下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥患者介入術(shù)后白細(xì)胞介素-8、白細(xì)胞介素-18、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子檢測(cè)及意義

尹 晶， 吳清華， 王 鵬， 姜建威， 張 弘， 姜海軍

目前臨床上采用經(jīng)皮腔內(nèi)血管成形術(shù)（PTA）和支架植入術(shù)治療下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥（atherosclerotic occlusion，ASO）效果顯著，但術(shù)后血管再狹窄成為治療難點(diǎn)［1］。研究顯示血管內(nèi)皮損傷后形成血栓或血管重構(gòu)引起炎性反應(yīng)等，均為血管內(nèi)介入術(shù)后血管再狹窄發(fā)病的可能機(jī)制［2］。研究證實(shí)體內(nèi)炎性反應(yīng)標(biāo)志物白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-8和IL-18可促進(jìn)炎性反應(yīng)發(fā)生并參與疾病發(fā)生發(fā)展［3］。血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）參與血管生成和炎性反應(yīng)等過(guò)程，并可促進(jìn)疾病發(fā)展進(jìn)程［4］。下肢ASO患者介入術(shù)后血清IL-8、IL-18、VEGF水平檢測(cè)研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究選取下肢ASO患者為研究對(duì)象，分析介入術(shù)后血清IL-8、IL-18、VEGF水平變化及其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取在承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院就診的下肢ASO患者65例（研究組），均經(jīng)CTA診斷。其中男44例，女21例；年齡52～73歲，平均（64.22±14.07）歲；病程2～24個(gè)月。研究組患者介入術(shù)后隨訪(fǎng)3個(gè)月，隨訪(fǎng)結(jié)束后復(fù)查CTA并與術(shù)前比較，術(shù)后發(fā)生血管再狹窄12例（再狹窄組），未發(fā)生再狹窄53例（未再狹窄組）。另選取同期體檢的健康志愿者42例（對(duì)照組），其中男28例，女14例；年齡55～72歲，平均（65.36±12.78）歲。兩組臨床資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性?；颊呒{入標(biāo)準(zhǔn)：①下肢ASO患者符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］；②未應(yīng)用激素類(lèi)藥物治療；③無(wú)溶栓、抗凝禁忌證；④對(duì)研究知情且簽署同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有心、肝等重要臟器嚴(yán)重?fù)p傷；②有精神疾??；③下肢潰瘍壞疽；④下肢ASO患者介入術(shù)前后接受其他治療；⑤不服從治療或試驗(yàn)安排。

1.2 介入治療方法

根據(jù)研究組患者術(shù)前CTA檢查結(jié)果，采用Seldinger技術(shù)穿刺股動(dòng)脈并置管，實(shí)施PTA后行雙下肢DSA造影，若血管狹窄開(kāi)通＜50%，即植入支架［6］。隨訪(fǎng)3個(gè)月后復(fù)查CTA，評(píng)估血管狹窄情況，判斷標(biāo)準(zhǔn)為支架內(nèi)或支架兩端血管腔直徑狹窄＞50%［7］。

1.3 血清IL-8、IL-18、VEGF水平檢測(cè)

研究組入組時(shí)、術(shù)后24 h、隨訪(fǎng)3個(gè)月末，對(duì)照組入組時(shí)分別抽取清晨空腹靜脈血4 mL，離心10 min后吸取血清，置于-20℃保存待檢測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)血清VEGF、IL-18水平（試劑盒購(gòu)自深圳晶美生物技術(shù)公司），放射免疫分析法檢測(cè)血清IL-8水平（試劑盒購(gòu)自北方免疫試劑研究所）。

1.4 臨床指標(biāo)檢測(cè)

兩組入組時(shí)均抽取空腹靜脈血3 mL。采用ELISA法檢測(cè)血清血小板活化因子（PAF）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平，免疫熒光法檢測(cè)血清尿酸（UA）、尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（UAT）水平，微量熱沉法檢測(cè)纖維蛋白原（FIB）含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例表示，兩組間比較用χ2檢驗(yàn)。采用logistic回歸法對(duì)ASO患者術(shù)后再狹窄發(fā)生相關(guān)因素進(jìn)行單因素和多因素分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

研究組血清PAF、hs-CRP、UA、FIB水平與對(duì)照組相比均顯著升高（P＜0.001），UTA水平顯著降低（P＜0.001），見(jiàn)表1。研究組術(shù)前、術(shù)后血清IL-8、IL-18、VEGF水平與對(duì)照組相比，均顯著升高（t=18.571、11.393、0.618，P＜0.001和t=5.832、4.396、2.735，P＜0.001）；研究組術(shù)后血清IL-8、IL-18、VEGF水平與術(shù)前相比，均顯著降低（t=22.590、6.437、12.171，P＜0.001），見(jiàn)表2。研究組中再狹窄組血清IL-8、IL-18、VEGF水平，均顯著高于未再狹窄組（P＜0.001），見(jiàn)表3。

表1 兩組一般資料比較

表2 研究組介入術(shù)前后血清IL-8、IL-18、VEGF水平變化 ±s

表2 研究組介入術(shù)前后血清IL-8、IL-18、VEGF水平變化 ±s

*與術(shù)前比較，P＜0.001；#與對(duì)照組比較，P＜0.001

組別 IL-8/（ng/mL）IL-18/（ng/L） VEGF/（pg/mL）研究組（n=65）術(shù)前 2.34±0.78# 75.26±16.87# 256.47±85.49#術(shù)后 0.15±0.05*# 55.31±18.43*# 123.51±21.17*#對(duì)照組（n=42） 0.10±0.03 41.25±11.75 108.36±36.12

表3 研究組再狹窄發(fā)生時(shí)血清IL-8、IL-18、VEGF水平變化 ±s

表3 研究組再狹窄發(fā)生時(shí)血清IL-8、IL-18、VEGF水平變化 ±s

組別 IL-8/（ng/mL）IL-18/（ng/L）VEGF/（pg/mL）再狹窄組（n=12） 2.18±0.72 73.25±14.42 253.19±84.39未再狹窄組（n=53）0.11±0.03 52.39±17.46 112.47±37.49 t值 21.434 3.845 8.978 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

Logistic單因素分析下肢ASO患者介入術(shù)后血管再狹窄相關(guān)影響因素結(jié)果顯示，血清UA、FIB、IL-8、IL-18、VEGF水平升高為影響術(shù)后血管再狹窄的危險(xiǎn)因素，見(jiàn)表4。進(jìn)一步logistic多因素分析結(jié)果顯示，血清IL-8、IL-18、VEGF水平升高為術(shù)后血管再狹窄的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，見(jiàn)表5。

表4 Logistic單因素分析下肢ASO患者介入術(shù)后再狹窄相關(guān)因素的結(jié)果

表5 Logistic多因素分析下肢ASO患者介入術(shù)后再狹窄相關(guān)因素的結(jié)果

3 討論

下肢ASO是一種慢性進(jìn)展性疾病，炎性反應(yīng)或內(nèi)皮細(xì)胞損傷引起細(xì)胞脂質(zhì)沉積，引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化，促使管腔狹窄或閉塞，以皮溫降低、下肢潰瘍等為主要臨床表現(xiàn)［8］。臨床治療多采用PTA和支架植入術(shù)，但部分患者會(huì)出現(xiàn)術(shù)后血管再狹窄。因而，如何有效評(píng)估術(shù)后療效或預(yù)后具有重要臨床意義［9］。

研究表明IL-8對(duì)機(jī)體炎性反應(yīng)具有促進(jìn)作用，炎性反應(yīng)越嚴(yán)重，患者血清IL-8水平越高，并參與粥樣硬化斑塊形成過(guò)程［10］。IL-18為新型炎性因子，可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖并參與血管重塑等過(guò)程［11］，但有關(guān)IL-18與下肢ASO發(fā)病過(guò)程的研究相對(duì)較少。本研究檢測(cè)下肢ASO患者血清IL-8、IL-18水平，結(jié)果顯示患者術(shù)前血清IL-8、IL-18水平均顯著高于正常對(duì)照組，與文獻(xiàn)報(bào)道相似［12］；其術(shù)后水平顯著低于術(shù)前，但仍顯著高于正常對(duì)照組，這有利于臨床早期預(yù)測(cè)下肢ASO疾病發(fā)生，其水平變化還在一定程度上反映疾病進(jìn)展。本研究還根據(jù)下肢ASO患者術(shù)后是否發(fā)生血管再狹窄，比較分析其血清IL-8、IL-18水平變化，結(jié)果顯示再狹窄組患者血清IL-8、IL-18水平顯著高于未再狹窄組，說(shuō)明血清IL-8、IL-18水平與術(shù)后再狹窄密切相關(guān)，其表達(dá)水平越高越易發(fā)生術(shù)后再狹窄。其原因，可能為介入手術(shù)操作過(guò)程中患者血管壁和內(nèi)皮細(xì)胞受到不同程度損傷，機(jī)體出現(xiàn)局部炎性反應(yīng)，導(dǎo)致血清IL-8、IL-18水平急速上升并引發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化及血管增生過(guò)程。當(dāng)機(jī)體血管內(nèi)皮細(xì)胞恢復(fù)正常時(shí)，血清IL-8、IL-18水平下降［13］。

研究發(fā)現(xiàn)VEGF可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂，并反映血管內(nèi)皮功能［14］。有研究表明，VEGF在動(dòng)脈粥樣硬化形成過(guò)程中發(fā)揮重要功能，可促使新血管形成，但極易破裂形成血栓并與高表達(dá)水平FIB相互作用，加快動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成［15］。本研究結(jié)果顯示，下肢ASO患者介入術(shù)前后血清VEGF水平均顯著高于對(duì)照組，且術(shù)后顯著低于術(shù)前；說(shuō)明介入術(shù)前后患者血清VEGF水平存在顯著差異，并可能參與ASO疾病發(fā)生、發(fā)展過(guò)程。這可能是由于下肢ASO患者術(shù)前和術(shù)中體內(nèi)半胱氨酸水平升高導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷或功能障礙，進(jìn)而引起VEGF水平升高。術(shù)后半胱氨酸水平恢復(fù)時(shí)，VEGF水平明顯下降［16］。本研究結(jié)果還顯示，再狹窄組患者血清VEGF水平顯著高于未再狹窄組，說(shuō)明血清VEGF水平高低與介入術(shù)后血管再狹窄發(fā)生有關(guān)。對(duì)影響下肢ASO患者介入術(shù)后再狹窄的相關(guān)因素進(jìn)行l(wèi)ogistic單因素分析顯示，UA、FIB、IL-8、IL-18、VEGF水平均為影響術(shù)后再狹窄的危險(xiǎn)因素；進(jìn)一步多因素分析顯示，IL-8、IL-18、VEGF水平為術(shù)后再狹窄發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果提示，血清IL-8、IL-18、VEGF水平可作為下肢ASO患者介入術(shù)后血管再狹窄的重要指標(biāo)，并可評(píng)估介入術(shù)后恢復(fù)情況。

綜上所述，下肢ASO患者介入術(shù)后血清IL-8、IL-18、VEGF水平均顯著降低，且血管再狹窄患者三者水平均顯著高于未再狹窄患者。檢測(cè)三者表達(dá)水平對(duì)下肢ASO患者介入術(shù)后治療效果及再狹窄發(fā)生具有重要預(yù)測(cè)價(jià)值，有助于臨床早期治療及預(yù)后評(píng)估。