詹云妮,黃 晨,,郝 昕,王梓萌,鄧擁軍,,房桂干,*
(1.中國林業(yè)科學(xué)研究院 林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所;生物質(zhì)化學(xué)利用國家工程實(shí)驗(yàn)室;國家林業(yè)和草原局林產(chǎn)化學(xué)工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江蘇省生物質(zhì)能源與材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇 南京 210042;2.南京林業(yè)大學(xué) 江蘇省林業(yè)資源高效加工利用協(xié)同創(chuàng)新中心,江蘇 南京 210037)
隨著世界經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展,人們對(duì)資源的消耗和需求量不斷提高,由此引發(fā)的能源危機(jī)、資源短缺和環(huán)境問題受到越來越多的關(guān)注。因此,開發(fā)利用可再生能源逐漸成為研究的熱點(diǎn)[1-2],而木質(zhì)纖維素制備燃料乙醇則是可再生能源研究的重要方向之一[3]。酶解木質(zhì)纖維制備燃料乙醇是較為常用的一種方法,原料中的木質(zhì)素和半纖維素的存在阻礙了纖維素酶與纖維素的接觸。因此,為獲得較高的酶解效率,首先需要對(duì)木質(zhì)纖維原料進(jìn)行預(yù)處理[4-5]。在眾多的預(yù)處理方法中,水熱預(yù)處理由于清潔、高效及低成本等特點(diǎn)而受到學(xué)者們的青睞[6]。水熱預(yù)處理不需要額外添加任何化學(xué)試劑,環(huán)境負(fù)荷小,具有良好的發(fā)展前景[7-8]。同時(shí),水熱預(yù)處理過程中木聚糖大量降解,且主要以低聚木糖(XOS)的形式存在于水解液中,因而也被廣泛應(yīng)用于XOS的制備。大量研究已證實(shí)XOS是一類益生元,能夠有效增殖動(dòng)物腸道內(nèi)的有益菌群,促進(jìn)動(dòng)物健康[9]。王毓等[10]以龍竹為原料,采用微波輔助水熱處理制備XOS,在反應(yīng)溫度為180 ℃時(shí),XOS產(chǎn)率為31.4%,較單獨(dú)的水熱預(yù)處理產(chǎn)生的單糖和副產(chǎn)物更少。Zhang等[11]研究發(fā)現(xiàn),甘蔗渣在200 ℃條件下自水解反應(yīng)10 min,XOS產(chǎn)率為50.4%,引入乙酸輔助甘蔗渣自水解,XOS混合物的平均聚合度明顯降低,低聚合度XOS(聚合度2~5)的產(chǎn)量達(dá)到53.0%。竹材具有資源豐富、生長快、周期短等特點(diǎn),且竹材的固碳量與生物量高于熱帶雨林植物,其作為生物質(zhì)煉制技術(shù)的原料擁有巨大的發(fā)展?jié)摿6,12]。本研究以貴州慈竹為原料,考察了不同預(yù)處理強(qiáng)度下,竹材中的纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的物理和化學(xué)結(jié)構(gòu)變化,探討預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)對(duì)酶解效果和XOS得率的影響,以期為竹材類生物質(zhì)資源的高效利用提供理論依據(jù)。
1.1 材料與儀器
慈竹由貴州赤天化紙業(yè)股份有限公司提供。竹材主要組成(以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)):葡聚糖44.5%、木聚糖15.8%、阿拉伯糖3.7%、木質(zhì)素29.1%和苯醇抽提物5.9%。纖維素酶(諾維信CTec2)和木聚糖酶(諾維信c2753),均購于Sigma-Aldrich(上海)公司,酶活力分別為250 FPU/g和174.5 U/g。
JWP50雙螺桿擠出機(jī),江蘇金沃機(jī)械有限公司;GNM300盤磨,北京春暉機(jī)械有限公司;Advanced D8X射線衍射(XRD)儀、TENSOR27傅里葉紅外光譜(FT-IR)儀,德國布魯克公司;Agilent 1260系列高效液相色譜(HPLC)儀、Bio-Rad Aminex HPX-87H色譜柱、示差折光檢測(cè)器,美國安捷倫科技公司。
1.2 水熱預(yù)處理
竹片首先經(jīng)自來水浸泡過夜,對(duì)浸泡后的竹片進(jìn)行雙螺桿擠壓以破碎竹細(xì)胞,從而減小物料尺寸;經(jīng)過雙螺桿擠壓的物料再次進(jìn)行盤磨處理,磨盤間距為0.2 mm。經(jīng)過處理的竹纖維尺寸約為1~2 mm。
竹材水熱預(yù)處理在甘油油浴中進(jìn)行(含有10個(gè)1 L的反應(yīng)罐)。將50 g絕干竹纖維置于反應(yīng)罐中,按固液比1 ∶10(g ∶mL)加入去離子水。密封油浴罐,將其置于油浴中,之后按1 ℃/min升溫至180 ℃,并分別保溫20、40、60、80、100和140 min。預(yù)處理結(jié)束后,依次將反應(yīng)罐取出,并迅速置于冷水中降至室溫。預(yù)處理物料和預(yù)水解液用濾袋分離,置于4 ℃冰箱中儲(chǔ)藏、備用。竹材水熱預(yù)處理時(shí),溫度和時(shí)間對(duì)預(yù)處理的影響,最終都可通過預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)(lgR0)表示。不同預(yù)處理?xiàng)l件的lgR0,按式(1)計(jì)算:
(1)
式中:t—保溫時(shí)間,min;T—預(yù)處理溫度,℃;w—與預(yù)處理相關(guān)的活化能,取值14.75[13]。
1.3 纖維素酶水解
酶水解實(shí)驗(yàn)在150 mL酶解瓶中進(jìn)行,每批稱取2.5 g(以絕干物料計(jì),下同)物料于150 mL酶解瓶中,加入1 mol/L 乙酸/乙酸鈉緩沖液2.5 mL調(diào)節(jié)體系pH值為4.8,然后分別加入纖維素酶25 FPU/g(以纖維素質(zhì)量計(jì),下同)、木聚糖酶174.5 U/g(以半纖維素質(zhì)量計(jì),下同)和適量去離子水,使反應(yīng)體系體積為50 mL。將酶解瓶置于50 ℃和150 r/min的搖床中水解72 h。酶解結(jié)束后,水解產(chǎn)物于10 000 r/min條件下離心10 min,取上清液測(cè)定其中的可發(fā)酵性糖(葡萄糖和木糖)濃度。預(yù)處理物料葡聚糖和木聚糖酶解率按式(2)和式(3)計(jì)算:
yc=m1×0.9/m2×100%
(2)
yh=m3×0.88/m4×100%
(3)
式中:yc—纖維素酶解率,%;m1—酶水解所得的葡萄糖質(zhì)量,g;m2—預(yù)處理底物中纖維素(葡聚糖)質(zhì)量,g;yh—半纖維素酶解率,%;m3—酶水解所得的木糖質(zhì)量,g;m4—預(yù)處理底物中半纖維素(木聚糖)質(zhì)量,g。
1.4 分析方法
1.4.1化學(xué)組分分析 葡聚糖、木聚糖、總木質(zhì)素(酸溶木質(zhì)素和酸不溶木質(zhì)素之和)含量采用美國可再生能源實(shí)驗(yàn)室(NREL)標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定[14]。
1.4.2物料得率及化學(xué)組分回收率 物料得率和化學(xué)組分回收率按式(4)和式(5)計(jì)算:
y=m5/m6×100%
(4)
r=m7/m8×100%
(5)
式中:y—物料得率,%;m5—預(yù)處理物料質(zhì)量,g;m6—初始物料質(zhì)量,g;r—化學(xué)組分回收率,%;m7—預(yù)處理物料剩余組分質(zhì)量,g;m8—初始物料中組分質(zhì)量,g。
1.4.3單糖含量的測(cè)定 所有可發(fā)酵糖(葡萄糖和木糖)含量均采用Agilent 1260系列HPLC儀測(cè)定,進(jìn)樣量10 μL,流動(dòng)相為0.005 mol/L H2SO4溶液、流速0.6 mL/min,柱溫55 ℃。
實(shí)驗(yàn)中低聚木糖(XOS)濃度采用酸水解法分析。首先離心除去預(yù)水解液中的不溶物,準(zhǔn)確移取5 mL 離心上清液至酸水解瓶中,加入等體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)8%的H2SO4溶液,使體系酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%?;靹蛎芊夂?,將酸水解瓶置于121 ℃下水解1 h,使體系中的XOS全部轉(zhuǎn)化為單糖。水解液中的XOS質(zhì)量濃度和得率由酸水解前后水解液中木糖質(zhì)量濃度的差值計(jì)算得出,公式見式(6)和式(7):
c=(c2-c1)×0.88
(6)
yx=m9/m10×100%
(7)
式中:c—XOS質(zhì)量濃度,g/L;c2—酸水解后木糖質(zhì)量濃度,g/L;c1—酸水解前木糖質(zhì)量濃度,g/L;yx—低聚木糖得率,%;m9—預(yù)處理液中低聚木糖的質(zhì)量,g;m10—原料中木聚糖的質(zhì)量,g。
1.4.4XRD分析 預(yù)處理樣品結(jié)晶度采用XRD儀測(cè)定,Cu Kα為發(fā)射源,入射線波長0.15 nm,配有Ni濾波片,測(cè)試過程中管壓40 kV,管流40 mA。X射線發(fā)生器功率為3 kW、新型9 kW轉(zhuǎn)靶,配有高速探測(cè)器D/tex-ultra。樣品的相對(duì)結(jié)晶度(ICr)根據(jù)Segal提出的經(jīng)驗(yàn)公式進(jìn)行計(jì)算[15],見式(8):
(8)
式中:I002—002晶格的極大衍射強(qiáng)度;Iam—無定形區(qū)背景衍射的散射強(qiáng)度。
1.4.5FT-IR分析 稱取水熱預(yù)處理前后樣品10 mg,按質(zhì)量比1 ∶100加入KBr(1 g),混合均勻。在10 MPa下對(duì)樣品進(jìn)行壓片后進(jìn)行紅外分析,測(cè)試過程中,掃描波數(shù)范圍為400~4000 cm-1。
2.1 水熱預(yù)處理?xiàng)l件優(yōu)化
2.1.1竹材化學(xué)組成及其回收率 竹材水熱預(yù)處理溫度為180 ℃,設(shè)置6個(gè)不同的預(yù)處理時(shí)間(20、40、60、80、100和140 min),對(duì)應(yīng)的預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)(lgR0)分別為3.66、3.96、4.13、4.26、4.36和4.50,未處理的竹材的強(qiáng)度系數(shù)為0。對(duì)原料竹材在不同預(yù)處理?xiàng)l件下進(jìn)行水熱預(yù)處理,預(yù)處理強(qiáng)度對(duì)竹材化學(xué)組分質(zhì)量分?jǐn)?shù)和組分回收率的影響如表1和圖1所示。
從表1可以看出,預(yù)處理物料的葡聚糖、木聚糖及木質(zhì)素質(zhì)量分?jǐn)?shù)均發(fā)生不同程度的變化。隨著預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)的增大,預(yù)處理物料得率逐漸從100%降低至41.7%,說明在預(yù)處理過程中,物料組分發(fā)生降解。當(dāng)預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)從0增至4.50時(shí),預(yù)處理物料中木聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)從15.8%降低至3.5%,表明水熱預(yù)處理過程中,木聚糖大量降解;隨著木聚糖的降解,預(yù)處理物料中木質(zhì)素的含量逐漸升高,木質(zhì)素質(zhì)量分?jǐn)?shù)從29.1%上升到34.9%,葡聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)先升高后降低,從44.5%上升到最大值59.7%再降低至55.5%,當(dāng)預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)提高至4.50 時(shí),預(yù)處理物料中葡聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)僅為55.5%,相比強(qiáng)度系數(shù)為4.36時(shí)降低了4.2個(gè)百分點(diǎn),表明在較高的預(yù)處理強(qiáng)度下葡聚糖也會(huì)發(fā)生降解。這與Moniz等[16]研究的水稻秸稈水熱預(yù)處理結(jié)果相一致,表明在水熱預(yù)處理過程中主要發(fā)生的是竹材木聚糖的脫除反應(yīng),同時(shí)保留了大部分葡聚糖和木質(zhì)素。
表1 水熱預(yù)處理對(duì)竹材化學(xué)組分質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響Table 1 Effect of the LHWP on the mass fraction of the bamboo chemical components
由圖1可知,隨著預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)的增加,竹材中葡聚糖和木質(zhì)素的回收率呈下降趨勢(shì),而木聚糖脫除率逐漸升高。預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)為3.66時(shí),竹材的木聚糖脫除率為54.6%;預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)增至3.96時(shí),木聚糖脫除率增加了18.5個(gè)百分點(diǎn),達(dá)到73.1%,該結(jié)果與表1中的結(jié)果相一致,表明水熱預(yù)處理中主要發(fā)生木聚糖的降解和溶解作用[17]。在水熱預(yù)處理高溫高壓條件下,竹材半纖維素側(cè)鏈的乙?;l(fā)生脫落并與體系中的自由氫離子形成乙酸,增強(qiáng)了預(yù)處理反應(yīng)體系的弱酸性環(huán)境,促進(jìn)了物料的自水解[18-19]。當(dāng)預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)超過3.96時(shí),木聚糖的脫除率增幅變緩。
圖1 預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)對(duì)化學(xué)組成的影響Fig.1 Effect of pretreatment intensity coefficiency on chemical components
2.1.2酶解效果 預(yù)處理物料的酶解效率是評(píng)價(jià)預(yù)處理效率的關(guān)鍵因素,對(duì)未經(jīng)處理和預(yù)處理的竹材進(jìn)行酶水解,并分析酶水解得率與木聚糖脫除率之間的關(guān)系,結(jié)果如圖2所示。從圖可知,未經(jīng)水熱預(yù)處理的竹材葡聚糖和木聚糖的酶解效率較低,分別僅為17.2%和27.2%。水熱預(yù)處理能夠顯著改善預(yù)處理竹材的酶水解效率,竹材葡聚糖和木聚糖酶解得率均隨著強(qiáng)度系數(shù)的增加而提高,當(dāng)預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)從0增至4.50時(shí),葡聚糖酶解得率從17.2%提高至79.0%,木聚糖酶解得率也從27.2%提高至92.0%。這是因?yàn)椋S著預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)的增加,預(yù)處理物料中木聚糖大量降解,物料化學(xué)結(jié)構(gòu)被破壞,葡聚糖因此暴露出來,增加了纖維素酶對(duì)纖維素的可及性[20],進(jìn)而提高了預(yù)處理竹材的酶水解效率。為進(jìn)一步明確木聚糖脫除對(duì)纖維素酶水解的影響,本研究探討了酶水解得率與木聚糖脫除率的關(guān)系(見圖3)。從圖中可以看出,葡聚糖和木聚糖酶水解得率與木聚糖脫除率之間有較強(qiáng)的線性關(guān)系,其R2分別為0.909和0.809,表明木聚糖的脫除確實(shí)能夠有效促進(jìn)葡聚糖的酶水解。
圖2 預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)對(duì)酶解率的影響Fig.2 Effect of pretreatment intensity coefficiency on the enzymatic hydrolysis yield圖3 木聚糖脫除率與酶解率的關(guān)系Fig.3 The correlation between xylan removal and enzymatic hydrolysis yield
2.1.3低聚木糖(XOS)得率 水熱預(yù)處理過程中,大量木聚糖發(fā)生降解,并主要以低聚糖的形式存在于水解液中[21],不同預(yù)處理體系中木聚糖降解產(chǎn)物XOS的濃度可見圖4。
圖4 預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)對(duì)XOS的影響Fig.4 Effect of pretreatment intensity coefficiency on the concentration of XOS
由圖4可知,水解液中XOS濃度隨著預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)的增加呈先上升后下降的趨勢(shì)。當(dāng)強(qiáng)度系數(shù)為3.96 時(shí),水解液中XOS質(zhì)量濃度最高,為8.7 g/L(得率55.3%)。XOS是一類重要益生元,能夠有效促進(jìn)動(dòng)物腸道有益菌群的增長,進(jìn)而有利于動(dòng)物機(jī)體健康[22-23],因此,XOS的高得率有助于實(shí)現(xiàn)竹材的高值化利用。當(dāng)預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)超過3.96時(shí),XOS濃度逐漸降低,在強(qiáng)度系數(shù)為4.50時(shí),水解液中XOS質(zhì)量濃度僅為0.5 g/L(得率3.1%)。這是因?yàn)殡S著預(yù)處理強(qiáng)度的增加,半纖維素逐漸降解,并以XOS的形式存在;而當(dāng)預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)較高時(shí),水解液中的XOS會(huì)繼續(xù)降解,產(chǎn)生木糖、糠醛等物質(zhì),導(dǎo)致XOS濃度下降。
從圖4還可看出,隨著預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)的增大,木糖濃度呈先上升后下降的趨勢(shì),當(dāng)強(qiáng)度系數(shù)為4.26 時(shí)木糖質(zhì)量濃度達(dá)到最大,為3.6 g/L。表明水熱預(yù)處理過程中,隨著預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)的增大,部分XOS會(huì)降解為木糖,而進(jìn)一步提高強(qiáng)度系數(shù),木糖也會(huì)分解。由此可知,水熱預(yù)處理是一種高效生產(chǎn)XOS的技術(shù),然而結(jié)合2.2節(jié)酶解率最高的條件為lgR0=4.50,與XOS質(zhì)量濃度最高的條件(lgR0=3.96)并不一致。因此,若利用水熱預(yù)處理對(duì)竹材進(jìn)行加工,如何在保證XOS得率的前提下,提高預(yù)處理物料的酶水解效率將是今后研究的重點(diǎn)。
2.2 物料理化性質(zhì)分析
2.2.1纖維素的結(jié)構(gòu)變化 纖維素是由結(jié)晶區(qū)和非結(jié)晶區(qū)交錯(cuò)聯(lián)結(jié)構(gòu)成的,纖維素結(jié)晶區(qū)占纖維素整體的百分比稱為纖維素的結(jié)晶度,纖維素的結(jié)晶度是影響酶水解的重要因素之一[24-25]。為深入了解水熱預(yù)處理對(duì)竹材纖維素結(jié)構(gòu)的影響,測(cè)定了不同預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)下,物料纖維素結(jié)晶度的變化,并分析了纖維素結(jié)晶度與酶水解得率的關(guān)系,如圖5和圖6所示。
從圖5可以看出,預(yù)處理后竹材纖維素結(jié)晶度呈增大趨勢(shì),原料竹材(lgR0=0)的纖維素結(jié)晶度為55.2%。當(dāng)預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)逐漸提高至3.96時(shí),竹材結(jié)晶度逐漸從55.2%至63.1%,這是因?yàn)榉墙Y(jié)晶態(tài)的半纖維素和木質(zhì)素的移除使得物料纖維素結(jié)晶度升高;繼續(xù)提高預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù),物料結(jié)晶度升高趨勢(shì)逐漸變緩,這可能由于在較高的預(yù)處理強(qiáng)度下,物料中結(jié)晶區(qū)纖維素也發(fā)生少量降解所致。
圖5 預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)對(duì)纖維素結(jié)晶度的影響Fig.5 Effect of pretreatment intensity coefficiency on the cellulose crystallinity
葡聚糖酶水解效率與纖維素結(jié)晶度的關(guān)系可見圖6。預(yù)處理竹材的酶解得率隨著結(jié)晶度的升高而升高,并且葡聚糖酶解率和結(jié)晶度間存在較強(qiáng)的線性關(guān)系,R2為0.807。通常認(rèn)為纖維素結(jié)晶度越低,物料酶解率越高。這與Li等[26]對(duì)楊木水熱預(yù)處理的研究結(jié)論相似。在水熱預(yù)處理過程中,盡管預(yù)處理物料的纖維素結(jié)晶度升高,但是其木聚糖也大量降解,使得纖維素可及度增加,因而促進(jìn)了纖維素酶對(duì)纖維素的水解。
圖6 纖維素結(jié)晶度與酶解率的關(guān)系Fig.6 Effect of the correlation between cellulose crystallinity and glucan hydrolysis yield
2.2.2紅外光譜分析 為進(jìn)一步確認(rèn)預(yù)處理過程中的組分變化,測(cè)定了不同預(yù)處理時(shí)間下竹材的紅外圖譜,結(jié)果如圖7所示。
圖7 竹材經(jīng)不同預(yù)處理強(qiáng)度水熱處理后的紅外光譜圖Fig.7 FT-IR spectra of bamboo pretreated by LHWP with different pretreatment intensity
從圖7中可以看出,預(yù)處理前后樣品的紅外光譜圖類似,均保持著原料的特征,說明預(yù)處理前后竹纖維的主要結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生變化。根據(jù)FT-IR光譜確定產(chǎn)物的種類,與纖維素相關(guān)的特征峰在895 cm-1(糖苷鍵)、1034 cm-1(C—O—C伸縮振動(dòng))、2893 cm-1(C—H伸縮振動(dòng))和3331 cm-1(O—H伸縮振動(dòng))處。圖中1046 cm-1附近為C—H 芳香環(huán)面內(nèi)振動(dòng);836 cm-1附近為木質(zhì)素中C—H平面彎曲振動(dòng)吸收,水熱預(yù)處理后該吸收峰減弱,可能原因是高溫使得部分木質(zhì)素發(fā)生降解而溶出[27-29]。與原料相比,預(yù)處理后的竹材由于半纖維素部分降解以及脫乙?;饔?,1238 cm-1處的醚鍵吸收峰逐漸減弱,表明在水熱預(yù)處理過程中,竹纖維細(xì)胞壁中組分溶出或降解時(shí)存在醚鍵斷裂。在植物細(xì)胞壁組成中,木質(zhì)素與周圍碳水化合物的鏈接方式包含芐基醚鍵和苯酯鍵[30]。這說明,在水熱預(yù)處理中,伴隨有木質(zhì)素和碳水化合物的溶出,這與前述竹材水熱預(yù)處理后組分變化分析結(jié)果吻合。
3.1隨著水熱預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)的增加,半纖維素(木聚糖)含量逐漸降低,而纖維素(葡聚糖)和木質(zhì)素含量逐漸升高,說明在水熱預(yù)處理過程中,主要發(fā)生的是木聚糖的降解。
3.2水熱預(yù)處理對(duì)酶解效果影響明顯,提高預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)(lgR0)可顯著提高酶解率。預(yù)處理強(qiáng)度4.5時(shí),葡聚糖酶解率79.0%,木聚糖酶解率92.0%,酶解率均比未處理物料提高50個(gè)百分點(diǎn)左右。
3.3水熱預(yù)處理是一類高效制備低聚木糖的技術(shù),低聚木糖濃度隨著預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)增加呈先上升后下降趨勢(shì),并且在預(yù)處理強(qiáng)度系數(shù)(lgR0)為3.96時(shí),低聚木糖質(zhì)量濃度最高,為8.7 g/L(得率55.3%);而纖維素酶水解效率最高的條件為lgR0=4.5。因此,如何在保證低聚木糖得率的前提下提高預(yù)處理物料的酶水解效率將是下一步研究的重點(diǎn)。