TNF-α、IL-6及細(xì)胞免疫水平在慢性咽炎患者血清中的變化及其意義

徐珂

（開(kāi)封市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 開(kāi)封475002）

慢性咽炎是臨床常見(jiàn)的咽喉疾病,近年來(lái)發(fā)病率呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，由于早期臨床體征較為常見(jiàn)，因此容易和呼吸道感染等多種呼吸系統(tǒng)疾病混淆，多數(shù)患者為急性咽炎治療不徹底導(dǎo)致反復(fù)發(fā)作，對(duì)呼吸道器官不斷刺激造成，因此病程較長(zhǎng)，容易反復(fù)，對(duì)患者的心理和生理壓力影響較大[1]。目前研究顯示慢性咽炎發(fā)病率占到所有咽喉類(lèi)疾病的五分之一[1]，因此早期明確診斷并積極地采取相應(yīng)的對(duì)癥處理對(duì)改善患者預(yù)后具有重要意義，TNFα、IL-6屬于人體常見(jiàn)的細(xì)胞因子類(lèi)型,在慢性炎癥病變患者體內(nèi)出現(xiàn)升高,有學(xué)者指出慢性咽炎患者體內(nèi)細(xì)胞免疫機(jī)能發(fā)生變化,而臨床對(duì)于慢性咽炎患者TNF-α、IL-6以及細(xì)胞免疫水平變化研究相對(duì)較少[2]。本研究分析了慢性咽炎患者血清中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、外周血細(xì)胞免疫水平，以期為臨床提供指導(dǎo)和依據(jù)，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院確診的120例慢性咽炎患者（咽炎組）、同期健康體檢對(duì)象60例作為對(duì)照組，病例收集時(shí)間2016年10月-2018年6月。

咽炎組，男72例、女48例，年齡26~65歲，平均43.3±11.0歲，病程2年~11年，平均6.2±3.0年，其中吸煙50例、飲酒44例。對(duì)照組，男33例、女27例，年齡23~65歲，平均41.8±13.0歲，其中吸煙22例、飲酒20例。兩組研究對(duì)象的年齡、性別、吸煙、飲酒情況比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

診斷及入選標(biāo)準(zhǔn)：⑴慢性咽炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《耳鼻喉痛經(jīng)外科學(xué)》的慢性咽炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；⑵患者主訴眼部干澀、灼熱、癢、痰液粘滯感等；⑶檢查發(fā)現(xiàn)咽喉部紅腫、充血、黏膜下淋巴結(jié)組織及結(jié)締組織增生；⑷本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理規(guī)定，對(duì)研究對(duì)象的各項(xiàng)資料保密。

研究對(duì)象的排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴咽喉及頭頸部腫瘤；⑵慢阻肺、支氣管哮喘；⑶甲狀腺功能障礙患者；⑷近3個(gè)月具有激素、抗生素應(yīng)用史；⑸自身免疫性疾病，糖尿病等影響免疫系統(tǒng)的基礎(chǔ)病變。

1.2 治療方法 給予患者布地奈德治療，布地奈德2ml/次，霧化吸入治療每次5min，2次/d，連續(xù)治療2周。同時(shí)給予患者重要清咽方治療，用方如下：黃芪30g，黨參15g，半夏12g，白術(shù)12g，丹參12g，茯苓12g，射干12g，蘇子12g，厚樸12g，僵蠶10g，炙甘草6g,上述藥物水煎服每日一劑,煎取藥液400ml分兩次早晚溫服，連續(xù)服用2周?；颊呓?jīng)過(guò)治療，咽痛、咽癢、異物感、口咽干燥、干咳、淋巴濾泡增生、咽黏膜充血、水腫、分泌物等癥狀或上述部分政治得到顯著的緩解或者減輕則判斷為治療有效。

1.3 指標(biāo)檢測(cè)方法 抽取患者空腹靜脈血3ml，3000r/min離心15min后分離血清待檢，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定患者TNF-α、IL-6濃度變化，試劑由南京建成生物研究所提供（TNF-α批號(hào)：1703 11，IL-6批號(hào)：20160714）,按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。采用美國(guó)Beckman公司CytoFLEX型流式細(xì)胞儀測(cè)定T淋巴細(xì)胞亞群變化情況,流式抗體來(lái)源自成熟的T淋巴細(xì)胞。在100μl抗凝血中加入20μl熒光單克隆抗體，避光室溫作用20min，溶去紅細(xì)胞固定劑固定，在流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)，調(diào)節(jié)熒光補(bǔ)償,設(shè)定陽(yáng)性參數(shù)值,通過(guò)FacScomp軟件使用2micron Beads按照程序設(shè)定計(jì)算細(xì)胞比例。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本研究收集的所有數(shù)據(jù)均在SPSS21.0中進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,一般資料中的計(jì)量數(shù)據(jù)、血清TNF-α、IL-6水平及外周血T淋巴細(xì)胞分別采用±s進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，數(shù)據(jù)比較分析應(yīng)用t檢驗(yàn)；一般資料中的計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。

2 結(jié)果

2.1 咽炎組和對(duì)照組的血清TNF-α、IL-6水平比較 咽炎組患者的血清TNF-α、IL-6水平顯著高于對(duì)照組（P<0.05）,見(jiàn)表1。

表1 咽炎組和對(duì)照組的血清TNF-α、IL-6水平比較（±s）

表1 咽炎組和對(duì)照組的血清TNF-α、IL-6水平比較（±s）

組別咽炎組對(duì)照組t值P值n TNF-α（μg/L）120 60 2.30±0.77 0.85±0.26 14.171 0.000 IL-6（pg/L）64.8±15.3 37.4±7.9 13.019 0.000

2.2 咽炎組和對(duì)照組的外周血T淋巴細(xì)胞水平比較 咽炎組患者的外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于對(duì)照組（P<0.05），咽炎組患者的外周血CD8+高于對(duì)照組（P<0.05）,見(jiàn)表2。

表2 咽炎組和對(duì)照組的外周血T淋巴細(xì)胞水平比較（±s）

表2 咽炎組和對(duì)照組的外周血T淋巴細(xì)胞水平比較（±s）

組別 n咽炎組對(duì)照組t值P值120 60 CD3+（%）61.3±5.0 67.8±4.2-8.655 0.000 CD4+（%）CD8+（%）37.4±6.0 44.2±5.5-7.365 0.000 27.3±2.3 22.9±2.0 12.620 0.000 CD4+/CD8+1.37±0.20 1.93±0.28-15.424 0.000

2.3 咽炎組治療前后的血清TNF-α、IL-6水平比較 咽炎組患者的治療后的血清TNF-α、IL-6水平較治療前顯著降低（P<0.05）,見(jiàn)表3。

表3 咽炎組治療前后的血清TNF-α、IL-6水平比較（±s）

表3 咽炎組治療前后的血清TNF-α、IL-6水平比較（±s）

時(shí)間 n治療前治療2周t值P值120 120 TNF-α（μg/L） IL-6（pg/L）2.30±0.77 1.13±0.52 13.794 0.000 64.8±15.3 45.4±10.2 11.557 0.000

2.4 咽炎組治療前后的外周血T淋巴細(xì)胞水平比較 咽炎組患者的治療后的外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較治療前顯著升高（P<0.05），咽炎組患者的治療后的外周血CD8+水平較治療前顯著降低（P<0.05）,見(jiàn)表4。

表4 咽炎組治療前后的外周血T淋巴細(xì)胞水平比較（±s）

表4 咽炎組治療前后的外周血T淋巴細(xì)胞水平比較（±s）

時(shí)間 n治療前治療2周t值P值120 120 CD3+（%）61.3±5.0 65.0±5.6-5.399 0.000 CD4+（%）CD8+（%）37.4±6.0 42.2±6.2-6.094 0.000 27.3±2.3 23.7±3.0 10.432 0.000 CD4+/CD8+1.37±0.20 1.78±0.27-13.367 0.000

3 討論

慢性咽炎是臨床常見(jiàn)的上呼吸道疾病,近年來(lái)發(fā)病率呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，主要是咽喉黏膜、黏膜下和淋巴組織形成的彌漫性炎癥反應(yīng)病變,患者主要以咽喉疼痛、咽部紅腫以及咽喉異物感為主，本病病情容易反復(fù)，雖然臨床治療方法較多，但是效果不明顯[3]。研究顯示慢性咽炎的發(fā)生主要是急性咽炎遷延不愈導(dǎo)致,患者反復(fù)病發(fā)造成了黏膜下充血和結(jié)締組織增生，血管周?chē)霈F(xiàn)淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)，造成患者腺體肥大，黏液增多，最終形成咽喉后壁出現(xiàn)顆粒狀隆起淋巴濾泡,腺體分泌減少也是導(dǎo)致黏膜發(fā)生萎縮變薄的重要原因[4]。本研究采取了中西醫(yī)結(jié)合治療方法應(yīng)用在慢性咽炎的治療中充分發(fā)揮了中西醫(yī)結(jié)合治療的優(yōu)勢(shì),西醫(yī)治療以抗菌藥物為主同時(shí)輔助糖皮質(zhì)激素吸入治療,雖然效果顯著,但是由于抗菌藥物廣泛應(yīng)用存在一定的耐藥性，同時(shí)容易導(dǎo)致咽喉部菌群失衡，人體免疫功能下降，最終造成病情遷延難愈[4]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為本病屬于“喉痹”范疇，主要是由于氣候變化或者臟腑虧虛等造成咽喉失養(yǎng)，火熱邪氣上擾導(dǎo)致，最終造成人體氣機(jī)失衡，陰陽(yáng)生降失常，經(jīng)絡(luò)閉阻造成病發(fā)[5]。本研究采用自擬清咽方治療,方中黃芪可以健脾益氣，固表止汗，防風(fēng)可以疏風(fēng)解表，白術(shù)能夠健脾益氣，黨參能夠補(bǔ)肺固表，益氣，茯苓可以淡滲利濕，健脾和胃，射干能夠利咽止痛，半夏可以健脾和胃，化痰止嘔，丹參能夠活血化瘀，僵蠶可以化瘀散結(jié)，蘇子可以開(kāi)竅行氣，厚樸能夠散結(jié)化痰，炙甘草調(diào)和諸藥，全方合用發(fā)揮了利咽散結(jié)、健脾益氣的效果[6,7]?，F(xiàn)代藥理學(xué)證實(shí)茯苓、黨參中的多糖可以調(diào)節(jié)人體免疫機(jī)能，發(fā)揮抗疲勞作用，僵蠶、丹參等可以抗凝、鎮(zhèn)靜，射干具有抗病原微生物、解熱化痰的作用，厚樸能夠抗炎鎮(zhèn)痛、抑制病原菌，蘇子則具有抗菌、抗氧化以及化痰止咳作用，厚樸則能夠緩解局部肌肉痙攣，因此應(yīng)用在慢性咽炎中效果顯著[8]。

本研究分析了中西醫(yī)結(jié)合治療前后慢性咽炎患者體內(nèi)炎癥因子和細(xì)胞免疫功能變化情況，白介素-6屬于炎癥細(xì)胞因子,多數(shù)為單核巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞等進(jìn)行分泌,可以發(fā)揮抗炎與促炎的雙重作用,一方面其在感染等因素下會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)C反應(yīng)蛋白合成明顯增多,促進(jìn)了B細(xì)胞的增殖和分化形成免疫作用，同時(shí)還能夠促進(jìn)人體白細(xì)胞介素-1與腫瘤壞死因子介導(dǎo)惡病質(zhì)形成，當(dāng)人體存在免疫功能紊亂時(shí)IL-6屬于典型的促炎因子,與抗感染中的過(guò)度免疫有關(guān),可以作為評(píng)估病情嚴(yán)重程度及預(yù)后情況的指標(biāo)[9]。研究顯示白細(xì)胞介素-6還可以誘導(dǎo)急性期蛋白形成,對(duì)炎癥反應(yīng)進(jìn)行催化和放大，導(dǎo)致細(xì)胞損傷，有報(bào)道指出白細(xì)胞介素-6是引發(fā)全身器官損傷的重要促炎癥因子[10]。腫瘤壞死因子-α則是單核巨噬細(xì)胞分泌的促炎因子,可以抑制胃酸分泌，具有的生物學(xué)功能較多，可以誘導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化,同時(shí)還可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡或者抑制細(xì)胞凋亡促進(jìn)腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用,研究顯示低濃度該因子可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖,高濃度則可以造成腫瘤細(xì)胞死亡[11]。同時(shí)腫瘤壞死因子-α還具有雙重的生物學(xué)效應(yīng),既是人體的免疫防護(hù)介質(zhì),同時(shí)也可以參與人體的免疫病理?yè)p傷，慢性咽炎患者體內(nèi)持續(xù)釋放過(guò)多的腫瘤壞死因子-α?xí)?dǎo)致細(xì)胞因子之間關(guān)系失衡,引發(fā)人體的病理變化[12]。慢性咽炎的發(fā)生與人體免疫機(jī)能異常關(guān)系密切,由于炎癥反應(yīng)發(fā)生會(huì)導(dǎo)致人體對(duì)于應(yīng)激反應(yīng)程度下降，形成了體內(nèi)免疫紊亂狀況，體內(nèi)出現(xiàn)惡性循環(huán)，人體的免疫機(jī)能正常運(yùn)轉(zhuǎn)依靠免疫細(xì)胞、免疫球蛋白參與其中[13]。本研究分析了T細(xì)胞變化情況，其中CD3+數(shù)量反應(yīng)人體免疫節(jié)能強(qiáng)弱，代表了人體總T細(xì)胞狀況；CD4+則是輔助/誘導(dǎo)T細(xì)胞,能夠分泌多種細(xì)胞因子參與調(diào)免疫調(diào)節(jié)過(guò)程[14]；CD8+是抑制/細(xì)胞毒性T細(xì)胞，可以對(duì)病毒與腫瘤細(xì)胞進(jìn)行殺傷,當(dāng)慢性咽炎發(fā)作后造成人體免疫器官被破壞，T細(xì)胞顯著減少且出現(xiàn)功能異常，因此在多種誘因作用下陷入了炎癥反應(yīng)的惡性循環(huán)[15]。

本研究顯示，咽炎組患者的血清TNF-α、IL-6水平顯著高于對(duì)照組,說(shuō)明在慢性咽炎患者體內(nèi)存在TNF-α、IL-6水平升高。咽炎組患者的外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于對(duì)照組，咽炎組患者的外周血CD8+高于對(duì)照組，說(shuō)明在慢性咽炎患者體內(nèi)存在細(xì)胞免疫功能降低。咽炎組患者的治療后的血清TNF-α、IL-6水平較治療前顯著降低；咽炎組患者的治療后的外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平較治療前顯著升高,咽炎組患者的治療后的外周血CD8+水平較治療前顯著降低，說(shuō)明采取積極的中西醫(yī)結(jié)合治療方案應(yīng)用在慢性咽炎患者中可以減輕體內(nèi)炎癥反應(yīng)程度,提升細(xì)胞免疫機(jī)能。

綜上所述，慢性咽炎患者存在TNF-α、IL-6水平升高，細(xì)胞免疫水平降低的情況，經(jīng)過(guò)治療能有效改善患者的炎癥反應(yīng)及細(xì)胞免疫水平。