玉米須多糖與普洱茶多糖降血糖、降血脂作用研究

藏傳剛 任珊 劉宇超 丁琳 郭皓 關(guān)宏 楊文欽 劉吉成

【摘要】 目的：考察玉米須多糖和普洱茶多糖降血糖、降血脂作用及聯(lián)合使用的作用效果。方法：取180只清潔級雄性Wistar大鼠，以空腹血糖值隨機分為18組，每組10只，模型組與治療組采用高脂高糖飼料配合四氧嘧啶誘導大鼠高血糖、高血脂模型。不同試劑及劑量干預30 d后，檢測各組血清中血糖（Glu）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）含量、體重及糖耐量。結(jié)果：實驗結(jié)束時，陽性藥物組、玉米須多糖（SMP）高劑量組、生茶多糖（CPP）高劑量組、玉米須多糖+生茶多糖[（S+C）P]高劑量組、熟茶多糖（RPP）高劑量組及玉米須多糖+熟茶多糖[（S+R）P]高劑量組體重與模型組相比均顯著降低（P<0.05）。正常組、陽性藥物組、（S+C）P中、高劑量組Glu均低于模型組（P<0.01）;SMP中、高劑量組、CPP高劑量組、RPP中、高劑量組、（S+R）P中、高劑量組Glu均低于模型組（P<0.05）。正常組及所有治療組TC均低于模型組（P<0.05）。SMP中、高劑量組，（S+C）P中、高劑量組，（S+R）P中、高劑量組及RPP高劑量組TG較模型組降低（P<0.05）。除CPP低劑量組其余治療組LDL均較模型組降低（P<0.05）;正常組及所有治療組HDL均高于模型組（P<0.05）。陽性藥物組、SMP中、高劑量組0.5 h血糖較模型組降低（P<0.05）;陽性藥物組、SMP高劑量組2 h血糖較模型組降低（P<0.05）;陽性藥物組、SMP高劑量組血糖曲線下面積較模型組降低（P<0.05）。結(jié)論：玉米須多糖和普洱茶多糖能夠顯著降低高血糖、高血脂模型大鼠的血糖和血脂水平，且兩者聯(lián)合應用效果更明顯，具有協(xié)同作用。

【關(guān)鍵詞】 玉米須多糖 普洱茶多糖 高血糖 高血脂

The Hypoglycemic and Hyperlipidemic Effects of Stigma-maydis Polysaccharides and Pu-erh Tea Polysaccharides/ZANG Chuangang， REN Shan， LIU Yuchao， DING Lin， GUO Hao， GUAN Hong， YANG Wenqin， LIU Jicheng. //Medical Innovation of China， 2021， 18（16）： 0-034

[Abstract] Objective： To investigate the hypoglycemic and hyperlipidemic effects of stigma-maydis polysaccharides and Pu-erh tea polysaccharides and their combined use. Method： A total of 180 clean male Wistar rats were randomly divided into 18 groups according to the fasting blood glucose value， 10 rats in each group. The model group and the treatment group were treated with a high-fat and high-sugar diet combined with Alloxan to induce hyperglycemia and hyperlipidemia in rats. After 30 days of intervention with different reagents and doses， the contents of blood glucose （Glu）， total cholesterol （TC）， triglyceride （TG）， low density lipoprotein （LDL） and high density lipoprotein （HDL） in serum， body weight and glucose tolerance in each group were determined. Result： At the end of the experiment， the body weight of the positive drug group， SMP high-dose group， CPP high-dose group， （S+C）P high-dose group， RPP high-dose group and （S+R）P high-dose group were significantly decreased compared with model group （P<0.05）. Glu in normal group， positive drug group， （S+C）P medium and high dose groups were lower than that in model group （P<0.01）; Glu in SMP medium and high dose groups， CPP high dose groups， RPP medium and high dose groups， （S+R）P medium and high dose groups were lower than that in model group （P<0.05）. TC in normal group and all treatment groups were lower than that in model group （P<0.05）. Compared with model group， TG in SMP medium and high dose groups， （S+C）P medium and high dose groups， （S+R）P medium and high dose groups and RPP high dose groups decreased （P<0.05）. LDL of all treatment groups except CPP low-dose group were lower than that of model group （P<0.05）; HDL in normal group and all treatment groups were higher than that in model group （P<0.05）. 0.5 h blood glucose of positive drug group， SMP medium and high dose groups were lower than that of model group （P<0.05）; 2 h blood glucose of positive drug group and SMP high-dose group were lower than that of model group （P<0.05）. The area under the blood glucose curve in the positive drug group and SMP high-dose group were lower than that in the model group （P<0.05）. Conclusion： The stigma-maydis polysaccharides and Pu-erh tea polysaccharides can significantly reduce the blood glucose and lipid levels of hyperglycemia and hyperlipidemia model rats， and the combined application of the two has a more obvious effect， showing a synergistic effect.

[Key words] Stigma-maydis polysaccharides Pu-erh tea polysaccharides Hyperglycemia Hyperlipidemia

First-author’s address： Qiqihar Medical University， Qiqihar 161006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.16.007

玉米須是我國傳統(tǒng)中藥材，性平味甘，歸肝、腎經(jīng)，有利尿消腫、利濕退黃功效，用于水腫尿少，濕熱黃疸和頭暈目昏[1]。其在土耳其、美國和法國等許多國家也作為傳統(tǒng)藥物用于治療許多疾病，包括膀胱炎、前列腺疾病、糖尿病和肥胖癥[2]。玉米須多以水煎入藥，而水煎劑的主要成分之一就是多糖[3]。普洱茶的另一個標簽為“減肥茶”，近些年許多學者研究發(fā)現(xiàn)其具有降血脂、降血糖、抗氧化以及健齒護牙等功效[4]，并推測茶多糖是茶葉中重要的生理活性物質(zhì)，如茶葉的降血糖功能[5]。

本實驗采用水提醇沉法制備了玉米須多糖（stigma maydis polysaccharides，SMP），普洱生茶多糖（crude Pu-erh tea polysaccharides，CPP），普洱熟茶多糖（ripened Pu-erh tea polysaccharides，RPP），并考察了玉米須多糖及普洱茶多糖對實驗大鼠血糖和血脂的調(diào)節(jié)作用，以及兩者聯(lián)用的作用效果，為開發(fā)玉米須和普洱茶功能食品提供理論依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 （1）藥材。本實驗所使用的玉米須、普洱生茶和普洱熟茶均由齊齊哈爾醫(yī)學院醫(yī)藥科學研究院提供，由齊齊哈爾醫(yī)學院天然藥物化學中心主任郭麗娜教授鑒定為禾本科植物玉蜀黍的花柱和柱頭及云南大葉種曬青毛茶。（2）動物。清潔級雄性Wistar大鼠180只，平均（150.7±20.2）g，

購自哈爾濱醫(yī)科大學實驗動物學部，許可證號scxk（黑）2016-001。動物飼養(yǎng)環(huán)境清潔，保持通風，墊料干燥衛(wèi)生，每周更換2～3次。室內(nèi)溫度18～22 ℃，光照充足，大鼠自由飲水和攝食，適應環(huán)境5～7 d。（3）藥品與試劑。四氧嘧啶（Sigma公司，批號AS114074）;葡萄糖（Acros 公司，批號：A0256732）;鹽酸二甲雙胍片（天津中新藥業(yè)集團股份有限公司，批號：p0913041），規(guī)格：0.25 g/片;血糖試紙（羅氏卓越型，批號：474004）。（4）儀器。C-311全自動生化儀（日本日立公司）;真空冷凍干燥機（德國CHRIST公司）;高速冷凍離心機（德國赫默公司）;高速中藥粉碎機（廣州大祥電子機械設備有限公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 多糖提取物的制備 分別取清洗過的干燥玉米須粉末、普洱生茶和普洱熟茶，按1︰30體積比加入蒸餾水置于提取罐中，浸提2 h，重復3次，合并提取液并適當濃縮，向濃縮液中緩慢加入無水乙醇，使液體最終乙醇濃度為80%，待多糖沉淀后，轉(zhuǎn)移至離心機收集沉淀，沉淀分別用95%乙醇、無水乙醇洗滌后，用蒸餾水充分溶解，隔日轉(zhuǎn)至真空冷凍干燥機，干燥結(jié)束后得多糖樣品，放入干燥器內(nèi)保存，現(xiàn)用現(xiàn)配，其中玉米須、普洱熟茶、普洱生茶多糖樣品中多糖的含量分別為27.58%、24.91%和41.74%。

1.2.2 動物分組及給藥劑量 共設18組，每組10只。所有大鼠普通維持飼料適應性飼養(yǎng)后，禁食3～4 h，取大鼠尾血，用血糖儀測定血糖值，以血糖水平隨機分組，分組后開始灌胃給藥。根據(jù)藥典中玉米須用藥記載以及普洱茶日常用量，參照《人和動物間按體表面積折算的等效劑量比值表》，并結(jié)合多糖樣品提取率計算得出給藥劑量，具體分組及給藥劑量見表1。各組大鼠每日上午灌胃給藥一次，連續(xù)30 d。

1.2.3 造模方法 參照衛(wèi)健委保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范（2003版）中《輔助降血糖功能檢驗方法》，各組給予大鼠維持飼料飼養(yǎng)，1周后模型組和治療組更換高熱能飼料（豬油10%、蔗糖15%、蛋黃粉15%、酪蛋白5%、膽固醇1.2%、膽酸鈉0.2%、碳酸氫鈣0.6%、石粉0.4%、基礎飼料52.6%），喂飼3周后，模型組和治療組禁食24 h（不禁水），給予小劑量四氧嘧啶105 mg/kg腹腔注射，注射量為0.1 mL/kg。注射后繼續(xù)給予高熱能飼料喂飼3～5 d，造模結(jié)束。

1.3 指標檢測及方法

1.3.1 生理指標 實驗期間，每天記錄大鼠進食、進水情況，每周測量一次大鼠體重。保持鼠籠內(nèi)環(huán)境干燥，每周更換墊料2～3次，灌胃操作均由固定的熟練人員在上午9：00-11：00完成。

1.3.2 糖耐受量 末次灌胃給藥結(jié)束后，各組動物禁食過夜，不禁水，于次日測定各組大鼠空腹血糖值（FBG）即給葡萄糖前（0 h）血糖值，各劑量組給予相應受試物，模型組及空白組給予同體積蒸餾水，15～20 min后各組經(jīng)口給予葡萄糖2.5 g/kg，并開始計時，在0.5和2 h時測定大鼠血糖值。觀察各組給葡萄糖后各時間點血糖值及血糖曲線下面積的變化。

1.3.3 血清指標 末次灌胃給藥后，大鼠禁食過夜，不禁水，于次日采用腹主動脈取血方法采血，采血管靜止30～60 min后放入離心機進行分離，離心條件為3 000 r/min，15 min。分離后的血清于全自動生化分析儀進行測定，檢測指標有血糖（Glu）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 17.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，一般采用方差分析，按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗，方差齊，計算F值，F(xiàn)值< F0.05，各組均數(shù)間差異無顯著性;F值≥F0.05，P≤0.05，用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 實驗大鼠體重變化結(jié)果 實驗結(jié)束時，正常組體重（299.7±27.2）g較模型組（361.4±18.1）g顯著降低（P<0.01）;陽性藥物組（323.4±30.3）g、SMP高劑量組（343.7±16.2）g、CPP高劑量組（341.1±29.3）g、（S+C）P高劑量組（345.4±13.7）g、RPP高劑量組（342.8±29.0）g及（S+R）P高劑量組（329.0±29.8）g體重與模型組相比均顯著降低（P<0.05）。

2.2 實驗大鼠血清生化指標檢測結(jié)果 正常組、陽性藥物組、（S+C）P中、高劑量組Glu均低于模型組（P<0.01）;SMP中、高劑量組、CPP高劑量組、RPP中、高劑量組、（S+R）P中、高劑量組Glu均低于模型組（P<0.05）。正常組及所有治療組TC均低于模型組（P<0.05）。正常組TG低于模型組（P<0.01）;SMP中、高劑量組，（S+C）P中、高劑量組，（S+R）P中、高劑量組及RPP高劑量組TG較模型組降低（P<0.05）。正常組LDL低于模型組（P<0.01）;除CPP低劑量組其余治療組LDL均較模型組降低（P<0.05）;正常組及所有治療組HDL均高于模型組（P<0.05）。見表2。

2.3 實驗大鼠糖耐量結(jié)果 模型組0.5、2 h血糖及血糖曲線下面積均較正常組升高（P<0.05）;陽性藥物組、SMP中、高劑量組0.5 h血糖較模型組降低（P<0.05）;陽性藥物組、SMP高劑量組2 h血糖較模型組降低（P<0.05）;陽性藥物組、SMP高劑量組血糖曲線下面積較模型組降低（P<0.05）。見表3。

3 討論

近些年來，多糖作為功能食品已悄然興起，人們并對多糖的生物活性也越來越關(guān)注[6]。天然藥物多糖被發(fā)現(xiàn)具有促進免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤及降血糖等功能[7]。普洱茶是中國黑茶文化的代表，在日常生活中人們多關(guān)注其減肥作用，而通過相關(guān)的研究表明，茶葉中含有的茶多糖、茶多酚以及茶色素等活性成分具有很強的降糖降脂作用[8]。其中多糖成分因具有多種生物活性而成為大家關(guān)注的重點，合理開發(fā)其功能性食品成為必然趨勢[9-10]。玉米須是我國傳統(tǒng)中藥材，但其利用率比較低。衛(wèi)健委在衛(wèi)監(jiān)督函（〔2012〕306號）中聲明：玉米須在我國具有一定的食用歷史，未發(fā)現(xiàn)安全性問題，可作為普通食品管理[11]。從考察多糖類藥理活性和提高傳統(tǒng)中藥材利用率角度出發(fā)，本課題組對玉米須多糖、普洱茶多糖的降血糖、降血脂作用效果進行實驗研究。

本實驗采用文獻[12]水提醇沉法制備了玉米須多糖，普洱熟茶、生茶多糖并考察了其對高血糖、高血脂模型大鼠體重、血糖和血脂的作用。實驗結(jié)束時，模型組體重較正常組顯著升高，增長率約為21%。SMP、CPP、RPP均能顯著降低模型大鼠體重，其中（S+R）P組體重相對較低，表明玉米須多糖與熟茶多糖聯(lián)用能夠較好地抑制高糖高脂飲食誘導的大鼠體重異常升高，而體重的控制對于2型糖尿病的治療有明顯的促進作用[13]。在大鼠血清指標結(jié)果中，模型組血糖、血脂含量較正常組相比顯著升高，說明高脂飲食以及腹腔注射四氧嘧啶誘導了實驗大鼠的高血糖、高血脂，此造模方法已被大家認可[14]。本研究結(jié)果數(shù)據(jù)顯示，玉米須多糖與生茶多糖聯(lián)用降血糖作用顯著;CPP降低甘油三酯作用較弱，與玉米須多糖聯(lián)用后降低作用效果明顯;SMP、CPP、RPP都能顯著降低LDL，玉米須多糖與生茶多糖聯(lián)用LDL降低更明顯;SMP、CPP、RPP對大鼠HDL都有顯著升高作用，其中CPP作用最強，且玉米須多糖與生茶多糖聯(lián)用HDL最高，血清中HDL含量的升高與提高機體抗炎、抗氧化能力密切相關(guān)[15]。

由于個體生活、飲食方式的原因，高血糖、高血脂人群比例顯著上升[16]。高血糖、高血脂不是一種疾病的診斷，只是檢測結(jié)果的判定，檢測是一時的結(jié)果，所以高血糖、高血脂不完全等于糖尿病和高脂血癥，但血糖、血脂長期處于較高狀態(tài)必會引起機體一系列的病變，所以對于高血糖、高血脂的預防及治療顯得尤為重要[17]。糖尿病前期都伴有不同程度的脂代謝異常，以TG升高最為常見，同時TG也可作為糖尿病前期好轉(zhuǎn)的預測指標[18]。對于高糖高脂飲食導致的體重異常升高，普洱茶的抑制作用較為明顯，體現(xiàn)了其減肥的作用[19-20]。本研究結(jié)果顯示，SMP組較模型組血糖下降率為39%，同時玉米須能夠改善模型大鼠糖耐量，提示玉米須對于胰島素損傷有修復作用，這與吳晨曦等[21]研究結(jié)果一致。

綜上所述，玉米須多糖和普洱茶多糖能夠顯著降低高血糖、高血脂模型大鼠的血糖和血脂水平，且兩者聯(lián)合應用效果更明顯，具有協(xié)同作用。

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（收稿日期：2021-01-13） （本文編輯：田婧）