食源性金黃色葡萄球菌腸毒素及其檢測方法

左 佳

（河北省邢臺市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北 邢臺 054001）

金黃色葡萄球菌是自然界中普遍存在的病原菌，若是含水量及含淀粉量較多的食品被此球菌污染，在適宜溫度下只需8～10h便會產(chǎn)生大量腸毒素，從而引發(fā)食物中毒。其中，金葡菌腸毒素所導致的食物中毒占比高達33%~45%左右。因此，需重點對此病菌進行檢測與預防。

1 金葡菌腸毒素（SE）分析

1.1 SE的化學組成與理化特性

金葡菌腸毒素屬于胞外蛋白質的一種，不同型之間的分子量較為相似，存在較為集中的谷氨酸、賴氨酸等氨期基酸。SE具有水溶性與鹽溶性特點，對蛋白酶的抵御能力較強，耐熱性極佳，沸水中30min內(nèi)活性不會喪失。失活溫度為218~248℃，且需30min才可完全消除其毒性。因其對蛋白酶分解抵抗能力強，因而易侵害胃粘膜。

1.2 SE的生物活性與致病作用

針對T細胞而言，SE的有絲分裂原作用較為顯著，可將多克隆T細胞進行非特異性激活，且不必事先進行致敏，也不具備種屬特異性。SE會與輔佐細胞MHC-Ⅱ類分子相結合，針對T細胞受體協(xié)同發(fā)揮作用。在有絲分裂原作用下，T細胞的免疫調(diào)節(jié)作用會被激活，會通過抑制或誘導作用而使T細胞釋放干擾素，或IL-2，并對后者進行表達，從而于體內(nèi)或體外對體液及細胞免疫產(chǎn)生抑制效果。SE的不同種類的血清型均會導致食物中毒，使之食用者出現(xiàn)嘔吐、腹瀉現(xiàn)象，并出現(xiàn)體溫升高或血小板下降現(xiàn)象，且存在心率加快等多種癥狀。

2 常用的金葡菌腸毒素的檢測方法分析

2.1 生物學檢測技術

此種動物敏感實驗是對患者的嘔吐物或感染病的食物進行采集，或對SA菌株培養(yǎng)液進行分離，將其注射于試驗動物體內(nèi)觀察病態(tài)反應，從而對待測物中是否含有金葡萄腸毒素進行判定的方法。但此方法靈敏度不佳且流程復雜，必須使用猴或豚鼠作為試驗動物，推廣應用相對困難。相關專家研制出了利用兔血T-細胞的體外檢測方法，無需使用動物進行檢測，靈敏度可提升至1pg/mL，實現(xiàn)了可定量且高靈敏度的檢測，且可節(jié)約檢測成本。

2.2 免疫血清學檢測技術

可實現(xiàn)定量檢測的方法需在免疫學技術基礎上而實現(xiàn)的，免疫方法有多個類別，如電化學免疫法、化學發(fā)光免疫法，熒光免疫法等，這些方法均需利用特異性抗體進行抗原的捕獲，再將其轉化成光學或電信號，從而測定腸毒素含量，此方法的優(yōu)點是靈敏度較高且檢測耗時短，可實現(xiàn)實時檢測。但檢測成本高是其主要應用弊端。目前已研制出了商業(yè)化試劑盒檢測方法，但并不是所有試劑盒均能測定腸毒素的類別。同時，利用部分免疫學方法檢測食品中的腸毒素時診斷結果并不精準。針對新型腸毒素檢測方面，目前的免疫學方法效果不佳，迫切需要進一步開發(fā)新的檢測方法。

2.3 聚合酶鏈反應（PCR）檢測技術

此方法是指利用敏感性較高且具有特異特征的聚合酶鏈反應而進行金葡萄基因表達腸毒量檢測的方法。PCR技術的特異性強，具有高敏感性，良好的可重復性，可在短時間內(nèi)精準診斷出病原，無法實現(xiàn)定量分析是其弊端所在。由于部分菌株有產(chǎn)毒基因，但由于此基因未被激活因而不能表達毒素，所以此方法的檢測結果并不能將反應體內(nèi)的生物學效應完全反應出來。因而此方法在食品檢測中應用并不廣泛。

2.4 生物傳感器檢測技術

食品毒素測方面的生物傳感器有三種，一是電化學免疫傳感器，此技術融合了電化學與生物技術，可對酶電極進行化學放大，也可識別出抗原抗體。二是光學生物傳感器，此方法無需參比電極，電磁場對其信號干擾較小，且具有較高的靈敏性。三是壓電晶體免疫傳感器，此方法融合了壓電質量傳感器及特異性免疫反應，可對液相中的SEB進行直接檢測，所應用儀器并不復雜，但靈敏度較低。

3 結語

食源性金黃葡萄球菌腸毒素檢測方法中，主要技術是血清學方法，且如聚合酶鏈反應技術的應用率也較高。未來需進一步縮小生物傳感器的體積，提升其靈敏度與實用性，從而提高其利用率，有利于食源性金黃葡萄球菌腸毒素檢測質效與精準度的提升。