抗-HCV,HCV RNA檢測(cè)在丙型肝炎中的應(yīng)用價(jià)值探討

呂金娥，陶婭琳，馬麗娟，李婭萍，尹春瓊，包艷

（曲靖市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南 曲靖655000）

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）感染引發(fā)的病毒性肝炎疾病,會(huì)導(dǎo)致機(jī)體肝臟慢性炎癥壞死及纖維化，最終造成肝硬化或癌變，對(duì)患者生命健康造成嚴(yán)重威脅,所以需盡早診斷和治療[1]。近年來(lái)隨著檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展,丙型肝炎檢查方法已逐漸完善[2]。目前對(duì)丙型肝炎主要采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）及聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），前者用于檢測(cè)血清中HCV抗體,后者用于監(jiān)測(cè)HCV RNA[3，4]。為探究抗-HCV以及血清HCV RNA在診斷丙型肝炎中的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年5月-2018年12月來(lái)我院就診，檢驗(yàn)科收集的143例抗-HCV初篩實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性的患者標(biāo)本，其中男87例，女56例,年齡19～81歲。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 取患者清晨空腹靜脈血3ml，3000 r/min離心10min，將血清轉(zhuǎn)移至無(wú)RNA酶的離心管置于-20℃冰箱內(nèi)保存,每周四進(jìn)行HCV RNA檢測(cè),剩余血清當(dāng)日進(jìn)行抗-HCV及ALT的檢測(cè)。

1.2.2 儀器與試劑 ABI 7300熒光定量分析儀（美國(guó)ABI公司）、HCV RNA診斷試劑盒及質(zhì)控品（中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司）；MUltiskan MK3全自動(dòng)酶標(biāo)儀（Labsystem Dragon公司）；HCV抗體ELISA試劑（上海科華生物股份有限公司）及質(zhì)控品（北京康徹恩坦生物技術(shù)有限公司）；日立7600全自動(dòng)生化分析儀、ALT試劑（中申北控生物股份有限公司）。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)方法 嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。對(duì)結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn),P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 在143例抗-HCV初篩陽(yáng)性的樣本中，99例HCV RNA陽(yáng)性（69.23%），44例HCV RNA陰性(30.76%),且陰性結(jié)果中有33例抗-HCV S/CO＞10；99例HCV RNA陽(yáng)性樣本,隨著抗-HCV S/CO比值的增大HCV RNA的陽(yáng)性率增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；且在不同的S/CO比值區(qū)間HCV RN A載量水平增加出現(xiàn)的陽(yáng)性率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 HCV RNA陽(yáng)性患者ALT異常率高于陰性患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（0.01＜P＜0.05）；隨著HCV RNA病毒載量水平的增高ALT異常率沒(méi)有顯著性差異（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

表1 抗-HCV陽(yáng)性結(jié)果在不同S/CO比值區(qū)間HCV RNA結(jié)果分析

表2 HCV RNA病毒載量與ALT結(jié)果分析

丙型病毒性肝炎是由HCV感染所引起的傳染性疾病，主要通過(guò)血液在人群中傳播，其發(fā)病率僅次于乙型病毒性肝炎[5]。丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（HCV）感染引發(fā)的病毒性肝炎疾病，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體肝臟慢性炎癥壞死及纖維化,最終造成肝硬化或癌變，對(duì)患者生命健康造成嚴(yán)重威脅，所以需盡早診斷和治療[1]。近年來(lái)隨著檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展,丙型肝炎檢查方法已逐漸完善[2]。目前對(duì)丙型肝炎主要采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）及聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），前者用于檢測(cè)血清中HCV抗體，后者用于監(jiān)測(cè)HCV RNA[3，4]。

本研究結(jié)果顯示：143例抗-HCV初篩陽(yáng)性患者中有99例HCV RNA陽(yáng)性，陽(yáng)性率為69.23%，明顯高于福建林曉淵[6]報(bào)道的46.6%，這可能與地域差異及研究對(duì)象有關(guān)，但與貴州羅天永等[7]報(bào)道的67.7%及青海王春瑋[8]報(bào)道的70.44%結(jié)果相近。表1數(shù)據(jù)顯示隨著抗-HCV初篩陽(yáng)性結(jié)果的S/CO比值的增大，HCV RNA的陽(yáng)性率增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）與福建林曉淵[6]等較多國(guó)內(nèi)研究報(bào)道一致；但在不同的S/CO比值區(qū)間HCV RNA載量水平增加出現(xiàn)的陽(yáng)性率沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05），這與王春瑋等研究報(bào)道不一致[8]，可能與地區(qū)及個(gè)體差異有關(guān)及自身免疫功能及肝細(xì)胞再生等因素有關(guān)。在44例HCV RNA陰性（30.76%）結(jié)果中有33例的抗-HCV S/CO值＞10,這與濟(jì)南王燕等[9]報(bào)道的ELISA法抗-HCV S/CO＞10 HCV RN A的陽(yáng)性率為100%差異較大,可能由于熒光定量PCR方法檢測(cè)HCV RNA的影響因素較多，特別是HCV為RNA病毒，容易被RNA酶降解，從而出現(xiàn)假陰性；另外機(jī)體丙肝復(fù)制呈間斷性，當(dāng)病毒暫停復(fù)制時(shí),HCV RNA濃度較低,可使檢測(cè)結(jié)果呈陰性,而抗-HCV會(huì)持續(xù)存在一段時(shí)間[10,11]。上述因素的存在,結(jié)合HCV RNA陰性肝功能ALT異常率為20.45%的證據(jù)，抗-HCV S/CO＞10、HCV RNA＜1.0×103IU/ml,不能排除HCV感染及病毒復(fù)制，在研究血清病毒載量與致病性的關(guān)系時(shí),還應(yīng)參考肝穿刺結(jié)果肝病理診斷及其他肝功能指標(biāo),以便得出更加準(zhǔn)確的結(jié)論,用于指導(dǎo)治療，評(píng)估療效，判斷預(yù)后。

表2 結(jié)果顯示：HCV RNA陽(yáng)性患者的ALT異常率高于HCV RNA陰性患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（0.01＜P＜0.05），表明肝臟炎癥時(shí)HCV RNA檢出率高，ALT正常時(shí)HCV RNA檢出率較低，間接反映丙型肝炎病毒感染情況。然而，99例HCV RNA陽(yáng)性患者中高達(dá)43.43%(43例)ALT正常,這可能與HCV對(duì)肝外組織的泛嗜性,尤其對(duì)單核細(xì)胞的作用,肝損害隱匿，臨床表現(xiàn)不典型，ALT升高不明顯甚至正常,對(duì)肝臟造成的炎癥反應(yīng)輕仍有慢性化進(jìn)展；也可能機(jī)體處于免疫耐受、應(yīng)答平衡狀態(tài)。抗-HCV陽(yáng)性并不代表感染HCV病毒，只能代表患者曾經(jīng)感染過(guò)或正在感染；抗-HCV高低能間接反映感染情況，但不是絕對(duì)，還需檢測(cè)HCV RNA，且在HCV RNA陰性患者中仍存在ALT異常及S/CO＞10的情況。

綜上所述,單一檢測(cè)抗-HCV或者HCV RNA從而確定丙型肝炎感染存在病原學(xué)漏診,以HCV RNA為重要的檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)聯(lián)合檢測(cè)抗-HCV和ALT檢測(cè),可降低丙型肝炎的漏檢率；在抗-HC V陽(yáng)性,尤其S/CO＞10，HCV RNA陰性和ALT異常的情況下，應(yīng)對(duì)HCV RNA連續(xù)檢測(cè)，降低HCV的漏診率，達(dá)到早診斷，早治療的目標(biāo)。