痤瘡患者外周血MUC1的表達(dá)及其與外周血炎癥因子的相關(guān)性分析

樊莎莎 陶小華 丁楊 方慧倩

[摘要] 目的 初步探討?zhàn)畀徎颊咄庵苎鄳B(tài)上皮黏液素（MUC1）的表達(dá)情況及其與外周血炎癥因子的相關(guān)性。 方法 選擇2018年1月1日至6月30日在浙江省人民醫(yī)院皮膚科門診就診的70例痤瘡患者作為研究對象，并根據(jù)病情分為輕-中度組和重度組，選擇同期在浙江省人民醫(yī)院健康促進中心進行體檢的35例健康志愿者為對照組。比較三組間外周血MUC1水平、外周血IL-4、IL-8、IL-18、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和γ干擾素（IFN-γ）水平，并進一步分析其相關(guān)性。 結(jié)果 重度痤瘡患者外周血MUC1水平明顯高于對照組和輕-中度組;重度組外周血IL-4、IL-8、IL-18、TNF-α和IFN-γ水平明顯高于其他兩組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P<0.05）。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，外周血MUC1與外周血IL-4、IL-8、IL-18、TNF-α和IFN-γ均呈明顯正相關(guān)（r=0.762、0.675、0.599、0.628和0.610，均P<0.05）。 結(jié)論 痤瘡患者外周血MUC1的表達(dá)明顯增多，并且與外周血炎癥因子有明顯相關(guān)性，提示MUC1與炎癥因子表達(dá)存在一定的相關(guān)性。

[關(guān)鍵詞] 痤瘡;多態(tài)上皮黏液素;炎癥因子;相關(guān)性

[中圖分類號] R75? ? ? ? ? [文獻標(biāo)識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2021）03-0092-05

Expression of MUC1 in peripheral blood of patients with acne and analysis on its correlation with inflammatory factors in peripheral blood

FAN Shasha1? ?TAO Xiaohua1? ?DING Yang1? ?FANG Huiqian2

1.Department of Dermatology， Zhejiang Provincial People′s Hospital， People′s Hospital of Hangzhou Medical College， Hangzhou? ?310004， China; 2.Department of Dermatology， Chun′an Branch， Zhejiang Provincial People′s Hospital， Chun′an? ?311700， China

[Abstract] Objective To preliminarily investigate the expression of polymorphic mucin（MUC1） in peripheral blood of patients with acne and its correlation with inflammatory factors in peripheral blood. Methods From January 1 to June 30， 2018， a total of 70 patients with acne who were treated in the outpatient clinic of the Department of Dermatology in Zhejiang People′s Hospital were selected as the study subjects. They were divided into mild-moderate group and severe group according to the disease condition. A total of 35 healthy volunteers who underwent a physical examination at the Health Promotion Center of Zhejiang People′s Hospital during the same period were selected as the control group. The levels of peripheral blood MUC1， IL-4， IL-8， IL-18， tumor necrosis factor-α（TNF-α） and interferon-γ （IFN-γ） levels were compared between the two groups， and the correlation was further analyzed. Results The level of MUC1 in the peripheral blood of patients with severe acne was significantly higher than that in the control group and the mild-moderate group; the levels of IL-4， IL-8， IL-18， TNF-α and IFN-γ in the peripheral blood in the severe group were significantly higher than those in the other two groups， and the differences were statistically significant（both P<0.05）. Correlation analysis showed that peripheral blood MUC1 was significantly positively correlated with peripheral blood IL-4， IL-8， IL-18， TNF-α and IFN-γ（r=0.762， 0.675， 0.599， 0.628 and 0.610 respectively， all P<0.05）. Conclusion The expression of MUC1 in the peripheral blood of patients with acne is significantly increased， and it has a significant correlation with peripheral blood inflammatory factors， suggesting that there is a certain correlation between MUC1 and the expression of inflammatory factors.

[Key words] Acne; Polymorphic mucin（MUC1）; Inflammatory factors; Correlation

痤瘡是一種累及毛囊皮脂腺的慢性炎癥皮膚病，具有發(fā)病率高、病程長、易反復(fù)的特點，好發(fā)于20～30歲的群體[1]。大量研究已經(jīng)證實，痤瘡的發(fā)生發(fā)展是一個涉及諸多內(nèi)源性和外源性因素的復(fù)雜過程，包括雄激素和皮脂分泌異常、痤瘡丙酸桿菌感染、毛囊皮脂腺過度角化及免疫、遺傳和激素失調(diào)等[2]。其中痤瘡丙酸桿菌感染發(fā)揮了重要作用，它通過分泌許多炎癥介質(zhì)誘導(dǎo)局部炎癥反應(yīng)和機體對其的免疫反應(yīng)[3]。近年來，針對痤瘡的研究逐漸由皮膚表面和體內(nèi)激素水平向受體、免疫應(yīng)答、基因表達(dá)等分子生物學(xué)方向發(fā)展，從更深層次上揭示痤瘡的發(fā)病機制，從而更好地治療此病。多態(tài)上皮黏液素（MUC1）是一種細(xì)胞表面蛋白[8]，通過調(diào)節(jié)細(xì)胞信號和轉(zhuǎn)錄來啟動主動保護，主要通過干擾NF-κB信號途徑在病原體上皮細(xì)胞被攻擊時表現(xiàn)出強大的抗炎特性[4]。筆者前期研究發(fā)現(xiàn)痤瘡組織樣本與正常組織MUC1蛋白表達(dá)相比較呈現(xiàn)增強趨勢，提示MUC1在痤瘡中具有差異性表達(dá)。本研究旨在探討?zhàn)畀徎颊咄庵苎狹UC1的表達(dá)差異及其與外周血炎癥免疫因子的相關(guān)性，為臨床上更好地治療痤瘡患者提供參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月1日至6月30日在浙江省人民醫(yī)院皮膚科門診就診的70例痤瘡患者作為研究對象，選擇同期在浙江省人民醫(yī)院健康促進中心進行體檢的35例健康志愿者為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《皮膚性病學(xué)》[5]中關(guān)于痤瘡的診斷，痤瘡的嚴(yán)重程度分類參考Pillsbury[6]分類法：散發(fā)或多發(fā)的黑色粉刺，伴或不伴散分布的炎癥丘疹定義為輕度;輕度+炎癥皮損增多并出現(xiàn)局限于顏面部的膿皰者定義為中度;中度+結(jié)節(jié)、囊腫及瘢痕形成，擴展至軀干部位者定義為重度;②年齡18～50歲;③為初次診斷，未接受過治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他皮膚病者;②就診前6個月內(nèi)服用過激素或維A酸類藥物者;③合并嚴(yán)重的心肝腎功能障礙者;④合并腫瘤性疾病、血液病及免疫系統(tǒng)疾病者;⑤臨床資料不完整者。本研究中所有研究對象均簽署知情同意書，經(jīng)浙江省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)后進行。三組年齡、性別、病程、婚姻狀況、文化程度、吸煙史、飲酒史及睡眠障礙方面比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

1.2 方法

1.2.1 研究方法? 門診就診時所有研究對象均詳細(xì)詢問病史，并記錄一般臨床資料，包括年齡、性別、病程、婚姻狀況、文化程度、吸煙史、飲酒史及有無睡眠障礙。同時留取清晨空腹外周靜脈血及病變組織標(biāo)本。

1.2.2 檢測指標(biāo)? ①血清MUC1水平：抽取清晨空腹外周靜脈血5 mL，并統(tǒng)一放置于-80℃冰柜中保存待檢。采用Centocor公司提供的CanAg-MUC1試劑盒進行檢測，所有檢測步驟均詳細(xì)按照說明書操作，正常參考值為<15 U/mL;②血清炎癥因子水平：抽取清晨空腹外周靜脈血5 mL，并統(tǒng)一放置于-80℃冰柜中保存待檢。采用雙抗體夾心法（ELISA法）檢測外周血白細(xì)胞介素4（Interleukin4，IL-4）、白細(xì)胞介素8（Interleukin8，IL-8）、白細(xì)胞介素18（Interleukin18，IL-18）、腫瘤壞死因子-α（Alpha-tumor necrosis factor，TNF-α）和γ干擾素（Interferon-γ，IFN-γ），試劑盒由武漢博士德公司提供。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 24.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用單因素方差分析;不符合正態(tài)分布的計量資料用中位數(shù)和四分位間距[M（Q25，Q75）]表示，采用Kruskal-Wallis檢驗;分類資料用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，等級資料采用秩和檢驗（Z檢驗），采用Spearman秩相關(guān)分析進行相關(guān)性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組外周血MUC1水平比較

重度痤瘡患者外周血MUC1水平明顯高于對照組和輕-中度組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.2 三組外周血炎癥因子水平比較

重度組外周血IL-4、IL-8、IL-18、TNF-α和IFN-γ水平明顯高于其他兩組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P<0.05）。見表3。

2.3 相關(guān)性分析

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，外周血MUC1與外周血IL-4、IL-8、IL-18、TNF-α和IFN-γ均呈明顯正相關(guān)（r=0.762、0.675、0.599、0.628和0.610，均P<0.05）。見圖1～5。

3 討論

人們對于微生物感染的研究發(fā)現(xiàn)，皮膚微生物群與宿主、環(huán)境之間應(yīng)保持生理、動態(tài)的平衡，這種平衡有益于宿主。面部的微生態(tài)平衡一旦被打破就會導(dǎo)致面部菌群結(jié)構(gòu)和數(shù)量發(fā)生改變，從而導(dǎo)致疾病的發(fā)生。大量研究表明，遺傳因素對痤瘡的發(fā)病有一定的作用，其遺傳度在50%～90%[7]。研究顯示，有痤瘡家族史的人群患痤瘡的風(fēng)險比正常人增高2倍[8]。Ando等[9]對日本痤瘡患者MUC1基因中可變數(shù)目的短串聯(lián)重復(fù)序列進行研究，發(fā)現(xiàn)在嚴(yán)重痤瘡患者中黏性上皮蛋白（Polymorphic epithelial mucin，PEM）等位基因長度在5000 bp以上占59%，認(rèn)為MUC1基因與痤瘡的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，但對于其具體發(fā)生機制尚缺乏深入研究。

MUC1是機體防御黏膜感染的一個重要的元素，大量研究均已證實其在乳腺癌、卵巢癌及子宮內(nèi)膜癌等組織中有過量表達(dá)，其還可以阻止幽門桿菌與胃黏膜上皮的黏附，減少細(xì)菌對宿主的刺激和危害[10]。付開強等[11]采用組織切片的方法觀察炎癥的病理變化，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase chain reaction，PCR）檢測，發(fā)現(xiàn)MUC1在子宮內(nèi)膜炎患者子宮內(nèi)膜組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，提示炎癥發(fā)生與MUC1的高表達(dá)有緊密聯(lián)系。此外，MUC1在細(xì)菌的機會感染中起重要作用，具有MUC1缺陷的小鼠在通常環(huán)境下易感染眼臉炎和結(jié)膜炎，而在無菌環(huán)境下卻可以健康成長[12]。近期研究還發(fā)現(xiàn)，在小鼠氣道炎癥中MUC1可以作為一種天然氣道抗炎蛋白發(fā)揮抗炎作用，在銅綠假單胞菌引起的小鼠肺部感染及合胞體病毒感染肺上皮A549細(xì)胞時，MUC1的表達(dá)量明顯升高，并且MUC1基因敲除小鼠中炎癥程度更為明顯。這些證據(jù)均表明MUC1在慢性炎癥的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用[13]。

痤瘡在本質(zhì)上仍屬于皮膚的一種炎癥性疾病，且具有病程遷延反復(fù)的特點，炎癥反應(yīng)伴隨整個病程的發(fā)生和發(fā)展。本研究結(jié)果顯示，在痤瘡患者外周血MUC1均呈現(xiàn)高水平表達(dá)，且與病情的嚴(yán)重程度呈明顯正相關(guān)。同時痤瘡患者外周血的各種炎癥因子表達(dá)也明顯增多，與外周血MUC1具有明顯的正相關(guān)性，尤其重度痤瘡患者表現(xiàn)尤為明顯，這一點也反映出MUC1參與了痤瘡發(fā)生發(fā)展過程中的炎癥反應(yīng)過程。林新瑜等[14]研究發(fā)現(xiàn)，痤瘡患者血清中IL-6、IL-8和TNF-α水平明顯高于健康人，亞組分析Ⅲ、Ⅳ級痤瘡患者血清TNF-α水平明顯高于Ⅰ、Ⅱ級痤瘡患者，提示在痤瘡的發(fā)生發(fā)展過程中這些細(xì)胞因子均發(fā)揮了不同程度的作用。李佳妍等[15]研究發(fā)現(xiàn)痤瘡患者體內(nèi)存在著免疫系統(tǒng)失衡，表現(xiàn)為輔助性T細(xì)胞（Th）Th1/Th2特征性細(xì)胞因子失衡，引起患者血清IL-4水平明顯增高，關(guān)聯(lián)性分析提示，痤瘡患者病情嚴(yán)重程度與血清IL-4水平呈明顯正相關(guān)，考慮痤瘡患者體內(nèi)體液免疫應(yīng)答反應(yīng)程度與疾病本身的嚴(yán)重程度密切相關(guān)。蔣震等[16]研究發(fā)現(xiàn)痤瘡患者血清IL-8和IL-17水平均明顯高于對照組，且給予紅光治療后痤瘡患者血清IL-8和IL-17水平均明顯下降，且患者皮膚囊腫和膿腫等損害情況也相應(yīng)好轉(zhuǎn)，認(rèn)為白細(xì)胞介素與痤瘡嚴(yán)重程度有關(guān)，且可以判斷痤瘡的治療效果。

諸多研究已經(jīng)證實，IL-4、IL-8、IL-18、TNF-α和IFN-γ主要由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生來啟動固有免疫應(yīng)答反應(yīng)系統(tǒng)，在毛囊壁收到損傷刺激后會產(chǎn)生一系列細(xì)胞因子如IL-1α，其可誘導(dǎo)真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子，產(chǎn)生下游細(xì)胞因子如IL-8、IL-18、TNF-α和IFN-γ等，從而增強皮膚的炎癥反應(yīng)[17]。國內(nèi)林新瑜等[14]早在2003年就發(fā)現(xiàn)痤瘡患者血清中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α含量均明顯升高。Askari等[18]發(fā)現(xiàn)痤瘡丙酸桿菌可誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞分泌IL-18等炎癥因子來對抗痤瘡丙酸桿菌引起的炎癥反應(yīng)。近期的研究證實，痤瘡丙酸桿菌通過Toll樣受體依賴途經(jīng)激活單核細(xì)胞，從而釋放細(xì)胞因子引起炎癥。關(guān)于MUC1參與痤瘡發(fā)生發(fā)展過程中炎癥反應(yīng)的具體機制目前主要集中在痤瘡丙酸桿菌的感染，其通過分泌前炎癥介質(zhì)來誘導(dǎo)局部炎癥反應(yīng)和機體對其的免疫反應(yīng)。已有研究證實，MUC1受TNF-α的調(diào)控，某些物質(zhì)如香煙提取物和脂多糖等可以上調(diào)TNF-α的表達(dá)，脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）激活Toll樣受體進而激活NF-κB，刺激TNF-α表達(dá)增加。在炎癥反應(yīng)中，中性粒細(xì)胞釋放的彈性蛋白酶還可通過PKCδ→Duox I→ROS→TACE→TNF-α的途徑上調(diào)TNF-α的表達(dá)，進而通過TNFR→ERK→Sp1這個信號傳導(dǎo)途徑上調(diào)MUC1的表達(dá)，從而發(fā)揮抗炎作用，促進痤瘡的愈合[19-20]。MUC1與IL-4、IL-8、IL-18、TNF-α和IFN-γ等細(xì)胞因子的具體調(diào)控關(guān)系和機制目前國內(nèi)外相關(guān)研究較少，尚需要更多的基礎(chǔ)實驗來證實。

綜上所述，痤瘡患者外周血MUC1的表達(dá)明顯增多，且與外周血炎癥因子有明顯相關(guān)性，提示MUC1與炎癥因子表達(dá)存在一定的相關(guān)性。但是MUC1具體參與痤瘡發(fā)生發(fā)展機制尚需要更多基礎(chǔ)研究來證實。

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（收稿日期：2020-07-13）