牛冷凍精液人工授精技術(shù)要點(diǎn)

歐陽(yáng)仕春

（西盟縣農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法大隊(duì)，云南西盟 665700）

牛冷凍精液人工授精技術(shù)是牛繁殖配種常用的成熟技術(shù)，人工輸精人員技術(shù)水平是影響牛人工授精妊娠率的主要因素。近年來(lái)，牛冷凍精液人工授精技術(shù)作為一項(xiàng)低成本、高效益的實(shí)用技術(shù)，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。根據(jù)省、市畜禽改良工作要求，西盟縣于2014年開(kāi)始免費(fèi)推廣牛冷凍精液人工授精技術(shù)，目前該技術(shù)已普及到全縣5鎮(zhèn)2鄉(xiāng)，受胎率在85%以上。

1 現(xiàn) 狀

1.1 基礎(chǔ)生產(chǎn)情況

截至2019年12月，西盟縣建成牛場(chǎng)9個(gè)，牛存欄17 642頭，出欄6395頭，能繁母牛6554頭，當(dāng)年生仔畜3932頭；建有凍精液供應(yīng)站1個(gè)，鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）建有牛冷凍精液人工授精輸配點(diǎn)2個(gè)，培養(yǎng)人工授精技術(shù)骨干64人?？h級(jí)設(shè)有品種改良站1個(gè)，為鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）人工授精輸配點(diǎn)提供液氮、凍精庫(kù)房1間，配有整套人工授精所需器械。

1.2 牛冷凍精液人工授精成果

西盟縣轄5鎮(zhèn)2鄉(xiāng)36個(gè)村民委員會(huì)3個(gè)社區(qū)367個(gè)村民小組，2014年開(kāi)始免費(fèi)推廣牛冷凍精液人工授精技術(shù)，主要推廣西門(mén)塔爾、短角牛、云嶺黃牛等優(yōu)良品種。目前該技術(shù)已普及到全縣5鎮(zhèn)2鄉(xiāng)，共輸配發(fā)情母牛2547頭次，產(chǎn)雜交犢牛2280頭，受胎率在85%以上。

2 冷凍精液的貯存和運(yùn)輸

冷凍精液應(yīng)保存在保溫效果良好的液氮罐中，并保證所有精液浸在液氮中，每周檢查1次液氮罐，如發(fā)現(xiàn)液氮消耗顯著增加，或容器外殼掛霜，應(yīng)及時(shí)更換容器。液氮不足總?cè)萘康?/3應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充，防止因缺少液氮而使溫度回升導(dǎo)致精子死亡。液氮和凍精的液氮罐應(yīng)放在陰涼避光處，避免陽(yáng)光直射和接觸揮發(fā)性氣體。移動(dòng)和運(yùn)輸液氮和凍精時(shí)應(yīng)輕拿輕放，不得傾斜，以免液氮溢出，嚴(yán)禁用任何物品將罐口封嚴(yán)。提取冷凍精液時(shí)精液在罐口的空氣中停留的時(shí)間越短越好，時(shí)間不得超過(guò)10 s。

3 技術(shù)要點(diǎn)

3.1 掌握母牛生殖規(guī)律

黃牛8～16月齡性成熟（初情期），發(fā)情周期18～23 d，平均21 d，懷孕期282 d；水牛13～24月齡性成熟（初情期），懷孕期305 d。

3.2 配種母牛壯膘

配種期到來(lái)之前，適齡母牛應(yīng)具有中等體況。體況較差的?？蛇m當(dāng)調(diào)整飼料配比，增加營(yíng)養(yǎng)和補(bǔ)食次數(shù)、并延長(zhǎng)放牧?xí)r間、割草喂牛，促使母牛發(fā)情排卵。平時(shí)要注意營(yíng)養(yǎng)平衡，防止因蛋白質(zhì)和能量飼料攝入過(guò)多造成母牛過(guò)度肥胖，影響配種質(zhì)量。

3.3 掌握母牛發(fā)情癥狀

發(fā)情是母牛人工授精的前提，接受爬跨是母牛發(fā)情的標(biāo)志。母牛發(fā)情時(shí)會(huì)出現(xiàn)一系列的發(fā)情癥狀，根據(jù)癥狀來(lái)進(jìn)行準(zhǔn)確的發(fā)情鑒定是能否全配全準(zhǔn)的關(guān)鍵，其發(fā)情表現(xiàn)為4個(gè)階段。

3.3.1 發(fā)情前期

母牛精神不安、尿頻、爬跨公牛、陰道濕潤(rùn)呈粉紅色、外陰部稍有腫脹。

3.3.2 發(fā)情盛期

陰門(mén)明顯腫脹、黏液增多呈雞蛋清樣、子宮頸外周松弛，主動(dòng)舉尾拱腰穩(wěn)穩(wěn)當(dāng)當(dāng)?shù)亟邮茉嚽楣５呐揽?，愿意交配?/p>

3.3.3 發(fā)情后期

外陰腫脹開(kāi)始消失、黏液變稠混濁，試情公牛仍追隨，但母牛不讓接近。

3.3.4 發(fā)情末期

發(fā)情癥狀完全消失、黏液呈黃色塊狀，試情公牛已不跟隨母牛。

3.4 適時(shí)輸精

3.4.1 準(zhǔn)確的發(fā)情觀察

發(fā)情是母牛卵巢卵泡發(fā)育的外在表現(xiàn)，一般情況下，母牛發(fā)情后12～16 h排卵，可以在母牛表現(xiàn)精神平穩(wěn)，發(fā)情母牛不讓試情公牛爬跨后12～18h開(kāi)始輸精。

3.4.2 準(zhǔn)確掌握輸精時(shí)間

母牛發(fā)情持續(xù)時(shí)間為4～18 h，排卵時(shí)間在發(fā)情結(jié)束后10～12 h，因此，輸精的最佳時(shí)間應(yīng)在母牛發(fā)情后的10～12 h（外陰部腫脹開(kāi)始消失，由陰道流出的黏液變黏稠）。為確保受胎率，可在母牛發(fā)情接受爬跨后8～12 h進(jìn)行第一次輸精，間隔8～12 h進(jìn)行第二次輸精。一般來(lái)說(shuō)，年老體弱的母牛發(fā)情持續(xù)期較短，排卵較早，配種時(shí)間要適當(dāng)提早。青年母牛發(fā)情持續(xù)期較長(zhǎng)，排卵較晚，配種時(shí)間要適當(dāng)延遲。群眾常說(shuō)“老配早，少配晚，不老不少配中間”就是這個(gè)道理。

3.4.3 準(zhǔn)確掌握輸精部位

牛的適宜輸精部位是子宮體，人工授精時(shí)可將精液輸送到子宮體部位，以保證推出的精液流入2個(gè)子宮角內(nèi)。如果輸精時(shí)間較晚（如直腸觸診卵泡已經(jīng)排卵），則可以將精液輸?shù)脚怕崖殉矀?cè)的子宮角內(nèi)。

3.5 直腸把握輸精法

3.5.1 人工輸精前的準(zhǔn)備

（1）輸精器械的準(zhǔn)備。輸精槍、消毒輸精外套管、直腸檢查塑料長(zhǎng)臂手套、鑷子和剪刀。

（2）發(fā)情牛保定與消毒。將輸精適期的母牛牽（趕）入配種保定架內(nèi)，保定好后用栓尾繩將尾巴吊高系于一側(cè)或?qū)Ｈ死∨Ｎ?，用清潔溫水把外陰周?chē)锤蓛?，再?.1%的高錳酸鉀溶液清洗消毒或用酒精棉球消毒母牛外陰。

（3）輸精技術(shù)人員的準(zhǔn)備。穿戴好工作服，將雙手指甲剪短并磨光，一只手戴上長(zhǎng)臂手套，涂上潤(rùn)滑劑（清水、肥皂或?qū)Ｓ脻?rùn)滑劑），另一只手可戴上一次性手套。

（4）冷凍精液的解凍。先準(zhǔn)備一盆37～38 ℃恒溫水，將細(xì)管凍精從液氮中迅速取出后手拿細(xì)管上端（封裝精液后的封口）立即放入37～38 ℃溫水中并輕緩游動(dòng)10 s使管壁受熱均衡后取出。

（5）精液細(xì)管裝槍。解凍后，取出精液并用消毒衛(wèi)生紙擦干細(xì)管外壁水分，然后用酒精燈火焰或者75%酒精消毒好的細(xì)管剪（剪刀）距細(xì)管封口端1.2～1.5 cm處剪去封口，將棉塞端平行裝入輸精槍中，注意裝槍前應(yīng)把輸精鋼芯退到比細(xì)管稍長(zhǎng)的位置，再將裝有精液細(xì)管的輸精槍裝入輸精外套管內(nèi)，剪口端應(yīng)與輸精外套管緊密連接，防止精液推出后回流到輸精外套管內(nèi)，在進(jìn)入母牛生殖道前應(yīng)避免任何污染。

3.5.2 輸精

（1）輸精槍插入和定位。一律采用直腸把握輸精法，輸精人員先拎起母牛尾巴下端將尾巴根抬起，輕輕觸摸刺激肛門(mén)，使肛門(mén)括約肌松弛；然后將五指并攏呈錐形緩緩插入直腸內(nèi)（應(yīng)避免與努責(zé)的直腸蠕動(dòng)相反方向移動(dòng)），清除直腸淺部的糞便，用衛(wèi)生紙擦拭母牛外陰；臂膀用力往下按壓使陰門(mén)張開(kāi)（或助手將陰門(mén)掰開(kāi)），另一只手持輸精器（槍?zhuān)?，?5°～45°（避開(kāi)尿道口）自陰門(mén)作斜上方緩緩插入陰道，進(jìn)入陰道外口后改為水平或向下方插入陰道內(nèi)。

（2）輸精槍通過(guò)子宮頸。當(dāng)輸精槍頭插到外子宮頸口時(shí)，頂破保護(hù)膜，將直腸中手指向子宮口或下方移動(dòng)，用食指、中指、無(wú)名指和小指將子宮頸托起，掌心向上、小指向后，握住子宮頸（8 cm），但防止緊握；左右手協(xié)同配合，使輸精槍前端搭在小指上，引導(dǎo)槍頭插入外子宮頸口內(nèi)，使輸精器越過(guò)子宮頸管皺襞，到達(dá)子宮頸管中央部時(shí)，握子宮頸的手逐漸往前推進(jìn)，食指在內(nèi)子宮頸口位置，指頭相互配合把握好子宮頸并左右手配合將輸精槍頭部插入到子宮頸管深部5～6 cm（子宮頸管深部注入法）或子宮體分叉處（子宮內(nèi)注入法）以保證推出的精液可注入2個(gè)子宮角內(nèi)。如果輸精時(shí)間較晚（如直腸觸診卵泡已經(jīng)排卵），則可以將精液輸?shù)脚怕崖殉矀?cè)的子宮角內(nèi)，以保證到達(dá)授精部位的有效精子數(shù)。

（3）注入精液。確認(rèn)輸精器已進(jìn)入子宮頸管深部（5～6 cm）或子宮體分叉處（輸精槍?xiě)?yīng)稍向后退出一點(diǎn)）向前推動(dòng)輸精槍鋼芯，緩慢注入精液（子宮頸管深部注入法）或注入到子宮體分叉處（子宮內(nèi)注入法），也可注入到有卵泡發(fā)育一側(cè)子宮角內(nèi)或兩個(gè)子宮角內(nèi)，每角各一半（用于超排后輸精）；注入后，為了防止精子的逆流，用直腸里的手繼續(xù)把握子宮頸管30 s至1 min，再緩慢地將輸精槍撤出，并將子宮頸稍向上提動(dòng)（特別是子宮頸開(kāi)口較大的母牛）。取出輸精槍后，應(yīng)觀察輸精槍外套管，檢查黏附的黏液和輸精槍前端是否有血跡等情況。

（4）記錄。輸精完成后應(yīng)及時(shí)、詳細(xì)記錄配種情況，如牛編號(hào)、胎次、上次產(chǎn)犢時(shí)間、發(fā)情時(shí)間、配種時(shí)間、配種次數(shù)、精液用量、配種人員、公牛精液等信息。

3.6 加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)管理

母牛配種后1～2 h，不要?jiǎng)×疫\(yùn)動(dòng)，盡量避免飲水或吃食過(guò)飽。對(duì)妊娠牛，需改善飼養(yǎng)條件，保證母體與胎兒正常發(fā)育，配種后15 d內(nèi)夜間補(bǔ)料，同時(shí)加喂麩皮1～1.5 kg，并供給含有少量食鹽的清潔飲水，促進(jìn)受精卵著床。母牛懷孕期間，喂給含蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)豐富的飼料，以適應(yīng)母牛生長(zhǎng)以及胎兒、胎盤(pán)、子宮體發(fā)育的需要。圍產(chǎn)前期母牛應(yīng)補(bǔ)充低鉀、低鈣飼料，減少產(chǎn)前和產(chǎn)后乳房水腫，還應(yīng)該提供足量的維生素A、維生素D、維生素E（也可肌內(nèi)注射），以防胎衣不下。嚴(yán)禁投喂發(fā)霉、變質(zhì)、冰凍、有毒、酸度過(guò)大或有強(qiáng)烈刺激性的飼料，以防腸炎、流產(chǎn)、弱胎或死胎。牛舍環(huán)境要安靜，防止因過(guò)度驚嚇、擠撞、滑跌、鞭打或打架等引起流產(chǎn)。