并不會(huì)引起劇烈的免疫反應(yīng)。多數(shù)病例只表現(xiàn)出慢性消耗性的特點(diǎn)，食欲減退，精神沉郁，弛張熱，發(fā)病率低。但學(xué)者們一致認(rèn)為雖然表現(xiàn)出慢性型豬瘟感染的豬可以存活數(shù)月以上并且體內(nèi)可以檢測(cè)到豬瘟病毒抗體，但其并不足以中和體內(nèi)的豬瘟病毒，最終慢性型豬瘟都會(huì)以死亡告終。慢性型豬瘟感染的病豬可以持續(xù)不斷的向外界排放病毒，會(huì)波及到其他健康豬群，可能造成豬瘟的地方性流行。懷孕母豬感染豬瘟病毒時(shí)，病毒可以通過(guò)血胎屏障造成胎兒的持續(xù)性感染。根據(jù)感染時(shí)胎齡的不同，妊娠早期豬瘟病毒可造成胎兒的吸收，妊娠中后期可以導(dǎo)致胎兒的木乃伊化，流產(chǎn)或者死胎。如果胎兒在50～70 d時(shí)感染豬瘟病毒，胎兒的免疫系統(tǒng)對(duì)豬瘟病毒產(chǎn)生免疫耐受導(dǎo)致其在被娩出之后造成豬瘟病毒的持續(xù)性感染。

4 結(jié)語(yǔ)

我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)歷史悠久，養(yǎng)豬在我國(guó)畜牧產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中占有特殊的地位，生豬存欄總數(shù)和豬肉的消費(fèi)量占世界首位。動(dòng)物疫病對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的危害毫無(wú)疑問(wèn)處于首要位置。自從2018非洲豬瘟爆發(fā)以來(lái)，我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)格局重塑，存欄量急劇下降，豬肉價(jià)格走勢(shì)一路升高。再一次將生物安全，疫病防控重新拉回人們的視線。注重飼養(yǎng)管理，提高從業(yè)人員的生物安全意識(shí)與基本技能，是面對(duì)一切未知挑戰(zhàn)的“殺手锏”與“安全傘”。未來(lái)我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)勢(shì)必會(huì)向著集約化、機(jī)械化、自動(dòng)化、智能化的方向前進(jìn)，這對(duì)動(dòng)物疫病的監(jiān)控與凈化提出了越來(lái)越苛刻的要求。只有各行各業(yè)的專家人才投入進(jìn)來(lái)，促進(jìn)學(xué)科交叉融合。從政策制定到監(jiān)督執(zhí)行再到反饋調(diào)整形成完整閉環(huán)，動(dòng)物疫病的控制與凈化才有真正落實(shí)的可能。