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    水產(chǎn)品中內(nèi)分泌干擾物殘留檢測(cè)方法研究進(jìn)展

    2021-03-24 09:09:54黃合田楊鴻波孫曉紅
    水產(chǎn)科學(xué) 2021年2期
    關(guān)鍵詞:質(zhì)譜法內(nèi)分泌水產(chǎn)品

    黃合田,楊鴻波,孫曉紅,郭 峰

    (1.貴州醫(yī)科大學(xué) 公共衛(wèi)生學(xué)院,貴州 貴陽(yáng) 550025;2.貴州省分析測(cè)試研究院,貴州 貴陽(yáng) 550014;3.國(guó)家地質(zhì)實(shí)驗(yàn)測(cè)試中心,自然資源部生態(tài)地球化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100037)

    環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(EDCs),是一類存在于環(huán)境介質(zhì)中并介導(dǎo)生物體內(nèi)分泌激素的合成、釋放、代謝、結(jié)合和排泄作用,對(duì)其后代產(chǎn)生有害影響的外源性化學(xué)物質(zhì);因干擾內(nèi)分泌系統(tǒng)的過(guò)程與雌激素類似,故也被稱為環(huán)境激素[1-2]。環(huán)境內(nèi)分泌干擾物分為自然存在和人為合成,人為合成的主要來(lái)源于人類廣泛的農(nóng)業(yè)和工業(yè)活動(dòng),如常見(jiàn)的有機(jī)氯農(nóng)藥、己烯雌酚、雙酚A、多環(huán)芳烴類和多氯聯(lián)苯類(PCBs)等,研究表明,其中已有300多種物質(zhì)危害人類和動(dòng)物的健康[3-5]。近年來(lái)隨著環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的廣泛應(yīng)用以及未經(jīng)處理的各類廢水排放,使得各地環(huán)境受到不同程度的污染。Luo等[6]檢測(cè)分析了湘江的21種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的質(zhì)量濃度水平,發(fā)現(xiàn)烷基酚的質(zhì)量濃度最高,為0.8~3100 ng/L;Kumirska等[7]利用氣相色譜質(zhì)譜法分析污水處理廠的污泥和魚塘沉積物,檢出17-β-雌二醇、17-α-炔雌醇等13種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物,質(zhì)量濃度為未檢出~489 μg/kg。

    隨著養(yǎng)殖業(yè)和近海漁業(yè)的快速發(fā)展,集中飼養(yǎng)已成為主要的飼養(yǎng)方式。為提高產(chǎn)量在飼料中添加蛋白同化類激素藥物增加水產(chǎn)品蛋白轉(zhuǎn)化率,或是直接在養(yǎng)殖水中施用過(guò)量的藥物用于治療和預(yù)防疾病。環(huán)境內(nèi)分泌干擾物化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定、不易降解、半衰期長(zhǎng),極易在環(huán)境中積累并破壞生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性[8-9]。研究表明,環(huán)境中類固醇類激素質(zhì)量濃度1 ng/L時(shí)即可影響水生生物的內(nèi)分泌系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)的正常功能[10-11]。如不利于雌魚卵母細(xì)胞生長(zhǎng)和成熟;雄魚的睪丸變小且精子數(shù)量減少;促性腺激素釋放激素、神經(jīng)元的破壞和免疫系統(tǒng)功能異常[12-14]。有研究表明,一定劑量的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物會(huì)影響人體健康,如發(fā)生骨細(xì)胞的分化和凋亡,誘發(fā)女性過(guò)早絕經(jīng)并影響生殖發(fā)育,增加患乳腺癌等疾病的風(fēng)險(xiǎn),導(dǎo)致DNA編碼、蛋白質(zhì)合成和體內(nèi)內(nèi)源性激素代謝異常從而進(jìn)一步影響各個(gè)系統(tǒng)的正常功能等[11,15-16]。世界衛(wèi)生組織和聯(lián)合國(guó)環(huán)境規(guī)劃署出版的《關(guān)于EDC的第二份科學(xué)聲明》表示,肥胖等慢性非傳染性疾病、生殖系統(tǒng)疾病和激素敏感性癌癥等的發(fā)生與環(huán)境內(nèi)分泌干擾物暴露密切相關(guān)[1]。目前,國(guó)內(nèi)外均有相關(guān)的法律和法規(guī)限制或禁止將己烯雌酚等環(huán)境內(nèi)分泌干擾物應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖。我國(guó)農(nóng)業(yè)部235號(hào)公告修改版《動(dòng)物性食品中獸藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定了丙酸睪酮等藥物可作為治療藥物,但不得在動(dòng)物性食品中檢出,醋酸甲孕酮、己烯雌酚、甲基睪丸酮等禁止使用,同時(shí)在食品中也不得檢出。

    為保障我國(guó)水產(chǎn)品食品安全和產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展,必須加強(qiáng)水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的檢測(cè)和監(jiān)督管理。由于環(huán)境內(nèi)分泌干擾物種類繁多、化學(xué)性質(zhì)差異大、含量低,并且水產(chǎn)品含有大量的脂肪基質(zhì)等干擾物質(zhì),需要相適應(yīng)的前處理技術(shù)進(jìn)行分離凈化以及高通量、高靈敏度的檢測(cè)分析技術(shù)。筆者綜合近年來(lái)已發(fā)表的文獻(xiàn),闡述水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的提取、凈化和儀器檢測(cè)方法,包括傳統(tǒng)和新型提取技術(shù)的比較和應(yīng)用,固相萃取等常用的凈化技術(shù),以及高靈敏度的質(zhì)譜方法和快速分析的免疫分析法,為今后快速、簡(jiǎn)便、高效地檢測(cè)水產(chǎn)品中的多種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留提供科學(xué)理論依據(jù)。

    1 水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留檢測(cè)技術(shù)

    1.1 樣品前處理技術(shù)

    樣品的提取是影響檢測(cè)分析方法結(jié)果準(zhǔn)確度的重要因素,如果樣品凈化不完全易導(dǎo)致嚴(yán)重的基質(zhì)效應(yīng)和儀器污染。水產(chǎn)品中含有豐富的脂肪酸和油脂,極易影響水產(chǎn)品中殘留環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的提取和凈化。

    1.1.1 樣品提取技術(shù)

    水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留的提取效率是前處理的關(guān)鍵,直接影響方法的靈敏度。現(xiàn)已報(bào)道的傳統(tǒng)提取方法如索氏提取、液液萃取、超聲波萃取等方法,以甲醇、乙腈和正己烷等溶劑為提取液。但這些處理方法存在操作繁瑣、有機(jī)溶劑消耗大、重復(fù)性差以及回收率低等缺點(diǎn)。隨著新技術(shù)的發(fā)展,如雙水相萃取、亞臨界萃取、固相微萃取、QuEChERs等方法有效克服傳統(tǒng)提取方法的缺點(diǎn),具有操作簡(jiǎn)單、省時(shí)、溶劑消耗量少、回收率高且重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),在食品和環(huán)境等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。Wang等[17]使用索氏提取、加速溶劑提取和微波輔助萃取提取魚樣中多氯聯(lián)苯和多溴聯(lián)苯醚,萃取的時(shí)間由24 h縮至40 min;對(duì)于辛醇—水分配系數(shù)大的多氯聯(lián)苯同源物,索氏提取的回收率低于加速溶劑提取和微波輔助提取法。水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留的提取方法的應(yīng)用及主要特點(diǎn)見(jiàn)表1。

    表1 水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留分析提取技術(shù)的應(yīng)用及特點(diǎn)Tab.1 Application and characteristics of extraction and analysis methods of endocrine disrupting chemicals(EDSs) in fishery products

    由表1可知,各種前處理提取方法均有各自的優(yōu)缺點(diǎn),可將多種提取方法結(jié)合使用,提高提取效率。對(duì)實(shí)際樣品的檢測(cè)分析,需要根據(jù)水產(chǎn)品的種類、環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的特性以及所使用儀器的靈敏度等選擇相應(yīng)的提取方法,保證獲得檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確。

    1.1.2 樣品凈化方法

    目前常用的凈化方法為柱層析法、固相萃取(SPE)法和凝膠滲透色譜法。凝膠滲透色譜法是以多孔性凝膠為固定相,根據(jù)相對(duì)分子量的大小對(duì)樣品中各組分進(jìn)行分離的方法。分子量小的物質(zhì)進(jìn)入凝膠孔中停留時(shí)間長(zhǎng),分子量越大停留時(shí)間越短。凝膠滲透色譜法去除脂肪、蛋白質(zhì)和色素等大分子物質(zhì)效率高,通過(guò)優(yōu)化雜質(zhì)洗脫時(shí)間和主收集時(shí)間可得到較好的凈化效果,有利于目標(biāo)分析物的富集得到較好的回收率[24]。柱層析法和固相萃取原理類似,均是通過(guò)吸附和洗脫的方法對(duì)樣品進(jìn)行分離和純化[25]。柱層析法根據(jù)物質(zhì)在固定相上的吸附能力,收集不同填料層的洗脫液。相對(duì)于此,固相萃取法通過(guò)少量的洗脫液完成水產(chǎn)品中單個(gè)或多種殘留環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的凈化和富集,有利于環(huán)境的綠色建設(shè),并且現(xiàn)在使用的固相萃取柱多為商業(yè)化產(chǎn)品,種類繁多并且材料填充緊實(shí),凈化材料也不易吸附待測(cè)組分,尤其對(duì)于短時(shí)批量?jī)艋透患a(chǎn)品中殘留環(huán)境內(nèi)分泌干擾物十分方便,是目前最常用的凈化手段。3種凈化方法的部分應(yīng)用實(shí)例見(jiàn)表2。

    表2 水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留分析凈化技術(shù)的應(yīng)用Tab.2 Application of purification technology in residue analysis of EDCs in fishely products

    2 檢測(cè)技術(shù)

    2.1 色譜法

    色譜法是根據(jù)物質(zhì)在不同固定相中的選擇性分配,不同的物質(zhì)在流動(dòng)相洗脫下以不同的速度移動(dòng),最終實(shí)現(xiàn)分離的效果。如高效液相色譜技術(shù)以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),因其分離效率高、分析速度快被廣泛應(yīng)用。適用于分析不易揮發(fā)、熱不穩(wěn)定性的物質(zhì)。同時(shí)高效液相色譜可結(jié)合紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器等不同的檢測(cè)器使用。江潔等[18]采用液液萃取結(jié)合高效液相色譜技術(shù)檢測(cè)分析羅非魚肌肉組織中的6種激素,其中雌二醇、睪酮、甲基睪酮、醋酸甲輕孕酮的回收率較好(>70%),檢出限為0.05~0.10 ng/L。Ismail等[19]采用高相液相色譜結(jié)合熒光檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)魚類中的雙酚A,檢出限為0.005 μg/kg,在250 μg/kg、500 μg/kg加標(biāo)水平下回收率為61.54%~93%。但是此技術(shù)消耗有機(jī)溶劑量大,要求復(fù)雜基質(zhì)的樣品前處理凈化程度高;相對(duì)于質(zhì)譜等高靈敏度的分析器,含量較低的樣品易導(dǎo)致假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。

    2.2 質(zhì)譜法

    質(zhì)譜法是現(xiàn)在分析手段中最常用的檢測(cè)技術(shù),通過(guò)氣相或液相與質(zhì)譜聯(lián)用,并結(jié)合高效凈化的前處理技術(shù)能在短時(shí)間內(nèi)同時(shí)分析檢測(cè)復(fù)雜基質(zhì)中的多種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。質(zhì)譜作為檢測(cè)系統(tǒng),利用四級(jí)桿質(zhì)譜、飛行時(shí)間質(zhì)譜、四級(jí)桿—靜電場(chǎng)軌道阱質(zhì)譜等質(zhì)量分析器,獲得分子離子峰的準(zhǔn)確質(zhì)量數(shù)和碎片離子等信息,準(zhǔn)確定性定量分析不同基質(zhì)中的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。因其高通量、高靈敏度和高精密度成為分析檢測(cè)各種介質(zhì)中痕量環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的常用手段。

    氣相色譜質(zhì)譜法、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法是現(xiàn)在常用于分析易揮發(fā)、熱穩(wěn)定類環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的主要分析手段。通過(guò)氣相色譜分離組分復(fù)雜的痕量有機(jī)物,并結(jié)合質(zhì)譜的高靈敏度對(duì)化合物實(shí)現(xiàn)分離和準(zhǔn)確定量分析。Liu等[31]利用氣相色譜質(zhì)譜法和選擇離子監(jiān)測(cè)模式分析檢測(cè)云南昆明水產(chǎn)品市場(chǎng)魚中的8種類固醇激素和酚類物質(zhì),各物質(zhì)回收率為55.1%~100.6%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.3%~12.7%,方法檢出限為0.3~0.7 μg/kg。但對(duì)于低揮發(fā)性、含量極低的部分類固醇類激素則需要衍生化來(lái)滿足儀器檢測(cè)靈敏度。而衍生化會(huì)使得前處理操作繁瑣和耗時(shí),并且衍生化的反應(yīng)時(shí)間、溫度、衍生化試劑的極性大小和用量對(duì)衍生化效率都有較為明顯的影響,同時(shí)還會(huì)產(chǎn)生副產(chǎn)物[32-34];并且同時(shí)衍生化多種類別激素比較困難。近年來(lái)文獻(xiàn)采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀為檢測(cè)手段的研究見(jiàn)表3。

    表3 水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)實(shí)例Tab.3 Examples of EDCs residue detection in fishery products by GC-MS or GC-MS/MS

    液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法與氣相色譜質(zhì)譜法、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法類似,是以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜作為檢測(cè)系統(tǒng)。相對(duì)于氣相色譜質(zhì)譜法、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法,液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法的前處理操作相對(duì)簡(jiǎn)單,不需要對(duì)目標(biāo)分析物進(jìn)行衍生化,可以分析某些難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定性的化合物。Ye等[42]建立了超高效色譜質(zhì)譜聯(lián)用法快速篩查和定量分析魚肉中甾體激素和酚類物質(zhì),平均回收率為71.2%~108%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于16%,檢出限0.04~0.08 ng/g。近年來(lái)飛行時(shí)間質(zhì)譜、四級(jí)桿—靜電場(chǎng)軌道阱質(zhì)譜等在食品安全領(lǐng)域逐漸深入使用,利用高分辨質(zhì)譜的高分辨率、高靈敏度和強(qiáng)抗干擾能力,以及結(jié)合相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫(kù)可高通量快速篩查水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留,同時(shí)還可通過(guò)數(shù)據(jù)回顧性分析發(fā)現(xiàn)其他潛在的有機(jī)污染物。如鞠玲燕等[43]采用超高效液相色譜結(jié)合四極桿—靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜快速篩查和分析水產(chǎn)品中28種農(nóng)藥類環(huán)境激素,回收率為65.6%~98.9%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為6.2%~11.3%,檢出限<10 μg/kg。應(yīng)用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留的檢測(cè)見(jiàn)表4。

    表4 水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)實(shí)例Tab.4 Examples of EDCs residue detection in fishery products with LC-MS/MS

    (續(xù)表4)

    2.3 免疫分析法

    免疫分析法是利用抗體和抗原特異性的結(jié)合對(duì)殘留的污染物進(jìn)行檢測(cè)分析的方法,不需要昂貴的儀器設(shè)備,并且對(duì)操作人員的技術(shù)要求不高,具有便捷、快速、特異性強(qiáng)和靈敏等特點(diǎn)。環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的檢測(cè)方法常用放射免疫測(cè)定法和酶聯(lián)免疫吸附法。魚中卵黃蛋白原是雌二醇在雌二醇循環(huán)過(guò)程中產(chǎn)生的,其含量代表生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)狀態(tài)的綜合指標(biāo),同時(shí)被用作監(jiān)測(cè)環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的重要生物標(biāo)志物[53]。Lim等[54]開發(fā)了酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)雌激素的結(jié)合受體卵黃蛋白原用以檢測(cè)魚血清中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的含量,主要是通過(guò)卵黃蛋白單克隆抗體和多克隆抗體來(lái)檢測(cè)卵黃蛋白原,回收率達(dá)95%。Beitel等[55]采用酶聯(lián)免疫吸附法定量北美本地魚類血漿中11-酮睪酮和17-雌二醇,用以評(píng)估環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對(duì)魚類中類固醇激素生成的影響。徐美奕等[56]采用放射免疫法測(cè)定湛江海域養(yǎng)殖的5種常見(jiàn)魚肌肉中的5種激素的殘留量,并與野生魚類比較,發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖魚中均有檢出且含量均高于野生魚。Metcalfe等[57]采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)3種不同種類的魚類血液中內(nèi)固醇激素,其回收率為90%~120%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低于10%,此方法可用于魚類中激素的快速篩查。但由于通過(guò)抗原和抗體的特異性結(jié)合的方式實(shí)現(xiàn)分析檢測(cè),不適用于同時(shí)檢測(cè)分析多種目標(biāo)物。水產(chǎn)品中由于富含脂肪,極易影響抗原和抗體的特異性反應(yīng),故低含量樣品的精準(zhǔn)定量還需要借助靈敏度高的大型儀器檢測(cè)。

    3 展望與未來(lái)

    由于漁藥的不科學(xué)不合理使用、工業(yè)生產(chǎn)原料的大量使用以及生活和農(nóng)業(yè)污水的排放,使得養(yǎng)殖水環(huán)境中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物含量持續(xù)積累。近年來(lái)的研究顯示,極低含量的內(nèi)分泌干擾物已會(huì)嚴(yán)重影響生物體的健康,長(zhǎng)期積累到一定量將導(dǎo)致機(jī)體不可逆的損害。水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物殘留的檢測(cè)已成為監(jiān)測(cè)水產(chǎn)品質(zhì)量安全的重要手段。由于數(shù)量和種類的逐漸增多,有效準(zhǔn)確地檢測(cè)水產(chǎn)品中殘留的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物也愈加具有挑戰(zhàn)性。因此開發(fā)和建立簡(jiǎn)便、快速、高效的前處理技術(shù),以及高靈敏度和高通量快速篩查水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物多殘留的檢測(cè)分析方法是發(fā)展的必然趨勢(shì)。

    前處理方法是環(huán)境激素檢測(cè)的重要基礎(chǔ),經(jīng)過(guò)多年的發(fā)展,目前國(guó)內(nèi)外對(duì)水產(chǎn)品中殘留環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的前處理新的提取手段如乙腈—水雙水相萃取、亞臨界萃取、固相微萃取、QuEChERs等方法已逐漸取代索氏提取、液液萃取和超聲波萃取等耗時(shí)長(zhǎng)、污染大的傳統(tǒng)提取方法,簡(jiǎn)單、便捷、成本低、高通量的多組分同時(shí)提取凈化技術(shù)將是未來(lái)前處理技術(shù)發(fā)展的方向,以滿足社會(huì)日益增長(zhǎng)的對(duì)環(huán)境監(jiān)測(cè)準(zhǔn)確、及時(shí)、方便的需求。

    目前對(duì)水產(chǎn)品中殘留環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的檢測(cè)分析以色譜法、質(zhì)譜法為主要手段,因氣相色譜質(zhì)譜法、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法具有較高靈敏度而得到了廣泛的應(yīng)用,但受限于儀器價(jià)格昂貴、操作復(fù)雜且不易攜帶,并未廣泛應(yīng)用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。免疫分析法等生物檢測(cè)方法因其具有快速、靈敏、高效、適宜現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等特點(diǎn),將會(huì)在未來(lái)更多地應(yīng)用在環(huán)境激素現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等方面。同時(shí),為了應(yīng)對(duì)不斷增多的環(huán)境激素種類,開發(fā)研究新的檢測(cè)方法和技術(shù)也具有重要意義。

    當(dāng)然,水產(chǎn)品的質(zhì)量安全僅靠養(yǎng)殖過(guò)程中和過(guò)后的監(jiān)測(cè)還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。探明水產(chǎn)品中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的污染來(lái)源,從根源上查明此類物質(zhì)在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面的使用也是重要的控制手段。應(yīng)倡導(dǎo)綠色生態(tài)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,定期監(jiān)管飼養(yǎng)環(huán)境中環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的水平,加強(qiáng)流通環(huán)節(jié)水產(chǎn)品的質(zhì)量檢測(cè),從水產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)鏈的源頭上控制環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的污染,促進(jìn)我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。

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