血清Klotho蛋白水平與缺血性腦卒中致血管性癡呆的相關(guān)性

鹿濱麒，陳建明

（南陽市第二人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南南陽473000）

缺血性腦卒中（Ischemic stroke）是腦動(dòng)脈狹窄或阻塞，導(dǎo)致腦供血不足，致腦組織壞死的腦缺血類型的總稱,為臨床常見的腦血管疾病之一[1]。血管性癡呆(Vascular dementia，VD)指由缺血性腦卒中、出血性腦卒中等腦血管疾病引起的智力及認(rèn)知功能障礙的綜合征[2,3]。Klotho蛋白包括αKlotho和β Klotho兩種,為成纖維細(xì)胞生長因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）受體復(fù)合物的主要成分[4,5]。有研究表明[6]，F(xiàn)GF及Klotho蛋白的高表達(dá)有助于延長壽命，且Klotho蛋白具有抗炎、抗血小板聚集、保持血管擴(kuò)張的作用。孫俊[7]等人認(rèn)為，Klotho基因通過體內(nèi)基因表達(dá),產(chǎn)生的膜結(jié)合型蛋白與分泌型蛋白均對心血管疾病有明顯保護(hù)作用，且濃度越高，心血管疾病發(fā)病率越低。本研究旨在探討血清Klotho蛋白水平與缺血性腦卒中致血管性癡呆的相關(guān)性，希望為臨床提供更多的參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年2月至2018年1月我院收治的126例缺血性腦卒中患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴年齡60～85歲；⑵確診為缺血性腦卒中者；⑶自愿受試。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴出血性腦卒中者；⑵精神病患者；⑶除血管性癡呆的其他類型癡呆者；⑷依從性差。所有患者在發(fā)病后3個(gè)月復(fù)診，分為血管性癡呆（癡呆組）和非癡呆組，癡呆組60例，男性36例，女性24例，年齡72～85歲，平均年齡為78.36±4.23歲；非癡呆組66例，男性38例，女性28例，年齡66～78歲，平均年齡為76.43±4.52 歲。兩組患者一般資料無明顯差異，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。患者及其家屬均對本研究充分知情，且簽署知情同意書，本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 所有患者入院后均進(jìn)行血液檢查、心電圖檢查及頭顱電子計(jì)算機(jī)斷層掃描（Computed Tomography，CT）和磁共振成像（Magnetic Resonance Imaging，MRI）檢查確定診斷；所有患者入院后均給予抗血栓形成、抗血小板凝集、降低腦水腫、降壓、降血糖等對癥治療；所有患者均在發(fā)病后3個(gè)月采集清晨空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血5ml，測定血清中超敏C反應(yīng)蛋白 （hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）、高半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）及Klotho蛋白水平,具體方法如下：⑴hs-CRP:采集的靜脈血離心后取上清液,采用膠乳粒子增強(qiáng)比濁免疫測定法(Latex particle enhanced turbidimetric immunoassay,LETIA)，通過全自動(dòng)生化分析儀（日本日立公司生產(chǎn)，型號(hào)7180）及hs-CRP試劑盒進(jìn)行測定。⑵Hcy：將乙二胺四乙酸二鈉（北京索萊寶生物科技有限公司，型號(hào)E8030）加入采集的靜脈血標(biāo)本中進(jìn)行抗凝處理，加入磺基水楊酸（北京索萊寶生物科技有限公司，型號(hào)S8330）以沉淀蛋白質(zhì)，離心后取上清液，加入三乙酰氧基硼氫化鈉（美國SIGMA公司,編號(hào)316393）還原胺化,加入單溴二胺（美國艾美捷科技有限公司，型號(hào)AAT-633）反應(yīng)3分鐘,后加入無水乙酸以終止反應(yīng),將150mm×4.6mm的十八烷基硅烷鍵合硅膠填料（Octadecylsilyl，ODS）插入樣本，使用高效液相色譜熒光檢測器（美國安捷倫科技有限公司生產(chǎn)，型號(hào)G1321A）激發(fā)波長365nm，發(fā)射波長475nm進(jìn)行檢測，保持10.5分鐘。⑶Klotho蛋白：利用人Klotho蛋白檢測試劑盒（上?？道噬锟萍加邢薰?貨號(hào)KL-KL-Hu）及其說明書進(jìn)行測定。

1.3 觀察指標(biāo) 一般情況；體內(nèi)hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平；缺血性腦卒中致VD的危險(xiǎn)因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS20.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料采用配對t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)；有序分類變量資料采用秩和檢驗(yàn)；危險(xiǎn)因素采用Logistic回歸分析；相關(guān)性分析采用Pearson檢驗(yàn)；所有檢驗(yàn)確定P值，做出推論。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般情況比較 兩組患者年齡、飲酒、梗死范圍上有顯著差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 兩組患者體內(nèi)hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平比較 兩組患者體內(nèi)hs-CRP、Hcy水平有明顯差異，且癡呆組水平明顯高于非癡呆組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組患者體內(nèi)Klotho蛋白水平有明顯差異，且癡呆組明顯低于非癡呆組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 危險(xiǎn)因素Logistic回歸分析 年齡、hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平為缺血性腦卒中致VD的密切相關(guān)因素，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；高血脂和大面積梗死為缺血性腦卒中致VD的可能相關(guān)因素。見表3。

表1 兩組患者一般情況比較（例）

表2 兩組患者血清中體內(nèi)hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平比較(±s)

表2 兩組患者血清中體內(nèi)hs-CRP、Hcy及Klotho蛋白水平比較(±s)

組別 例數(shù)癡呆組非癡呆組60 66 t P hs-CRP（mg/L）Hcy（μmol/L）4.98±0.86 4.57±0.92 2.577 0.011 18.36±10.42 13.52±11.36 2.484 0.014 Klotho蛋白（pg/ml）165.69±96.68 324.64±87.63 9.681 0.000

表3 危險(xiǎn)因素Logistic回歸分析

3 討論

缺血性腦卒中為VD的主要發(fā)病原因。有研究表明[8]，年齡、高血壓、LDL等為VD的危險(xiǎn)因素。腦部缺血可導(dǎo)致體內(nèi)膽堿能通路受損[9]。膽堿能神經(jīng)(cholinergic nerve)指末梢可釋放乙酰膽堿（Acetylcholine，Ach）的神經(jīng)纖維，主要分布于大腦白質(zhì)區(qū)域。腦白質(zhì)損傷所致認(rèn)知功能障礙的機(jī)制主要為額葉-皮質(zhì)下聯(lián)絡(luò)纖維破壞，導(dǎo)致執(zhí)行功能障礙[10]。

Klotho蛋白主要為成纖維細(xì)胞生長因子23（fibroblast growth factor23，F(xiàn)GF23）結(jié)合蛋白。FGF為垂體和下丘腦分泌的一種多肽,可促進(jìn)干細(xì)胞生成，產(chǎn)生大量紅細(xì)胞及白細(xì)胞，增加左心室厚度及心肌彈性，還可減少體內(nèi)LDL含量，并防止脂質(zhì)沉積于血管壁，減少血栓形成[11,12]。本研究結(jié)果顯示，兩組患者年齡、飲酒、梗死范圍上有顯著差異，說明以上因素可作為缺血性腦卒中致VD的高危因素。hs-CRP為血漿中的一種C反應(yīng)蛋白，對心血管等疾病具有指導(dǎo)意義。有研究表明，hs-CRP水平與梗死面積及神經(jīng)功能缺損程度相關(guān)。Hcy是一種含巰基的氨基酸,為蛋氨酸與半胱氨酸代謝的中間產(chǎn)物。Hcy可直接或間接導(dǎo)致血管內(nèi)皮組織細(xì)胞的損傷，并能促進(jìn)血管平滑肌增殖，減少LDL的氧化，使血小板聚集，促進(jìn)血栓形成[13,14]。本研究結(jié)果顯示,兩組患者體內(nèi)hs-CRP、Hcy水平有明顯差異,且癡呆組水平明顯高于非癡呆組；兩組患者體內(nèi)Klotho蛋白水平有明顯差異，且癡呆組明顯低于非癡呆組，說明VD患者體內(nèi)hs-CRP、Hcy水平高于未發(fā)病者，Klotho蛋白水平低于未發(fā)病者。

綜上所述，Klotho蛋白水平與缺血性腦卒中致VD密切相關(guān),可作為缺血性腦卒中后預(yù)測VD的標(biāo)志物，Klotho蛋白的低表達(dá)可導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能障礙，使腦白質(zhì)灌注不足，腦神經(jīng)細(xì)胞損傷。