藻—溞系統(tǒng)對(duì)凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖水體調(diào)控效果的研究

劉 梅，原居林，倪 蒙，練青平，郭愛環(huán)，顧志敏

(浙江省淡水水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部淡水漁業(yè)健康養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江省淡水水產(chǎn)遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 湖州 313001)

在凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)養(yǎng)殖過程中，作為養(yǎng)殖水體的初級(jí)生產(chǎn)者，有益藻相的穩(wěn)定不僅與水質(zhì)的好壞息息相關(guān)，還能有效提高養(yǎng)殖對(duì)蝦的免疫抗病能力，作為生物餌料，其對(duì)于維持養(yǎng)殖的健康持續(xù)發(fā)展至關(guān)重要[1-3]。劉梅等[4]發(fā)現(xiàn)，蛋白核小球藻(Chlorellapyrenoidosa)和隱藻(Cryptomonasobovata)對(duì)凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖尾水中的亞硝態(tài)氮具有較好的去除效果，且隱藻去除效果較持久；銅綠微囊藻(Microcystisaeruginosa)和衣藻(Chlamydomonassp.)具有較好的硝態(tài)氮去除效果；衣藻對(duì)氨氮具有較快且持久的去除率，去除率可達(dá)100%。劉盼等[5]發(fā)現(xiàn)，蛋白核小球藻在高質(zhì)量濃度的硝態(tài)氮和氨氮中擴(kuò)繁速度更快，而斜生柵藻(Scenedesmusobliquus)在低質(zhì)量濃度的硝態(tài)氮和氨氮中更易繁殖。因此，近些年，通過接種有益藻種，培養(yǎng)優(yōu)勢(shì)種是目前對(duì)蝦養(yǎng)殖過程中常用的水環(huán)境調(diào)控措施之一[6-7]。

生產(chǎn)中養(yǎng)殖水體常處于富營(yíng)養(yǎng)化狀態(tài)，接種有益藻種，其成為優(yōu)勢(shì)種后，極易過度繁殖，影響水體透明度，易發(fā)生“倒藻”，水環(huán)境穩(wěn)定性差，引起蝦類應(yīng)激反應(yīng)等[8-9]。因此，如何有效地控制對(duì)蝦高密度養(yǎng)殖過程中的良好水質(zhì)，并保持有益藻相穩(wěn)定，是目前對(duì)蝦養(yǎng)殖面臨的主要挑戰(zhàn)之一。在池塘生態(tài)系統(tǒng)中，浮游植物的生長(zhǎng)不僅受到光照、水溫、營(yíng)養(yǎng)鹽等環(huán)境因子的影響，而且宜受到生物因素的控制[10-11]。因此，通過生物操縱即利用浮游動(dòng)物牧食浮游植物來控制其密度，而養(yǎng)殖對(duì)象進(jìn)一步攝食浮游動(dòng)物，從而維持藻相長(zhǎng)久穩(wěn)定具有一定可行性，相關(guān)研究已有報(bào)道[12-14]。大型溞(Daphniamagna)是養(yǎng)殖池塘最常見的大型浮游動(dòng)物之一，其生長(zhǎng)繁殖力強(qiáng)，優(yōu)勢(shì)種時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)浮游植物具有較高的牧食壓力，可以改善水質(zhì),被認(rèn)為是進(jìn)行生物操縱的關(guān)鍵種[15-16]。但迄今為止，仍缺乏關(guān)于藻—溞組合系統(tǒng)對(duì)凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖水體凈化效果及相互生長(zhǎng)影響的系統(tǒng)研究。

鑒于此，筆者選取前期篩選的蛋白核小球藻、衣藻和隱藻作為試驗(yàn)微藻，選取大型溞作為浮游動(dòng)物，設(shè)計(jì)和研究不同藻—溞微生態(tài)系統(tǒng)對(duì)凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖水體的凈化作用及這些藻類和大型溞的生長(zhǎng)特征，以期建立一套穩(wěn)定凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖池塘中有益藻相的調(diào)控技術(shù)，為凡納濱對(duì)蝦的健康養(yǎng)殖提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)藻種：3株藻種分別為綠藻門中的蛋白核小球藻(FACHB-5)、衣藻(FACHB-715)和隱藻門中的隱藻(FACHB-1301)，均購(gòu)于中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所藻種庫(kù)(武漢)。試驗(yàn)前，將保存的藻種轉(zhuǎn)移到250 mL三角燒瓶(內(nèi)有100 mL液體培養(yǎng)基)中，進(jìn)行擴(kuò)大和馴化培養(yǎng)：用藍(lán)綠(BG-11)培養(yǎng)液培養(yǎng)蛋白核小球藻，亞硒酸(SE)培養(yǎng)液培養(yǎng)衣藻，AF-6培養(yǎng)液培養(yǎng)隱藻。每3 d轉(zhuǎn)接1次，共轉(zhuǎn)接2～3次，當(dāng)達(dá)到同步生長(zhǎng)時(shí)，即可作為試驗(yàn)藻種液，鏡檢初始密度約1.0×108個(gè)/mL。

試驗(yàn)大型溞：取自凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖塘，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行純化培養(yǎng)，試驗(yàn)前在20 ℃、光照度3000 lx和光暗比14L∶10D下馴化。試驗(yàn)中使用同一母體繁殖3代以上2 d左右的成熟大型溞。

試驗(yàn)水樣：取自寧波慈溪灘涂養(yǎng)殖場(chǎng)，為養(yǎng)殖第92天時(shí)的養(yǎng)殖水體，鹽度為5，經(jīng)高壓滅菌后用于本試驗(yàn)，其水質(zhì)指標(biāo)見表1。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)組共設(shè)10組，分別為蛋白核小球藻組(C1)、蛋白核小球藻+大型溞組(C2)、衣藻組(C3)、衣藻+大型溞組(C4)、隱藻組(C5)、隱藻+大型溞組(C6)、蛋白核小球藻+衣藻組(C7)、蛋白核小球藻+衣藻+大型溞組(C8)、衣藻+隱藻組(C9)、衣藻+隱藻+大型溞組(C10)，每個(gè)處理組設(shè)3個(gè)平行。取5000 mL滅菌后的對(duì)蝦養(yǎng)殖尾水于5000 mL的經(jīng)過高壓滅菌的燒杯中，燒杯瓶口覆蓋保鮮膜以防止水分流失，同時(shí)保鮮膜中間開一約1 cm的小口，以保持水面與大氣相通。為了達(dá)到一致的每種藻類初始密度5×105個(gè)/mL，分別接種初始密度為1×108個(gè)/mL各藻種原始藻液25 mL于養(yǎng)殖尾水中，大型溞投放密度為1個(gè)/L，即含有大型溞的處理組投放5個(gè)。

1.3 培養(yǎng)條件及水質(zhì)測(cè)定

燒杯置于溫度25 ℃、光照度3000 lx和光暗比14L∶10D的光照培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)期間，光照條件下每隔3 h人工搖動(dòng)一次。每間隔3 d的10:00測(cè)定溶液的pH、溶解氧，所有樣品測(cè)定完畢，取50 mL水樣檢測(cè)總氮、氨氮、硝態(tài)氮、亞硝態(tài)氮、總磷、葉綠素a等水質(zhì)指標(biāo)。pH和溶解氧水平采用哈希HQ40D便攜式溶解氧/pH測(cè)定儀測(cè)定；硝態(tài)氮含量采用酚二磺酸分光光度法測(cè)定，氨氮含量測(cè)定采用納氏試劑分光光度法測(cè)定，亞硝態(tài)氮含量采用N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法測(cè)定，所用紫外分光光度計(jì)為UV-2802型。

氮、磷的去除率(R,%)按下式計(jì)算：

R=(ρ0-ρt)/ρ0×100%

式中，ρ0和ρt分別為初始氮磷質(zhì)量濃度(mg/L)和培養(yǎng)td后的質(zhì)量濃度(mg/L)。

1.4 微藻和大型溞生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)

藻密度通過取一定量的藻種在顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，并按一定的稀釋倍數(shù)逐級(jí)進(jìn)行稀釋，得到相應(yīng)藻細(xì)胞密度，再將所得到的系列藻液用UV-2802分光光度計(jì)測(cè)定680 nm波長(zhǎng)下藻類光密度值，得到藻密度—光密度值標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，藻細(xì)胞密度與藻光密度值具有很好的線性關(guān)系，r2均達(dá)到0.91以上，可較為準(zhǔn)確測(cè)定藻密度，測(cè)定藻密度后并計(jì)算相對(duì)生長(zhǎng)率(K)。大型溞采用肉眼計(jì)數(shù)法測(cè)定。

K=(lnNt-lnN0)/t×100%

式中，N0為培養(yǎng)初始藻細(xì)胞密度(個(gè)/mL)，Nt為經(jīng)過t時(shí)間后培養(yǎng)液中的藻細(xì)胞密度(個(gè)/mL)，t為培養(yǎng)時(shí)間(d)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

根據(jù)觀察結(jié)果編制生命表，凈生殖率(R0)、平均世代周期(T，d)、內(nèi)稟增長(zhǎng)率(rm)按下式計(jì)算：

∑T=∑xlxRx/∑lxRx

R0=∑lxRx

rm=lnR0/T

式中，x為日齡(d)；lx為x齡的存活率(%)；Rx為x齡的生殖率(%)。

結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行方差分析，其中P<0.05表示差異顯著，采用Microsoft Excel 2010和Origin 9.0繪圖。其中差異顯著性與否用小寫字母標(biāo)注，字母相同表示差異不顯著(P>0.05)，字母不同則表示差異顯著(P<0.05)。

2 結(jié) 果

2.1 不同組合系統(tǒng)微藻和大型溞的生長(zhǎng)特征

不同組合系統(tǒng)中3種微藻的生長(zhǎng)見圖1。在20 d的培養(yǎng)期中，相對(duì)平均生長(zhǎng)速率由高至低依次為：蛋白核小球藻>衣藻>隱藻。在培養(yǎng)的第8天時(shí)，除蛋白核小球藻+大型溞組合外，其他各組合系統(tǒng)的相對(duì)生長(zhǎng)速率達(dá)到最高，顯著大于其后各時(shí)間段(P<0.05)，在第8天后，各處理組平均生長(zhǎng)速率迅速下降，至培養(yǎng)結(jié)束時(shí)均小于10%。另外，加入大型溞組合的各微藻其相對(duì)生長(zhǎng)速率在前8 d均大于未加入大型溞的組合，而第8天后則基本小于未加入大型溞的組合。而加入兩種微藻的組合的相對(duì)生長(zhǎng)速率基本上小于單一藻的處理組。

圖1 不同處理組微藻在凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖水中的生長(zhǎng)性能Fig.1 Growth performance of different microalgae in water of Pacific white shrimp L.vannamei cultureC1.蛋白核小球藻；C2.蛋白核小球藻+大型溞；C3.衣藻；C4.衣藻+大型溞；C5.隱藻；C6.隱藻+大型溞；C7.蛋白核小球藻+衣藻；C8.蛋白核小球藻+衣藻+大型溞；C9.衣藻+隱藻；C10.衣藻+隱藻+大型溞；下同.C1.C.pyrenoidosa；C2.C.pyrenoidosa+D.magna；C3.Chlamydomonas sp.；C4.Chlamydomonas sp.+D.magna；C5.C.obovata；C6.C.obovata+D.magna；C7.C.pyrenoidosa+Chlamydomonas sp.；C8.C.pyrenoidosa + Chlamydomonas sp.+D.magna；C9.Chlamydomonas sp.+C.obovata；C10.Chlamydomonas sp.+ C.obovata+D.magna；et sequentia.

大型溞的生長(zhǎng)特征見表2。各組大型溞的相對(duì)生長(zhǎng)速率為蛋白核小球藻+大型溞>衣藻+大型溞>蛋白核小球藻+衣藻+大型溞>隱藻+衣藻+大型溞>隱藻+大型溞，平均世代周期依次為蛋白核小球藻+大型溞<蛋白核小球藻+衣藻+大型溞<衣藻+大型溞<隱藻+衣藻+大型溞<隱藻+大型溞，而內(nèi)稟增長(zhǎng)率則是小球藻+大型溞組合最大，達(dá)到0.152，其次為衣藻+大型溞，其值為0.144，最低值是隱藻+大型溞，僅為0.102。

表2 不同組合系統(tǒng)下大型溞的生活史特征參數(shù)Tab.2 Characteristic parameters of life cycle of water fleas D.magna in different combined systems

2.2 不同組合系統(tǒng)大型溞和微藻的攝食關(guān)系

試驗(yàn)前8 d，蛋白核小球藻、隱藻和衣藻細(xì)胞密度均低于各自添加了大型溞的處理組的細(xì)胞密度(圖2)，主要是前期大型溞繁殖數(shù)目較少，均小于28個(gè)(表3)，對(duì)藻類的攝食能力有限，同時(shí)由于大型溞在試驗(yàn)水體中不斷地游動(dòng)或產(chǎn)生一些化合物，一定程度上減輕了藻類的沉積，促進(jìn)了藻類的繁殖，而在第8天后藻類的快速增殖，導(dǎo)致細(xì)胞密度顯著增加(P<0.05)，以及藻—溞處理組由于大型溞的快速繁殖，增強(qiáng)了其攝食能力，導(dǎo)致藻細(xì)胞密度低于藻處理組。另外，同相對(duì)生長(zhǎng)速率變化規(guī)律一致，單一藻處理組的細(xì)胞密度均高于混合藻處理組，說明在同一水體中不同藻之間存在競(jìng)爭(zhēng)效應(yīng)。

表3 藻—溞組合系統(tǒng)中大型溞個(gè)數(shù)統(tǒng)計(jì)Tab.3 The number of water fleas D.magna in the microalga-daphnia system

圖2 各處理組中藻細(xì)胞密度變化特征Fig.2 The changes in microalga cell density in each treatment group

各處理組中，大型溞的數(shù)量存在一定差異，其中加入蛋白核小球藻組的大型溞數(shù)量最高，至試驗(yàn)結(jié)束時(shí)達(dá)到88個(gè)，其次是衣藻，至試驗(yàn)結(jié)束時(shí)達(dá)到80個(gè)，隱藻最差，至試驗(yàn)結(jié)束時(shí)僅有59個(gè)，說明大型溞更喜攝食小球藻，其次是衣藻。尤其是單一藻液培養(yǎng)的大型溞數(shù)量大于混合藻液，主要是由于混合藻液中小球藻和衣藻的細(xì)胞密度低于單一藻液，一定程度上影響了大型溞的繁殖。

2.3 不同組合系統(tǒng)養(yǎng)殖水體pH和溶解氧水平的變化情況

圖3 不同微藻在凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖水體中pH和溶解氧水平的變化情況Fig.3 The changes in pH and DO levels for different microalgae strains in water of Pacific white shrimp L.vannamei culture

試驗(yàn)期間，各組溶解氧水平顯著增加，均達(dá)到過飽和狀態(tài)，主要是由于藻類的快速繁殖，在光合作用下釋放氧氣，增加了養(yǎng)殖水體中溶解氧質(zhì)量濃度，改善水環(huán)境。小球藻、小球藻+衣藻組增加最為明顯，由初始6.01 mg/L分別快速增至24.12 mg/L和23.25 mg/L；其次為小球藻+大型溞組和小球藻+衣藻+大型溞組分別增至21.12 mg/L和20.54 mg/L；而隱藻和隱藻+大型溞組增加最為緩慢，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)分別增至14.81 mg/L和14.63 mg/L，主要是隱藻增殖率最慢，藻細(xì)胞密度較低，光合作用相對(duì)較低。

2.4 不同組合系統(tǒng)養(yǎng)殖水體硝態(tài)氮、氨氮和亞硝氮含量的變化情況

各組對(duì)凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖水體中硝態(tài)氮、氨氮和亞硝態(tài)氮的去除效果見圖4。

圖4 不同處理組對(duì)養(yǎng)殖尾水硝態(tài)氮(a)、亞硝態(tài)氮(b)及氨氮(c)去除效果分析Fig.4 The removal rates of nitrate (a),nitrite(b) and ammonia(c) nitrogens in microalga-daphnia systems

各組亞硝態(tài)氮的去除效果不同，培養(yǎng)的第8天，硝態(tài)氮的去除效果僅達(dá)10%，至培養(yǎng)的第12天，去除率約達(dá)20%，培養(yǎng)第16天時(shí)則顯著增加，至試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，除隱藻和隱藻+大型溞組對(duì)硝態(tài)氮的平均去除率分別為44%和50%外，其他處理組均達(dá)到60%以上，其中混合藻對(duì)硝態(tài)氮的凈化效果較好，小球藻+衣藻+大型溞、小球藻+衣藻、衣藻+隱藻+大型溞和衣藻+隱藻組分別為82%、74%、71%和67%；值得注意的是，加入大型溞的處理組比未加入的處理效果要好，說明藻—溞組合系統(tǒng)具有較好的硝態(tài)氮去除效果，尤其是小球藻+衣藻+大型溞組。

混合藻液對(duì)亞硝態(tài)氮去除效果優(yōu)于單一藻處理組，而加入大型溞的去除率要低于未加入的對(duì)照組，但差異不顯著，與硝態(tài)氮去除效果相反。培養(yǎng)前16 d，各處理組對(duì)亞硝態(tài)氮的去除率增加較為緩慢，而至試驗(yàn)結(jié)束時(shí)均顯著增加(P<0.05)，其中小球藻+衣藻+大型溞組、小球藻+衣藻組吸收凈化效果最好，分別達(dá)到77%和73%，其次則為含有隱藻的處理組，順序依次為隱藻+衣藻、隱藻+衣藻+大型溞、隱藻和隱藻+大型溞組，去除率分別為72%、71%、69%和67%；而小球藻+大型溞組和衣藻+大型溞組凈化效果較差，分別為56%和53%。結(jié)果說明隱藻具有相對(duì)較好的亞硝態(tài)氮去除效果。

各處理組對(duì)氨氮的吸收效果差距較大，在培養(yǎng)的第8天，所有處理組的凈化效果均不理想，其中小球藻+衣藻處理效果最好，為51%；至第12天，含有小球藻的組合系統(tǒng)幾乎完全吸收氨氮，去除率顯著增加(P<0.05)，超過97%，其中小球藻+衣藻+大型溞組去除率為99%，其后基本保持不變，而含有衣藻的組合(衣藻、衣藻+大型溞、衣藻+隱藻和衣藻+隱藻+大型溞)去除率為63%～77%，至第16天時(shí)，則去除率快速增至89%以上，而隱藻和隱藻+大型溞組的去除效果最差，至試驗(yàn)結(jié)束時(shí)僅達(dá)到67%和62%，顯著低于其他處理組(P<0.05)。說明加入適量大型溞并未顯著影響藻類對(duì)養(yǎng)殖水體氨氮的凈化。

3 討 論

3.1 不同組合系統(tǒng)對(duì)微藻生長(zhǎng)性能的影響

同一養(yǎng)殖環(huán)境下，不同微藻生長(zhǎng)特征存在較大差異，主要是由于不同微藻所需的最佳生長(zhǎng)溫度、光照、營(yíng)養(yǎng)鹽等環(huán)境因素不同引起的[11,17-18]，如硅藻適宜較低水溫(14～18 ℃)和氮磷比10∶1，綠藻則適宜相對(duì)較高溫度(20～25 ℃)和氮磷比16∶1[19]。本試驗(yàn)中，培養(yǎng)溫度為25 ℃和氮磷比為18∶1，較適宜綠藻的生長(zhǎng)繁殖，因此，蛋白核小球藻和衣藻具有相對(duì)較高的生長(zhǎng)速率。不同微藻共培養(yǎng)時(shí)，兩者的藻細(xì)胞密度均低于單一藻處理組，但總細(xì)胞密度要高于單一藻，主要是由于在有限的資源條件下，兩種微藻對(duì)營(yíng)養(yǎng)鹽及空間等存在競(jìng)爭(zhēng)作用，這已被眾多研究者證實(shí)[20]。而藻—溞共培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)初期大型溞密度較低，低密度的藻類增殖較快，而試驗(yàn)后期由于大型溞攝食作用，高密度的藻類存在較高的牧食壓力，有效避免了“倒藻”的發(fā)生。主要是由于試驗(yàn)初期大型溞的擾動(dòng)作用一定程度上促進(jìn)了藻類的繁殖，提高了氮的去除率，而當(dāng)藻類大量繁殖時(shí)，大型溞這種促進(jìn)作用逐漸減弱。這與楊洋等[21]發(fā)現(xiàn)的大型溞加入密度較小的藻液中，浮游植物的密度沒有下降反而上升結(jié)果一致；張曼等[22]學(xué)者亦提出隨著藻密度增加，大型溞繁殖率加快，其抑藻凈水的效果在后期更顯著。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，在對(duì)蝦養(yǎng)殖水體中接種濃縮蛋白核小球藻的同時(shí)，應(yīng)及時(shí)接種大型溞，以預(yù)防小球藻的過度繁殖，維持養(yǎng)殖水體水環(huán)境的穩(wěn)定性，提高對(duì)蝦產(chǎn)量。

3.2 不同組合系統(tǒng)對(duì)大型溞生長(zhǎng)特征的影響

藻—溞之間的影響是相互的，同樣大型溞對(duì)藻類的攝食具有選擇性，不同藻類因其適口性、形狀、藻粒徑大小和營(yíng)養(yǎng)成分等因素均可顯著影響大型溞的生長(zhǎng)繁殖[23]。蛋白核小球藻是單胞藻，呈球形或近球形，其粒徑為3～8 μm，細(xì)胞壁較薄且具有高蛋白特點(diǎn)，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高，非常適合大型溞的濾食，是大型溞的優(yōu)良適口餌料；衣藻是單胞藻，其粒徑約5～16 μm，細(xì)胞壁較厚，其蛋白含量低于小球藻；而隱藻粒徑一般大于20 μm，不利于大型溞的攝食，這與本試驗(yàn)結(jié)果蛋白核小球藻+大型溞組具有最高生長(zhǎng)速率，其次是衣藻+大型溞及隱藻+大型溞組生長(zhǎng)最差的結(jié)果較一致。鑒于此，可定期接種蛋白核小球藻以促進(jìn)大型溞的生長(zhǎng)繁殖，提高池塘生態(tài)系統(tǒng)的生物多樣性，保持養(yǎng)殖環(huán)境的長(zhǎng)久穩(wěn)定，同時(shí)為凡納濱對(duì)蝦提供天然生物餌料，增強(qiáng)免疫力，減少病害的發(fā)生。

另外，本試驗(yàn)中蛋白核小球藻+衣藻+大型溞處理組中大型溞并未比衣藻+大型溞、蛋白核小球藻+大型溞處理組的生長(zhǎng)繁殖快，說明單一藻比混合藻更適合大型溞的生長(zhǎng)繁殖。這可能是由于混合藻液中藻細(xì)胞密度過大，細(xì)胞出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，一定程度上影響了大型溞的運(yùn)動(dòng)及濾食能力。史文等[13]也發(fā)現(xiàn)，梅尼小環(huán)藻(Cyclotellameneghinana)和斜生柵藻在密度較高時(shí)均會(huì)出現(xiàn)團(tuán)聚現(xiàn)象，顯著影響大型溞的生長(zhǎng)繁殖。

3.3 不同組合系統(tǒng)對(duì)養(yǎng)殖水體水環(huán)境的影響

單一藻液凈化效果比較中，小球藻對(duì)養(yǎng)殖水體可溶性氮的吸收效果最好，其次是衣藻，隱藻最差，這與其相對(duì)生長(zhǎng)速率相一致，即藻類繁殖越快，吸收利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)就越多；也說明該凡納濱對(duì)蝦養(yǎng)殖水體比較適合綠藻的生長(zhǎng)繁殖，這與許多研究結(jié)果較一致[7,24]。加入大型溞的處理組比未加入的處理組具有較好的硝態(tài)氮去除效果，尤其是小球藻+衣藻+大型溞組，主要是由于試驗(yàn)初期大型溞的擾動(dòng)促進(jìn)了藻類的繁殖，提高了對(duì)硝態(tài)氮的利用率，隨著大型溞繁殖數(shù)量的增多，對(duì)藻類攝食壓力增加，有效控制藻類過度繁殖而衰亡，避免營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)重新釋放到水體中。

不同藻類對(duì)養(yǎng)殖水體不同形態(tài)氮的利用不同。培養(yǎng)前4 d，所有組合系統(tǒng)優(yōu)先吸收利用氨氮，至12 d后氨氮幾乎被完全吸收，然后才開始大量吸收硝態(tài)氮，最后才開始利用亞硝態(tài)氮，這與前期試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)優(yōu)先利用硝態(tài)氮結(jié)果不一致[4]，這可能主要是由于本次養(yǎng)殖水體中氨氮初始質(zhì)量濃度(1.5 mg/L)在藻類吸收利用的理想范圍內(nèi)，藻類可以直接以氨氮作為合成氨基酸的底物，而硝態(tài)氮和亞硝態(tài)氮?jiǎng)t要通過一系列酶先還原成亞硝態(tài)氮再還原成氨氮方能被利用。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，隱藻去除亞硝態(tài)氮的效果較好，對(duì)氨氮和硝態(tài)氮的去除效果較差，而小球藻和衣藻對(duì)3種形態(tài)的氮均具有較好的去除效果，這與眾多研究結(jié)果一致。如陳春云等[25]發(fā)現(xiàn)，蛋白核小球藻對(duì)養(yǎng)殖尾水的氨氮去除率達(dá)80%以上。尤其是小球藻+衣藻處理組，盡管由于競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制各自藻細(xì)胞密度低于單一藻液，但總藻細(xì)胞密度仍高于單一藻液，因此能夠吸收利用更多的氮，主要是由于藻類利用光合作用不斷吸收水體中的各種形態(tài)的氮，滿足自身生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)需求[5]。

4 結(jié) 論

(1)藻—溞組合系統(tǒng)具有較好的水質(zhì)凈化調(diào)控效果，且各微藻及大型溞均可正常生長(zhǎng)，其中蛋白核小球藻最有利于大型溞的生長(zhǎng)繁殖，至培養(yǎng)后期，大型溞的牧食壓力能夠阻止藻密度過密，從而能夠長(zhǎng)久維持有益藻相的穩(wěn)定。

(2)在本試驗(yàn)研究條件下，接種蛋白核小球藻、衣藻以及大型溞最適于養(yǎng)殖水環(huán)境調(diào)控，維持藻相穩(wěn)定。